Оценка инфицированности ткани предстательной железы вирусами семейства Herpesviridae и папилломы человека при раке предстательной железы

• Автор: Самсонов, Роман Борисович
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 100 с. : 3 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Оглавление
Список используемых сокращений и терминов Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1 РПЖ. Биология и диагностика
1.2 Факторы риска развития РПЖ
1.3 Возможная роль инфекции в возникновении РПЖ
1.3.1 Инфекции и РПЖ: гипотезы
1.3.2 Инфекции и РПЖ: практические наблюдения
Вирусные инфекции предстательной железы и их ассоциация с РПЖ
1.4.1 Семейство Retroviridae
1.4.2 Семейство Papovaviridae
1.4.2.1 HPV - папилломавирус человека
1.4.2.2 BKV - полиомавирус ВК
1.4.3 Семейство Herpesviridae
1.4.3.1 Вирус Эппштейна-Барр
1.4.3.2 Вирус Саркомы Капоши
1.4.3.3 Цитомегаловирус человека Глава 2. Материалы и методы
2.1. Характеристика исследуемого материала
2.2. Выделение ДНК из архивных образцов
2.3. Выделение вирусных ДНК из суспензий клеток

2.4. Полимеразная цепкая реакция
2.5 Праймеры, использованные в работе
2.6 Электрофорез
Лигирование фрагментов вирусных ДНК в плазмидный

вектор. Клонирование
Приготовление электрокомпетентных клеток. Трансформация
2.8 бактериальных клеток плазмидными конструктами, содержащими вставку вирусной ДНК
2.9 Наращивание и выделение плазмид со вставкой
2.10 Приготовление гибридизационных ДНК-зондов
2.11 Приготовление гистологических срезов
2.12 In situ гибридизация
Световая микроскопия и фотодокументация гистологических

препаратов
2.14 Статистическая обработка данных
Глава 3. Результаты собственных исследований
Анализ инфицированности ткани ПЖ методом полимеразной цепной реакции
Анализ инфицированности ткани ПЖ методом гибридизации

in situ
Сопоставление данных in situ гибридизации с показателем пятилетней безрецидивной выживаемости.
Глава 4. Обсуждение результатов работы
Инфицированность ткани ПЖ методом полимеразной цепной реакции.
4.2 Инфицированность ткани ПЖ методом гибридизации in situ.

выводы
Литература

Вирус имеет выраженную тропность к В-лимфоцитам, и считается, что у иммунокомпетентных носителей местом латентизации являются лимфоидные органы (Thompson, Kurzrock, 2004). Инфицирование В-клеток осуществляется через взаимодействие вируса с рецептором CD21. Исследования показали, что клеточный тропизм EBV не ограничен взаимодействием с CD21, поскольку вирус был также обнаружен в CD21-негативных клетках.
Геном EBV представляет собой двойную спираль ДНК около 172 т.п.н., вирионная ДНК вируса линейная, но в латентно инфицированых клетках ДНК существует в эписомальной форме. Жизненный цикл вируса может осуществляться по литическому (геном полностью экспрессирован, цикл заканчивается выходом зрелых вирионов) или лизогенному сценарию (экспрессирована небольшая часть генома, сборки вирусных частиц не происходит). Исследования показали, что только латентная инфекция EBV, соответствующая лизогении, ассоциирована со способностью трансформировать клетки в эксперименте (Гурцевич, 2004). Стратегия, которую EBY использует во время латентной инфекции для ухода от иммунного контроля хозяина, заключается в следующем: 1) минимальная экспрессия антигенов EBV, контролируемых цитотоксическими лимфоцитами хозяина, 2) подавление экспрессии молекул клеточной адгезии, 3) выработка вирусных цитокинов, ингибирующих действие цитотоксических лимфоцитов хозяина. Среди генов латентной инфекции, обладающих трансформирующими потенциями, важную роль играют латентные мембранные белки LMP1 и LMP2A, а также ядерные белки EBNA-1 и EBNA-2, ведущие клетку во время латентной инфекции к иммортализации (Kelly et al, 2009). У здоровых лиц ранняя фаза вызванной вирусом В-клеточной пролиферации завершается нарастающим Т-клеточным иммунным ответом, что сопровождается уничтожением большей части инфицированных клеток цитотоксическими Т-
лимфоцитами. Несмотря на это, полного уничтожения популяции В-