Клинико-генетические особенности формирования бронхообструктивного синдрома при моногенных (муковисцидоз) и мультифакториальных (бронхиальная астма) заболевания легких

• Автор: Келембет, Наталья Анатольевна
• Шифр специальности: 14.00.43
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 126 с. : 38 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Г ЛАВА 1. Обзор литературы
1.1 Клинический полиморфизм при муковисцидозс как отражение генетической гетерогенности болезни
1.1.1 Дефиниция, этиопатогенез, генетика муковисцидоза
1.1.2. Современные представления о течении муковисцидоза
1.2. Бронхиальная астма
1.2.1. Определение. Формирование представлений о генетической природе бронхиальной астмы
1.2.2. Патогенез
1.3. Факторы, участвующие в развитии хронического воспаления и бронхиальной обструкции
1.3.1 Цитокины. Общая характеристика
1.3.2 Интерлейкины
1.3.2.1 Интерлейкин
1.3.2.2. Гены интерлейкинов и их рецепторов
1.3.2.2.1. Полиморфизм гена интерлейкина
1.3.2.2.2. Полиморфизм гена альфа цепи рецептора интерлейкина
1.4 Система детоксикации ксенобиотиков
1.4.1 Общая характеристика
1.4.2 Глютатион-Б-трансферазы и их роль в предрасположенности к
болезням органов дыхания
1.4.2.1 Глутатион-Б-трансфераза классаМ
1.4.2.2 Глутатион-Б-трансфераза класса Т
1.5 ИО-синтазы и роль оксида азота в организме
1.5.1. Полиморфизм гена ГЮ-синтазы 1 типа
1.5.2. Полиморфизм гена эндотелиальной 1ЧО-синтетазы (еЫОБ)
Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Общая характеристика обследованного контингента больных и методы формирования клинических групп
2.2 Общие методы исследования
2.3 Специальные методы исследования
2.3.1 Микробиологические методы исследования
2.3.2 Молекулярно-генетические методы исследования
2.3.2.1. Реактивы, ферменты, биопрепараты, оборудование
2.3.2.2. Экстракция геномной ДНК из лимфоцитов периферической
крови
2.3.2.3 Проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР)
2.3.2.4 Гидролиз ПЦР-фрагментов
2.3.2.4.1 ПДРФ-анализ фрагмента гена 1Ь
2.3.2.4.2 ПДРФ-анализ фрагмента гена 1Г
2.3.2.5 Электрофорез в ПААГ и визуализация результатов
2.3.3 Определение концентрации общего 1Е и 1Ь-4 методом

иммуноферментного анализ
2.3.4 Математические методы анализа
Глава III. Результаты исследования и обсуждение
3.1 Клинико-генетические особенности группы больных MB
3.1.1. Клинико-лабораторная и функциональная характеристика больных

3.1.2. Анализ лабораторных данных и данных инструментального обследования
3.1.3 Анализ частот генотипов генов GSTT1 и GSTM1 в группе больных MB и в контрольной группе здоровых доноров Северо-западного региона

3.1.4. Анализ частот генотипов и аллелей гена интерлейкина 4 в группе больных MB и контрольной группе здоровых доноров Северо-западного региона РФ
3.1.5. Анализ частот генотипов и аллелей гена альфа цени рецептора интерлейкина 4 в группе больных MB и контрольной группе здоровых доноров Северо-западного региона России !
3.1.6. Анализ частот генотипов и аллелей генаNO-синтазы 1 типа (NOS1) в группе больных MB и контрольной группе здоровых доноров Северо-западного региона России
3.1.7. Анализ частот генотипов и аллелей гена эндотелиальной NO-синтазы (eNOS) в группе больных MB и контрольной группе здоровых допоров Северо-западного региона России
3.2 Клинико-генетические особенности группы больных бронхиальной астмой
3.2.1. Клинико-лабораторная и функциональная характеристика больных

3.2.2. Анализ лабораторных данных и данных инструментального обследования
3.2.3 Анализ частот генотипов генов GSTT1 и GSTM1 в группе больных БА
и в контрольной группе здоровых доноров Северо-западного региона РФ
3.2.4. Анализ полиморфизма генов интерлейкина 4 (IL-4) и альфа цепи рецептора интерлейкина 4 (IL-4R) в группе больных БА и контрольной
группе здоровых доноров Северо-западного региона РФ
3.2.4.1. Анализ частот генотипов и аллелей гена интерлейкина
3.2.4.2. Анализ частот генотипов и аллелей гена альфа цепи рецептора интерлейкина
3.2.5. Анализ полиморфизмов генов NO-синтазы 1 типа (NOS1) и эндотелиальной NO-синтазы (eNOS) в группе больных БА и в контрольной группе здоровых доноров Северо-западного региона России
3.2.5.1. Анализ частот генотипов и аллелей гена NO-синтазы
типа
3.2.5.2. Анализ частот генотипов и аллелей гена эндотелиальной NO-синтазы (eNOS)
3.3 Сравнительная характеристика бронхообструктивного синдрома у больных с моногенным (муковисцидоз) и мультифакториальным (бронхиальная астма) заболеваниями органов дыхания
3.3.1. Сравнительная характеристика лабораторных данных и данных инструментального обследования у больных MB и БА

3.3.2 Сравнительный анализ частот генотипов генов GSTT1 и GSTM1 в группах больных MB и Б А
3.3.3. Анализ полиморфизма генов интерлейкина 4 (IL-4) и альфа цепи рецептора интерлейкина 4 (IL-4R) в группах больных MB, БА и в контрольной группе
3.3.3.1. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей гена интерлейкина 4 (IL-4)
3.3.3.2. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей гена
альфа цепи рецептора интерлейкина 4 (IL-4R)
3.3.4. Анализ полиморфизмов генов NO-синтазы 1 типа (NOS1) и эндотелиальной NO-синтазы (eNOS) в группах больных MB, БА и в контрольной группе
3.3.4.1. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей гена NO-синтазы 1 типа (NOS1)
3.3.4.2. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей гена эндотелиальной NO-синтазы (eNOS)
3.3.5. Анализ сочетанного распределения полиморфных вариантов генов
GST Т1 и М1, IL-4, IL-4Ra, NOS 1, eNOS
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

развития различных заболеваний, в том числе заболеваний легких (Brockmoller J., 1996). Десинхронизация этих процессов может наступить вследствие одновременного действия разных ксенобиотиков или в результате неблагоприятного сочетания в организме разных по своей активности изоформ ферментов детоксикации, особенно неблагоприятно сочетание высокой активности ферментов фазы 1 и низкой активности ферментов фазы 2. Именно в такой ситуации повышенная чувствительность к различным фармпрепаратам и предрасположенность к некоторым мультифакториальным заболеваниям выражена особенно сильно.
1.4.2 Глютатион-Б-трансферазы и их роль в предрасположенности к болезням органов дыхания.
Полиморфизм ферментов семейства глютатион-8-трансфераз
(GSTs) определяет индивидуальную чувствительность организма к
воздействию факторов внешней среды (Board Р., 1988). Глутатион относится к водорастворимым антиоксидантам, присутствует в высоких концентрациях в каждой клетке и внеклеточно. В частности, он содержится в избытке в жидкости, выстилающей эпителий легких, которая является первой линией защиты от ингалированных оксидантов (Rahman I., 1999; MacNee W., 1999).
К настоящему времени у человека описано несколько классов
цитозольных глютатион-Б-трансфераз: альфа (GSTA), мю (GSTM), пи (GSTP), тэта (GSTT), каппа (GSTK), сигма (GSTS), омега (GSTO) и зета (GSTZ). Деление на классы основано на степени гомологии
аминокислотных последовательностей этих ферментов и их иммунореактивности. Некоторые из генов, кодирующих этих белки, характеризуются значительным популяционным полиморфизмом.
1.4.2.1 Глутатион-Б-трансфераза класса М.
Глутатион-8-трансферазы класса р у человека экспрессируются преимущественно в легких. Выявлено пять различных генов, кодирующих глутатион-8-трансферазы класса ц (GSTM1, М2, М3, М4, М5). Ген,