Использование ДНК-технологий для оценки и изменения генома сельскохозяйственных животных

• Автор: Калашникова, Любовь Александровна
• Шифр специальности: 06.02.01
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Лесные Поляны, Московской обл.
• Количество страниц: 379 с. : ил.

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ПЛЕМЕННОГО ДЕЛА (ВНИИплем)
На правах рукописи
КАЛАШНИКОВА ЛЮБОВЬ АЛЕКСАНДРОВНА
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДНК-ТЕХНОЛОГИЙ ДЛЯ ОЦЕНКИ И ИЗМЕНЕНИЯ ГЕНОМА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
Специальность 06.02.01. - Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных
ДИССЕРТАЦИЯ
на соискание ученой степени доктора биологических наук

Лесные Поляны Московской области

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Раздел I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Структура и полиморфизм митохондриальной ДНК сельскохозяйственных животных
1.2. Структура и полиморфизм повторяющейся фракции генома сельскохозяйственных животных
1.3. Полиморфизм уникальных генов сельскохозяйственных животных
1.4. Интродукция генов в геном сельскохозяйственных животных
Раздел II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава I. ГЕНОТИПИРОВАНИЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
ПО МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДНК
1.1. Объект, материал и методы исследований
1.2. Разработка метода рестрикционного анализа
мтДНК крупного рогатого скота
1.3. Рестрикционный анализ мтДНК крупного рогатого скота
1.4. Характеристика полиморфных вариантов мтДНК крупного рогатого скота
1.5. Разработка метода амплификации участка Д-петли мтДНК крупного рогатого скота

1.6. Рестрикционный анализ Д-петли мтДНК
крупного рогатого скота
1.7. Расположение сайтов рестрикции в регуляторном регионе Д-петли мтДНК крупного рогатого скота
Глава 2. РЕСТРИКЦИОННЫЙ АНАЛИЗ ПОВТОРЯЮЩИХСЯ
ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ ДНК ОВЕЦ И КОЗ
2.1. Объект, материал и метод исследования
2.2. Выбор рестриктаз, позволяющих выявлять паттерны повторяющейся ДНК овец и коз
2.3. Рестрикционный анализ повторяющейся ДНК овец
2.3.1. Характеристика рестрикционных фрагментов повторяющейся фракции генома овец
2.3.2. Доминантная повторяющаяся единица сателлитной ДНК овец
2.3.3. Сравнительный рестрикционный анализ повторяющейся ДНК овец различных пород
2.4. Рестрикционный анализ повторяющейся ДНК коз
2.5. Характеристика межвидовых маркеров геномов
овец и коз
2.6. Генотипирование химерного животного овце-козла .208 Глава 3. ГЕНОТИПИРОВАНИЕ СВИНЕЙ ПО ИУЯ - ГЕНУ
3.1. Объект исследования, материал и методы
3.2. Определение оптимальных параметров ДНК-технологии выявления мутации в ИУЯ
3.3. Диагностика мутации ИУЯ - гена свиней
3.4. Анализ популяции свиней скороспелой мясной породы на предрасположенность к злокачественной гипертермии

ческих перестроек может приводить к возникновению генетически обусловленных заболеваний. Горячими точками митотической рекомбинации являются многие локусы тандемных повторов (A.J.Jeffreys et al., 1985а). Структурные изменения хромосом при перестановке блоков влияют на функционирование близко расположенных генов, изменяя их активность.
Повторяющиеся последовательности расположены в геноме кластерно (альфа-стДНК, рибосомные гены и др.) или диспергированы по хромосомам (H.J.Cooke, 1979). Они могут служить для определения хромосомы, её отдельного локуса и анализа генетического сцепления. Так, гипервариабельные повторяющиеся последовательности с успехом были использованы для исследования генетического сцепления у крупного рогатого скота (V.Georges et al., 1990).
Особую значимость приобретает изучение многократно повторяющихся последовательностей ДНК половых хромосом, что связано с успехами экспериментов по исследованию молекулярногенетической детерминации пола сельскохозяйственных животных, в частности, крупного рогатого скота (J.Regret et al., 1990).
Разработка методов генетического маркирования животных по повторяющимся последовательностям ДНК является насущной необходимостью в связи с реализацией программ по сохранению и использованию генетических ресурсов. Метод фингерпринта, регистрирующий рестриктное расщепление гипервариабельных участков повторяющихся последовательностей, позволяет выявить наибольшее количество полиморфных рестриктных фрагментов для анализа, однако получение фингерпринтов методами ДНК-гибридизации с использованием радиоактивного мечения является трудоёмкой и достаточно дорогостоящей процедурой.