Исследование механизмов взаимодействия лимбических структур мозга при экспериментальном эпилептогенезе

• Автор: Синельникова, Виктория Владимировна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 136 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Структурные и биохимические особенности гиппокампа, медальной
септальной области, пириформной коры и амигдалы
1Л. Гиппокамп
1.2. Медиальная септальная область
1.3. Пириформная кора
1.4. Амигдала
1.5. Связи гиппокампа, медиальной септальной области, пириформной
коры и амигдалы
2. Осцилляторная активность в коре и лимбических структурах
3. Общие представления об эпилепсии. Роль лимбических структур в
эпилептогенезе
3.1. Эпилепсия как заболевание
3.2. Височная эпилепсия
3.3. Значение внутригиппокампальных изменений при височной эпилепсии
3.4. Значение амигдалы в развитии височной эпилепсии
3.5. Роль пириформной коры в эпилептогенезе
3.6. Роль медиальной септальной области в развитии височной эпилепсии
4. Модели височной эпилепсии на животных
4.1. Эпилептический статус
4.2. Пилокарпиновая модель височной эпилепсии
4.3. Киндлинг
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Модели височной эпилепсии
2. Проведение электрофизиологических экспериментов
3. Определение экспрессии с-Боз
4. Морфологический контроль. Окраска по Нисслю и Тимму
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Суммарная электрическая активность и корреляционные отношения
пириформной коры, медиальной септальной области, гиппокампа и центрального ядра амигдалы в контроле

2. Изменения электрической активности в передне-мозговых структурах
на литий-пилокарпиновой модели эпилепсии
2.1. Активность пириформной коры, медиальной септальной области,
гиппокампа и центрального ядра амигдалы во время литий-пилокарпинового эпилептического статуса
2.2. Выявление формирования эпилептического очага посредством
гистологического контроля
2.3. Активность пириформной коры, медиальной септальной области,
гиппокампа и центрального ядра амигдалы после эпилептического статуса
3. Распространение патологической активности, выявленное
иммунохимической детекцией с-Роь
4. Изменения электрической активности гиппокампа и медиальной
септальной области на модели киндлинга
4.1. Вызванные ответы в гиппокампе и медиальной септальной области при
киндлинге
4.2. Электрическая активность гиппокампа и медиальной септальной
области у эпилептизированных животных
5. Изучение активности гиппокампа при временном функциональном
отключении медиальной септальной области
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
1. Суммарная электрическая активность и корреляционные отношения гиппокампа, медиальной септальной области, пириформной коры и амигдалы
в здоровом мозге
2. Предполагаемые клеточные механизмы нарушения ритмической
активности и корреляционных отношений структур в эпилептическом мозге
3. Последовательность активации структур мозга при инициаци
эпилептического статуса
4. Роль медиальной септальной области в генерации острой судорожной активности в гиппокампе. Предполагаемые клеточные механизмы изменения
септо-гиппокампальных отношений в эпилептическом мозге
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АКГ - автокорреляционная гистограмма
ВПСП - возбуждающий постсинаптический потенциал
ВЭ - височная эпилепсия
ГАМК - у-аминомасляная кислота
ГАД (GAD) - глутаматдекарбоксилаза
ГлуР5-КР - каинатные рецепторы, содержащие 5-ую субъединицу
ГЭБ - гематоэнцефалический барьер
Ккр - коэффициент кросс-корреляции
МВЭ - медиальная височная эпилепсия
МДТ - медиодорзальное таламическое ядро
МРТ - магнитно-резонансная томография
МСО - медиальная септальная область
ПВ - парвальбумин
ПК - пириформная кора
ПП - перфорирующий путь
СГ - спектральная гистограмма
СП - судорожные послеразряды
СР - спектральная развертка
ТПСП - тормозный постсинаптический потенциал
ХАТ - холинацетилтрансфераза
ЦАМ - центральное ядро амигдалы
ЭК - энторинальная кора
ЭС - эпилептический статус
ЭЭГ - электроэнцефалограмма
мГлуР - метаботропный глутаматный рецептор
АМРА - а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изокСАЗол
PBS - стандартный солевой буфер
НМДА - К-метил-Б-аспартат
VIP — вазоактивный интестинальный полипептид

При введении пилокарпина непосредственно в мозг описаны различные эффекты. В некоторых работах при локальном введении пилокарпина в мозг регистрируются лишь низковольтные осцилляции в гамма-диапазоне, а для вызова судорожной активности требуются миллимолярные концентрации пилокарпина либо манипуляции с ГЭБ [Hamani, Melo, 1997; Dickson et al., 2003; Uva et al., 2008]. В другой работе ведение пилокарпина в гиппокамп вызывает сходные с системным введением электрографические, поведенческие и нейропатологические нарушения [Furtado et al., 2002]. В органотипических гиппокампальных культурах, которые также используются в моделировании эпилептической активности, показано, что пилокарпин вызывает залповую активность в пирамидных нейронах поля СА1 [Poulsen et al., 2002].
Нейропатологические особенности действия пилокарпина. Пилокарпин при системном введении вызывает последовательные поведенческие и электрографические изменения, которые могут быть разделены на три периода: 1) острый период ЭС, который может длиться до 24 ч; 2) латентный период с прогрессивной нормализацией ЭЭГ и поведения, который длится 4-44 дня; 3) хронический период со спонтанными рекуррентными судорогами 3-5 раз в неделю (они напоминают сложные парциальные судороги у людей) [Turski et al., 1986; Curia et al., 2008; Tejada et al., 2010].
Во время латентного периода, хотя для животных характерно нормальное поведение, постепенно происходят патофизиологические изменения: спрутинг мшистых волокон, потеря интернейронов, перестройка синаптических связей, активация глиальных и пролиферация эктопических клеток [Turski et al., 1986; Dube et al., 2000; Sutula, Pitkänen, 2002]. Показано, что чем дольше длится ЭС, тем более сильные повреждения развиваются в гиппокампе. Регистрируются гистопатологические нарушения, которые локализуются в ольфакторной коре, амигдале, таламусе, гиппокампе и неокортексе [Turski et al., 1983]. Некоторые области, такие как латеральное таламическое ядро, субстанция нигра и зубчатая фасция повреждаются только у животных, у которых позже развиваются спонтанные периодические судороги [Priel et al., 1996]. Значительная гибель клеток обнаруживается в субикулуме [de Guzman et al., 2006], амигдале [Turski et al., 1983], третьем слое медиальной энторинальной коры [Du et al., 1995; Wozny et al