Генотипы штаммов Yersinia pseudotuberculosis и их клиническое и диагностическое значение

• Автор: Кокорина, Галина Ивановна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 133 с. : 9 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования
Степень разработанности темы исследования
Клинические особенности проявлений псевдотуберкулеза в различных регионах мира. Роль отдельных генетических
детерминант патогенности в инфекционном процессе
Молекулярно-генетические методы определения детерминант
вирулентности
Классы специфических антител, их обнаружение у
экспериментальных животных и у больных иерсиниозами
Серологическая диагностика иерсиниозной инфекции на разных
стадиях заболевания
Цели и задачи
Научная новизна
Теоретическая и практическая значимость работы
Методология и методы исследования
Положения, выносимые на защиту
Степень достоверности и апробация результатов
Глава 1. Генотипическая характеристика штаммов У. рзеибоШЬегси1оз1з,
выделенных в различных регионах мира
1.1. Детерминанты вирулентности, локализованные на плазмиде рУМ82
1.2. Характеристика некоторых генетических детерминант вирулентности
у представителей мировой популяции У. р8еибоШЬеГСи1о818
1.3. Распространение штаммов У. рэеиёоШЬегсикз различных
генотипов на мировой территории
1.4. Распространение штаммов У. р8еис1ошЬегси1о818 различных
генотипов на территории России
1.5. Применение генотипирования штаммов У. р8еискйиЬегси1о818 в

эпидемиологической практике
Глава 2. Характеристика псевдотуберкулезной инфекции, вызванной
У. рзеибойдЬегсикшБ различных генотипов
Глава 3. Разработка варианта тест-системы для диагностики
иерсиниозов методом иммуноблота
3.1. Получение гипериммунных кроличьих сывороток
3.2. Разработка условий постановки метода иммуноблота
3.2.1. Приготовление блотовых стрипов с антигенами
3.2.2. Выявление специфических антител методом ИФА
3.2.3. Учет результатов
3.3. Характеристика диагностической ценности набора Иммуноблот (А)
в модельных опытах
3.3.1. Испытание лабораторного образца набора с кроличьей гипериммунной сывороткой
3.3.2. Результаты испытания набора в модельных опытах
3.4. Оценка диагностической эффективности набора Иммуноблот (А)
3.5. Применение метода иммуноблота для диагностики иерсиниозов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Выводы
Практические рекомендации
Персперктивы дальнейшей разработки темы
Список использованных сокращений
Список использованной литературы
Приложения

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования
Псевдотуберкулез остается актуальной проблемой здравоохранения в России и во многих странах мира. Заболевание отличают выраженный полиморфизм клинических проявлений, отсуствие четких патогномоничных симптомов, склонность к затяжному и хроническому течению. Между тем причины, обуславливающие данное многообразие и сложность патогенеза остаются невыясненными.
Инфекционный процесс представляет собой ограниченное во времени сложное взаимодействие биологических систем микроорганизма и макроорганизма, протекающее в определенных условиях внешней среды. В этой связи чрезвычайно актуально изучение роли генетических детерминант вирулентности бактерий У. р8еибоШЬегси1оз1з и влияния их продуктов на течение инфекционного процесса, территориальное распространение болезни.
В отдельных работах предприняты попытки объяснить разнообразие клинических форм псевдотуберкулеза за счет наличия у возбудителя тех или иных детерминант вирулентности (ЕикшЫта Н. еЬ а1., 2001; Сагше1 Е., 2001; МоИаге! Н., 1990; Чеснокова М.В. и соавт., 2006). В то же время среди популяции возбудителя псевдотуберкулеза выявлены особенности циркуляции штаммов У. р8еибоШЬегси1о818, содержащих уртА или «остров» высокой патогенности, связанные с географическими регионами (БикизЫта Н. е1 ак, 2001). Основные клинические симптомы инфекции, вызванной У. р8еис1о(:иЬегси1оз18 в России, Японии и Южной Корее разнообразнее и тяжелее, чем на Европейских территориях и характеризуются системными проявлениями болезни. Типичный для России симптомокомплекс псевдотуберкулеза получил название - дальневосточная скарлатиноподобная лихорадка (ДСЛ).

У. рзеиёоШЬегсШсэ различных генотипов на территориях 25 стран пяти континентов.
Установлено, что псевдотуберкулез с симптомами ДСП вызывают все штаммы У. рзеибоШЬегси1о818, обладающие геном уртА, кодирующим УРМа.
Получены новые знания о тяжести течения псевдотуберкулеза, обусловленного штаммами У. р8еибоШЬегси1оз18 генотипов За, ЗЬ, Зс. Полученные данные могут свидетельствовать о более тяжелом течении инфекции, вызванной штаммами У. р8еибошЬегси1оз18 генотипов ЗЬ (уртА+Ь-УАР1+) и Зс (уртА+Ъ-УАР1+рУМ82+), по сравнению с инфекцией, обусловленной штаммами У. р8еис1ошЬегси1о818 генотипа За (уршА+).
Теоретическая и практическая значимость работы
Изученные российские штаммы У. р8еибоШЬегси1о818 и их характеристики представлены в коллекции лаборатории бактериальных капельных инфекций ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург.
Для повышения эффективности диагностики псевдотуберкулеза обоснованы показания к обследованию больных с симптомами острого аппендицита, мезентериального лимфаденита и гастроэнтеральными симптомами с целью выявления их инфицированности У. р8еиёоШЬегси1о818 генотипов 2а и 2Ь, вызывающих инфекцию с абдоминальными проявлениями.
Для микробиологического мониторинга за возбудителем псевдотуберкулеза предложена методика генотипирования штаммов У. р8еибоШЬегси1оз18.
Разработана методика конструирования набора для выявления специфических противоиерсиниозных иммуноглобулинов О, А, и М в крови или плазме человека методом иммуноблота.
На основе результатов работы подготовлены следующие документы: