Биологические свойства штаммов ВИЧ-1, циркулирующих на территории Москвы и Московской области

• Автор: Хаметова, Кизхалум Маликовна
• Шифр специальности: 03.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 119 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Организация вириона
1.2. Геномная организация ВИЧ
1.3. Репликативный цикл ВИЧ
1.4. Роль CD4 - рецептора в проникновении ВИЧ в клетку-
мишень
1.5. Вторичные рецепторы для ВИЧ-инфицирования
1.6. Фенотипические свойства различных вариантов ВИЧ
1.7. Различия в биологических свойствах изолятов ВИЧ по разнообразию
инфицируемых клеток хозяина
1.8. АЗТ-резистентность
1.9. Эпидемия ВИЧ/СПИД в Российской Федерации
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Сыворотки
2.2. Клеточные культуры
2.3. Вирусы
2.4. Тест нейтрализации
2.5. Клинические изоляты
2.6. Определение инфекционной активности 50%- инфекционной дозы (TCID50)
2.7.Методы детекции антигенов ВИЧ
2.7.1 .Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA) для определения Аг ВИЧ
2.7.2. Иммуноферментный анализ для выявления антител ВИЧ
2.7.3. Определение антител ВИЧ-1 с помощью иммуноблотганга
2.8.0пределение биологического фенотипа изолята ВИЧ
2.9. Определение тропизма к корецепторам
2.10. Изучение способности вирусных штаммов к
синцитийобразованию
2.11.Изучение резистентности вирусных штаммов к ингибиторам обратной транскриптазы
2.12.Получение и определение нуклеотидных последовательностей
2.12.1. Изоляция РНК ВИЧ-1 из клинических образцов
2.12.2.Получение вирусспецифической ДНК из РНК
2.12.3 .Амплификация нуклеотидных последовательностей генома ВИЧ
2.12.4.Г оризонтальный электрофорез
2.12.5.Выделение и очистка ДНК из агарозного геля
2.12.6.0пределение нуклеотидных последовательностей
2.12.7, Использование полученных ранее генетических последовательностей
2.13. Методы филогенетического анализа
2.13.1.Подготовка последовательностей для анализа
2.13.2.0пределение эволюционных дистанций и построение филогенетических деревьев
2.13.3.Статистическая обработка экспериментальных данных
Глава 3. Результаты и их обсуждение
3.1. Анализ эпидемиологических данных ВИЧ-инфицированных пациентов в Москве и Московской области

3.2. Исследование ВИЧ-позитивных сывороток на содержание количества
и спектра специфических антител
3.3. Определение нейтрализующей анти-ВИЧ-1 активности сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов
3.4. Генетический анализ штаммов ВИЧ-1, циркулирующих в Москве и Московской области
3.5. Изоляция и изучение биологических свойств актуальных штаммов ВИЧ-1, циркулирующих на территории Москвы и Московской
области
3.6. Определение биологического фенотипа первичного изолята ВИЧ-

3.7.0пределение инфекционной активности первичных изолятов и референс-штаммов ВИЧ-1 путем титрования по TCID
3.7.1. Определение TCID50 клинических изолятов
3.7.2,Определение TCID50 референс-штаммов
3.8.Сравнительное изучение репродуктивной активности первичных изолятов и референс-штаммов ВИЧ-1 в различных клеточных
линиях
3.9.Тропизм первичных изолятов ВИЧ-1/СК-8 и RiB-A-07 к корецепторам CCR5 и CXCR4
ЗЛО.Изучение способности изолятов ВИЧ-1 к
синцитийобразованию
3.11.Изучение чувствительности российских клинических изолятов ВИЧ-1 к азидотимидину
3.12.Определение генетической принадлежности первичного
изолята

гемоглобина менее 70г/л), дефицит витамина В|2 или фолиевой кислоты, печеночная недостаточность.
Торговые названия препаратов с действующим веществом
Торговое название Значение Индекса Вышковского*
Азидотимидин
Виро-Зет
Зидо-Эйч
Зидовирин
Зидовудин
Зидовудин-Ферейн
Ретровир®
Тимазид® пг. ® ✓ Ч _ Ч
Тимазид (Азидотимидин)
* - среднее арифметическое значение индексов информационного спроса.
Механизм действия АЗТ связан как с остановкой синтеза провирусной ДНК, так и с конкуренцией за нуклеозиды, используемые вирусной полимеразой. Хотя точный механизм действия АЗТ in vivo до сих пор неизвестен [63].
Вскоре было показано, что АЗТ предотвращает появление симптомов ВИЧ-инфекции [76]. Вначале применялись большие дозы препарата (1500 мг/сутки), что приводило к частому развитию побочных эффектов, преимущественно в виде токсического действия на костный мозг. Впоследствии дозу АЗТ снизили до 500-600 мг/ сутки. Это привело к уменьшению токсических побочных эффектов. На основании ранних сообщений, такое лечение было рекомендовано людям на бессимптомной стадии развития заболевания, у которых количество СБ4+-клеток снизилось до уровня <500 клеток/мкл крови [101], но впоследствии рекомендации были изменены. Некоторые исследования показали, что лечение АЗТ приносит меньше пользы пациентам на бессимптомной стадии заболевания, чем после появления симптомов. Эффект от применения препарата носил кратковременный характер и, по-видимому, был максимально выражен при использовании на поздних клинических стадиях заболевания [97].