Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Волосникова, Екатерина Александровна
03.01.06
Кандидатская
2012
Кольцово
133 с. : ил.
Стоимость:
499 руб.
ОГЛАВЛЕНИЕ
Часть I ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Цели и задачи исследования
Научная новизна и практическая значимость работы
Положения, выносимые на защиту
Апробация работы
Публикации
Объем и структура диссертации
Личный вклад автора
Часть II ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2Л Способы создания вакцинных препаратов, особенности 14 получения вакцин против ВИЧ/СПИД
2ЛЛ Способы создания вакцинных препаратов
2Л.2 Особенности получения вакцин против ВИЧ/СПИД
2Л.З Способы создания молекулярных конструкций
нанобиочастиц для использования в медицинской практике
2Л.4 Способы создания молекулярных конструкций
нанобиочастиц для доставки ДНК-вакцин.
2.2 Получение рекомбинантных белков как компонентов для 34 создания субъединичных вакцинных препаратов, в том числе против ВИЧ/СПИД
2.3 Методы получения нуклеотидного материала для фармацевтических целей
2.4 Методы получения конъюгатов медицинских средств
Часть III МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Часть IV РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1 Оптимизация способа получения рекомбинантного белка ТВ1
4.2 Масштабирование процесса получения рекомбинантного 66 белка ТВ1
4.3 Исследование процессов получения конъюгатов с
полисахариднои матрицей
4.4 Разработка метода получения плазмидной pcDNA-TCI
4.5 Получение вакцинной конструкции
4.6 Исследования физико-химических свойств рекомбинантного
белка ТВ! в виде монопренарата, в составе конъюгата и
вакцинной конструкции
Заключение
Часть V ВЫВОДЫ
Список опубликованных работ по теме диссертации
Часть VI Библиографический список
Часть V Приложения
Список использованных сокращений
а. о. - аминокислотный остаток АГ - антиген АТ - антитела
ВИО - вирус иммунодефицита обезьян
ВИЧ - вирус иммунодефицита человека
ВИЧ-1 - вирус иммунодефицита человека первого типа
ВОЗ - всемирная организация здравоохранения
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
дсРНК - двуспиральная рибонуклеиновая кислота
ИФА - иммуноферментный анализ
ЛИС - липополисахариды
МУК - методические указания
НД - научная документация
ООН - организация объединенных наций
п. н. - пар нуклеотидов
ПААГ - полиакриламидный гель
ПЦР - полимеразная цепная реакция
СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита
ФСБ - фосфатно-солевой буфер
ФСП - фармакопейная статья предприятия
ЦТЛ - цитотоксические Т-лимфоциты
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
ЭФ - электрофорез
FDA - Food and Drug Administration
MVA - Modified Vaccinia virus Ankara
TBI - T- и В-клеточный иммуноген
TCI - Т-клеточный иммуноген
приобретает в настоящее время большую актуальность и значимость. Понятно, что при этом основные усилия исследователей направлены, прежде всего, на сокращение, упрощение и удешевление процедур выделения и очистки белковых молекул [10].
В настоящее время созданы программы, позволяющие рассчитать заряды молекул белков при различных значениях водородного показателя (pH) [215, 216- 218]. Результаты расчетов позволяют подобрать сорбенты и условия хроматографий. Это может помочь целенаправленно создавать технологические процессы получения биотехнологических препаратов, в том числе для медицины.
Приемы и методы, используемые при выделении и очистке растворимых рекомбинантных белков, на примере получения цитокинов, рассмотрены в работах [3, 14, 24, 26, 30, 36, 37, 40, 42, 51]. Суть их заключается в разрушении клеток, получении экстракта и очистки целевого белка при помощи ряда хроматографических стадий. Очистка осуществляется за счет различных сорбционных свойств белка и примесей на ионообменных, адсорбционных (гидроксилапатит), гидрофобных сорбентах.
Следует отметить, что рекомбинантные белки могут синтезироваться как в растворимой форме, так и в тельцах включения, и от этого в значительной мере зависит технология их очистки.
Универсальным подходом к получению рекомбинантных белков в растворимой форме является обеспечение секретируемого характера их экспрессии, т.е. секреции синтезирующихся рекомбинантных белков в питательную среду. Системы секреции у грамположительных и грамотрицательных бактерий интенсивно изучаются. Получение рекомбинантных эукариотических белков в секретируемой форме облегчает их очистку. Получение белковых препаратов, секретируемых в культуральную жидкость подробно рассмотрены в обзоре [44].
Главная причина того, что в клетках E.coli продуцируются неактивные эукариотические белки, заключается в невозможности формирования
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Стандартизация методики определения специфической активности эритропоэтина | Яковлев, Алексей Константинович | 2019 |
Оптимизация культивирования непарного шелкопряда для получения вируса ядерного полиэдроза и исследование эффективности вируса в композиции с Bacillus thuringiensis | Охлопкова, Олеся Викторовна | 2019 |
Моделирование и оптимизация биотехнологических процессов производства вакцины холерной бивалентной химической таблетированной | Задохин, Сергей Николаевич | 2014 |