Разработка технологии приготовления сухих дозированных форм комплексного иммуноглобулинового препарата

• Автор: Мелихова, Александра Вадимовна
• Шифр специальности: 03.01.06, 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 152 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ИММУНОГЛОБУЛИНЫ, ИХ СВОЙСТВА И МЕТОДЫ

ВЫДЕЛЕНИЯ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Иммуноглобулиновые препараты в медицине

1.2. Физикохимические свойства иммуноглобулинов.

1.3. Препаративные методы выделения иммуноглобулиновых композиций, содержащих три основных класса

иммуноглобулинов 10, А,

1.3.1. Методы фракционирования неорганическими солями

1.3.2. Фракционирование органическими растворителями

1.3.3. Выделение иммуноглобулиновой фракции полимерами.

1.3.4. Метод ионообменной хроматографии
1.4. Стабилизация физикохимических и биологических свойств иммуноглобулиновых препаратов.
1.5. Методы стерилизации иммунобиологических препаратов и способы инактивации вирусов.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материалы.
2.1.1. Материалы и реактивы
2.1.2. Экспериментальные животные
2.2. Методы исследований
2.2.1. Иммуиохимические методы.
2.2.2. Химические методы.
2.2.3. Физикохимические методы
2.2.4. Физические методы.
2.2.5. Биологические методы
2.2.6. Планирование эксперимента и статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА СПОСОБА ВЫДЕЛЕНИЯ ИММУНО
ГЛОБУЛИНОВОЙ ФРАКЦИИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КИП
3.1. Сравнительная опенка качественного состава осадков Б и выбор критериев их пригодности в качестве исходного сырья для получения КИП.
3.2. Исследование эффективности фракционирования
иммуноглобулинов солями двухвалентных металлов.
3.3. Разработка метода выделения очищенной иммуноглобулиновой фракции с использованием сульфата меди.
3.4. Определение содержания в препарате ионов меди.
ГЛАВА 4. СТАБИЛИЗАЦИЯ СВОЙСТВ И ПРИГОТОВЛЕНИЕ СУХИХ
ДОЗИРОВАННЫХ ФОРМ КИГ.
4.1. Влияние стабилизаторов на физикохимические и биологические свойства КИ при сублимационном обезвоживании
4.2. Оценка эффективности стерилизации КИП уоблучением
4.3. Приготовление твердых дозированных форм КИП.
ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ БЕЗВРЕДНОСТИ И ЭФФЕКТИВНОСТИ
ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ КИП
5.1. Испытание токсичности препарата на мышах
5.2. Изучение безвредности и эффективности комплексного иммуноглобулинового препарата на обезьянах
5.2.1. Испытание безвредности препарата на обезьянах.
5.2.2. Изучение терапевтического эффекта КИТ при лечении острой кишечной инфекции с диарейным
синдромом
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Метод определения ионов меди используется в лаборатории медицинской биотехнологии ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора с года для определения качества комплексного иммуноглобулинового препарата. Методика доклинических испытаний биопрепаратов, разработанная в ходе выполнения работы совместно с сотрудниками ГУ НИИ медицинской приматологии РАКШ, легла в основу разработки Новые алгоритмы доклинических испытаний неиньскционных иммунобиологических препаратов и БАД, награжденной серебряной медалыо VII Московского международного салона инноваций и инвестиций на ВВЦ Москва в г. Критериями качества осадков Б как сырья для производства комплексного иммуноглобулинового препарата являются концентрации общего белка и иммуноглобулинов, распределение иммуноглобулинов по классам С, 1А, 1дМ, титр антител к сальмонеллам, а также производный показатель, характеризующий долю иммуноглобулинов от общего белка. Разработанный способ получения комплексного иммуноглобулинового препарата включает последовательную обработку гомогенизата осадка Ь III фракция по Кону хлороформом и сульфатом меди, выделение иммуноглобулиновой фракции методом ультрафильтрации в присутствии комплексообразующего соединения с последующим концентрированием и возможным осаждением фракции полиэтиленгликолем, растворение осадка иммуноглобулинов, стабилизацию и стерилизующую фильтрацию. Сухая субстанция комплексного иммуноглобулинового препарата пригодна для приготовления капсульной и таблстированной форм с использованием метода стерилизации уоблученисм. Комплексный иммуноглобулиновый препарат во флаконах, таблетках и капсулах, приготовленный по разработанной технологии с использованием в качестве фракционирующего агента сульфата меди, нетоксичен, безвреден и обладает терапевтическим эффектом при лечении острой кишечной инфекции с диарейным синдромом у обезьян. Диссертация апробирована на заседании секции Ученого Совета ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора Медицинская биотехнология, протокол 3 от июня г. Основные положения диссертационной работы доложены на Российской . Организм и окружающая среда жизнеобеспечение и защита человека в экстремальных условиях, Москва научнопрактической конференции Медицина будущего, КраснодарСочи, Международной научнопрактической конференции памяти Г. Биотехнология состояние и перспективы развития, Москва, Третьей международной конференции, посвященной летию института имени Пастера, Идеи Пастера в борьбе с инфекциями, СанктПетербург, Научнопрактической конференции Иммуноглобулиновые препараты энтерального и внутривенного применения, Москва, XI Российском национальном конгрессе Человек и лекарство, Москва, Межрегиональной научнопрактической конференции Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства, ЙошкарОла, Международной научной конференции Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии в опытах на обезьянах, СочиАдлср, . По теме диссертации опубликовано печатных работ, в том числе 1 в издании, рекомендованном ВАК Российской Федерации, 2 в периодических изданиях, 2 в сборник научных трудов, в материалах конференций , 6 патентов на изобретение. Диссертация изложена на 2 страницах, состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, списка литературы и приложения. Диссертация иллюстрирована таблицей и 8 рисунками. Список литературы включает 9 работ, в том числе 2 отечественных и иностранных авторов. Выражаю благодарность за помощь в проведении исследований сотруднику КДЦ МИИИЭМ им. Г. Н. Габричевского Роспотребнадзора В. Г1. Насонову, сотрудникам лабораторий МНИИЭМ им. Г. Н. Габричевского Роспотребнадзора иммунобиологических препаратов руководитель Л. И. Новикова, биопрепаратов и лекарственных форм руководитель В. М. Лахтин, клинической лаборатории руководитель О. В. Логунов, а также сотрудникам лаборатории инфекционной патологии руководитель Э. К. Джикидзе НИИ медицинской приматологии РАМН директор академик РАМП Б. А Лапин.