+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Синтез ДНК ab initio, стимулируемый никующей эндонуклеазой Nt.BspD6I

  • Автор:

    Зырина, Надежда Витальевна

  • Шифр специальности:

    03.01.03

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2012

  • Место защиты:

    Пущино

  • Количество страниц:

    121 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АТР - аденозинтрифосфат
BSA - бычий сывороточный альбумин
DMSO - диметилсульфоксид
БФС - бромфеноловый синий
dATP - дезоксиаденозинтрифосфат
dGTP - дезоксигуанозинтрифосфат
сПГР - дезокситимидинтрифосфат
dCTP -дезоксицитидинтрифосфат
dNTP - смесь четырех дезоксинуклеозидтрифосфатов
SAP - Shrimp Alkaline Phosphatase, щелочная фосфатаза из креветки
ДТТ - дитиотрейтол
ДНКаза - дезоксирибонуклеаза
ПААГ - полиакриламидный гель
ПСА - персульфат аммония
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ПЭГ - полиэтиленгликоль
РНКаза - рибонуклеаза
ТЕМЕД - тетраэтилендиамин
ТХУ - трихлоруксусная кислота
ФМСФ - фенилметилсульфонилфторид
Tris - трис(гидроксиметил)аминометан
EDTA - этилендиаминтетраацетат Na соль
ИПТГ - изопропил-Ь-О-тиогалактозид
X-gal - 5-бромо-4-хлоро-3-индолил- b-D-галактозид
HEPES -Н-[2-гидроксиэтил]пиперазин-М’-[2-этансерная кислота]
Pipes - 1-4 пиперазинэтансерная кислота
SDS - додецилсульфат натрия
нт - нуклеотид
п.о. - пара оснований
т.п.о. - тысяча пар оснований
ед. акт. - единица активности
OE - оптическая единица NEB - фирма New England Biolabs, США дцДНК - двухцепочечная ДНК оцДНК - одноцепочечная ДНК
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ j
1.1. СИНТЕЗ ДНК В ОТСУТСТВИЕ МАТРИЦЫ И ПРАЙМЕРА
1.1.1. Синтез ДНК ab initio ДНК-полимеразами 1 о
1.1.2. Синтез ДНК ab initio в присутствии эндонуклеаз рестрикции
1.1.3. Распространененность феномена формирования ферментами информации, 17 независимо от матрицы ДНК или РНК
1.1.4. Возможная функциональная роль независимого от матрицы синтеза ДНК
1.2. НИКУЮЩИЕ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ
1.2.1. Общая характеристика никаз. Никаза Nt.Bsp.D6I
1.2.2. Применение никующих эндонуклеаз
1.3. БЕЖИ БАКТЕРИОФАГА Т4 И Е. coli, СВЯЗЫВАЮЩИЕСЯ С 31 ОДНОЦЕПОЧЕЧНОЙ ДНК
1.3.1. Структурно-функциональные особенности белков SSB
1.3.2. Применение белков Т4 gp32 и EcoSSB
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. МАТЕРИАЛЫ
2.2. ОБОРУДОВАНИЕ
2.3. ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ И ИНТЕРНЕТ РЕСУРСЫ
2.4. МЕТОДЫ
2.4.1.Электрофорезы
2.4.2. Работа с радиоактивными изотопами
2.4.3.Ферментативные реакции
2.4.4. Выделение ДНК
2.4.5. Работа с бактериями и бактериофагами
2.4.6. Синтез ДНК ab inito
2.4.7. Электронная микроскопия
2.4.8. Изотермическая амплификация ДНК
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. ОСОБЕННОСТИ ФЕРМЕНТОВ, ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В РАБОТЕ
3.2. СИНТЕЗ ДНК ab initio

Schwarz et al., 1990) и ОТ-ПЦР f(Baugh et al., 2001; Tebbe and Vahjen, 1993; Villalva et al., 2001) приводило к повышению специфичности амплификации разных матриц ДНК и увеличению выхода продукта синтеза. Применение белков gp32 и EcoSSB улучшало разрешение полос в реакциях секвенирования ДНК не зависимо от использованной ДНК-полимеразы (Kaspar et al., 1989; Kowalczykowski et al., 1981). Этот результат был особенно очевиден на матричной ДНК с выраженной вторичной структурой. В реакциях изотермической амплификации ДНК присутствие белков SSB может сильно стимулировать вытеснение цепи и приводить к устранению неспецифических продуктов (Lizardi et al., 1998; Piepenburg et al., 2006; Vincent et al., 2004; Zhang et al., 2001; Zhang et al., 2002a).
SSB белки нашли применение и в других методах молекулярной биологии, в частности Eco SSB предложили применять в реакции транскрипции MiniV™ РНК-полимеразой (Davydova and Rothman-Denes, 2003; Kazmierczak et al, 2002), в сегмент направленном мутагенезе (Shortle et al., 1980), в олигонуклеотид направленном расщеплении эндонуклеазами рестрикции (Milavetz, 1989), при анализе реакционной смеси ПЦР капиллярным электрофорезом (Drabovich and Krylov, 2004), а таже для обнаружения продуктов гибридизации (Brockman et al., 1999; Kerman et al., 2004). В электронной микроскопии для стабилизации и маркировки одноцепочечных участков различных структур ДНК применение нашел белок Т4 gp32 (Brack et al., 1975; Delius et al., 1972; Kowalczykowski et al, 1981).

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.154, запросов: 967