Синтез и изучение противовирусных свойств соединений пептидной природы

• Автор: Гараев, Тимур Мансурович
• Шифр специальности: 03.01.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 118 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Производные адамантанового ряда
1.1 Синтез производных адамантана
1.2. Фармакологические свойства адамантана
1.3. Устройство вириона вируса гриппа А. Протон-проводящий канал М2
2. Аминофосфоновые и аминофоефиновые кислоты
2.1. Химия аминофосфоновых и аминофосфиновых кислот
2.2. Биологическая активность аминофосфоновых и аминофосфиновых кислот
3. Синтетические пептиды из «шарнирной» области иммуноглобулинов
4. Методы получения амидов
4.1. Амидирование карбоновых кислот
4.2. Методы синтеза амидов аминокислот и пептидов
4.3. Противовирусная активность амидов пептидов в отношении лт. ВИЧ
ГЛАВА II. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
1. Подходы к проблеме преодоления резистентности вирусов 50 гриппа А к препаратам адамантанового ряда.
1.1. Производные аминоадамантанов (ремантадина и амантадина)
1.2. Производные адамантанкарбоновых кислот
1.3. Производные адамантандикарбоновых кислот
2. Пептиды, содержащие а-аминофосфиновые кислоты, и их 68 противовирусные и иммуностимулирующие свойства.
2.1. Интерферониндуцирующая активность фосфопептидов
2.2. Противовирусная активность фосфодипептидов

3. «Шарнирная» область иммуноглобулинов как потенциальный 72 источник противовирусных пептидов
3.1. Синтез гептапептидного фрагмента 1дО 1 человека
3.2. Биологические свойства синтетического гептапептида
4. Исследование цитотоксического действия амидов пептидов и их испытание на анти-ВИЧ активность
ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
1. Синтез производных адамантана
2. Синтез фосфодипептидов
3. Синтез амидов ди- и трипептидов
4. Синтез гептапептида НСТН-Су«(81Ви)-Рго-А1а-Рго-С1и-Ееи-РИе-ОЕ!
ВЫВОДЫ
Приложения (масс-спектры наиболее активных соединений)
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Принятые сокращения Сокращения, принятые в тексте диссертационной работы для обозначения аминокислотных остатков, защитных групп, пептидных структур и реагентов для пептидного синтеза, соответствуют рекомендациям Комиссии по биохимической номенклатуре IUPAC-IUB ICBN [120].
AmAd - остаток 1 -аминоадамантана
Ad - остаток 1-дамантановой кислоты
Chm - циклогексометилоксикарбонил
Сге - остаток креатина
DCC - >1,К-дицшслогексилкарбодиимид
DMF - диметилформамид
EDA - этилендиамин
GABA - у-аминомасляная кислота
HDA - 1,6-гександиамин
HEPES - Na-соль П-(2-гидроксил)пиперазин-Ы'-2-этансульфокислоты
NMM - N-метилморфолин
PBS - 0,01 М Na-фосфатный буфер
ТОА - липоевая кислота
Таи - остаток таурина
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография ИБХФ - изобутилхлорформиат ИФА - иммуноферментный анализ МС - масс-спектр
С. А. - метод смешанных ангидридов

Каждая молекула IgG состоит из двух легких (L) и двух тяжелых (Н) цепей, связанных ковалентно друг с другом дисульфидными связями (рис 17). Легкие цепи разделены на две гомологичные области: V (вариабельная) и С (константная.)
У человека имеется четыре подкласса IgG: IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4. Молекулу IgG структурно подразделяют на Fab и Fc - фрагменты, а также выделяют «шарнирную» область. В зависимости от подкласса IgG «шарнирный» участок содержит от 16 до 64 аминокислотных остатков. Участок «шарнирной» области между тяжелыми цепями содержит наибольшее число отличий, что вероятно приводит к различию биологических функций подклассов IgG (рис.7).

Рис. 7. Структура подклассов IgG
От «шарнирной» области богатой остатками пролина и цистеина зависит гибкость молекулы, способность свободно связываться с антигеном, и чувствительность к протеолитическому расщеплению. В этой части IgG находятся дисульфидные связи между тяжелыми цепями и внутрицепочесные дисульфидные связи. Число дисульфидных связей между цепями варьируется от двух в IgGl и IgG4, четырех в IgG2 и до одиннадцати в IgG3. В IgGl «шарнирная» область начинается с 216-го остатка и заканчивается 231-ым. В то же время «шарнирная» область IgG3 на 47 остатков больше по сравнению с IgGl. Изучение аминокислотной последовательности позволяет предположить, что это увеличение числа остатков связано с тандемной дупликацией участка 216-231 IgGl-цепи. Существенной особенностью «шарнирной» области является возникающая в результате взаимодействия двух тяжелых цепей жесткая, циклическая октапептидная структура:
- Cys - Pro - Pro
- Cys - Pro - Pro
Она служит осью вращения всей гибкой «шарнирной» области, а следовательно, и Fab-фрагментов, что необходимо, для взаимодействия с антигеном.
Как правило, протеолитические ферменты расщепляют молекулу IgG либо непосредственно перед этим октапептидом (трипсин, папаин), либо сразу же после него