Новый синтетический низкомолекулярный ингибитор тромбина HC-019s-IOC. Исследование свойств in vitro и in vivo

• Автор: Суров, Степан Сергеевич
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 126 с. : ил.

Содержание
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Современные представления о гемостазе человека
1.1.1. Тромбоцитарное звено гемостаза
1.1.2. Плазменное звено гемостаза
1.1.3. Роль сосудистой стенки в гемостазе
1.1.4. Патологическое функционирование системы свёртывания крови: тромбоз
1.2. Тромбин как мишень антикоагулянтной терапии
1.2.1. Структура, функции и регуляция активности тромбина
1.2.2. Антитромботические средства
1.2.2.1. Антитромбоцитарная терапия
1.2.2.2. Антикоагулянтные средства
1.2.2.3. Ингибиторы активности тромбина: принципы и практика
1.3. Инфузионно-трансфузионная терапия кровопотери
1.3.1. Основные цели
1.3.2. Общие сведения о современных инфузионных растворах
1.3.3. Влияние плазмозамещающих растворов на систему гемостаза
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.2. Методы
2.2.1. Компьютерный дизайн и синтез нового прямого низкомолекулярного ингибитора тромбина
2.2.2. Измерение ингибирующей активности соединения 19э по отношению к тромбину и фактору Ха
2.2.3. Определение типа ингибирования и кинетических констант для соединения 19б по отношению к тромбину
2.2.4. Устойчивость ингибитора в водных растворах

2.2.5. Устойчивость ингибитора в водных растворах
2.2.6. Определение стандартных времен свертывания
2.2.7. Измерение генерации тромбина
2.2.8. Измерение пространственной динамики роста сгустка (тромбодинамики)
2.2.9. Измерение острой токсичности ингибитора 19s
2.2.10. Исследование антикоагулянтных свойств ингибитора при внутривенном введении кроликам
2.2.11. Модель гемодилюции на крысах
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Исследования свойств нового синтетического низкомолекулярного ингибитора тромбина НС-019s-IOC in vitro
3.1.1. Изучение тромбин- и фХа-ингибирующей способности соединения HC-019s-IOC в буферном растворе
3.1.2. Определение типа ингибирования и кинетических констант для соединения 19s по отношению к тромбину
3.1.3. Влияние HC-019s-IOC на стандартные времена свёртывания
3.1.4. Влияние HC-019s-IOC на генерацию тромбина
3.1.5. Изучение антикоагулянтной активности 19s в плазме методом тромбодинамики
3.1.6. Устойчивость ингибитора в водных растворах
3.2. Исследования свойств нового синтетического низкомолекулярного ингибитора тромбина HC-019S-IOC in vivo
3.2.1 Исследование токсичности соединения 19s
3.2.2. Антикоагулянтные свойства ингибитора при его внутривенном введении кроликам
3.2.3. Модель гемодилюционной гиперкоагуляции при кровопотере на крысах
ОБСУЖДЕНИЕ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

плазмы, который они назвали его кофактором гепарина. Тридцатью годами позже выяснилось, что им является антитромбин III - белок плазмы, быстро инактивирующий тромбин и фактор Ха в присутствии гепарина. Антитромбин III необратимо связывает и ингибирует тромбин, а также практически все активированные факторы свёртывания (за исключением фУПа). Гепарин ускоряет взаимодействие АТ III с тромбином более чем в 1000 раз благодаря тому, что служит матрицей, связывающей оба белка; при этом изменяется конформация реактивного центра АТ III, и он становится более доступным для тромбина [88]. После образования комплекса тромбин-антитромбин III молекула гепарина высвобождается в неизмененном виде. Участок молекулы гепарина, отвечающий за связь с АТ III, представляет собой пентасахаридную последовательность, содержащую остаток глюкозамина. Эта структура обнаруживается примерно в 30% молекул гепарина. Другие гликозаминогликаны лишены этой структуры и не способны активировать антитромбин III (аналог этой структуры лежит в основе действия препарата фондапаринукс, упомянутого выше). При ингибировании тромбина полисахаридная последовательность должна состоять из не менее 18 остатков сахаров, что соответствует молекулярному весу 5400Да. Гепарины меньшего веса не могут одновременно связывать антитромбин III и тромбин и поэтому не ускоряют инактивацию последнего, однако способны ингибировать фактор Ха, так как для этого требуется связь гепарина только с АТ III. Именно этим объясняется разница в антикоагулянтном действии нефракционированного гепарина и гепаринов низкого молекулярного веса - в зависимости от длин полисахаридных цепей тромбин и фактор Ха ингибируются одинаково эффективно (в случае нефракционированного гепарина), или же - в случае низкомолекулярных гепаринов - антитромботическое действие осуществляется, в первую очередь, за счет ингибирования активности фХа (рис. 3)