Разработка антипаркинсонического липосомного препарата допамина с повышенным соотношением активное вещество/носитель

• Автор: Жигальцев, Игорь Валерьевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 100 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Список сокращений
Введение
1. Литературный обзор "Методы загрузки липосом лекарственньми и другими биологически
активными соединениями"
Введение
1.1. Биологические факторы, определяющие выбор липосомной системы
1.2. Традиционные методики загрузки липосом
.'.Л > г -
1.2.1. Загрузка малых одноламеллярндашцосом
1.2.2. Загрузка больших одноламеллярных липосом
1.2.3. Загрузка мультиламеллярных липосом
1.3. Методики активной загрузки липосом
1.3.1. Градиенты pH как движущая сила загрузки липосом
1.3.2. Кинетика АрН - зависимой загрузки слабых оснований в липосомы
1.3.3. Загрузка липосом липофильными аминами с помощью градиента pH
1.3.4. Трансбислойная миграция липидов в присутствии градиента pH
1.3.5. Роль pH - индуцированной липидной асимметрии в процессах агрегации и слияния липосом
1.3.6. Трансбислойный перенос аминокислот и пептидов в присутствии градиента pH
1.3.7. Трансбислойный перенос катионов в присутствии градиента pH
1.3.8. Градиенты pH в биологических системах
1.3.9. Загрузка липосом слабыми основаниями с помощью трансмембранного градиента сульфата аммония

1.3.10. Загрузка липосом слабыми кислотами с помощью трансмембранного градиента ацетата кальция
2. Обсуждение результатов
2.1. Разработка методики загрузки липосом допамином с помощью трансмембранного градиента сульфата аммония
2.1.1. Получение липосом с трансмембранным градиентом сульфата аммония
2.1.2. Кинетика активной загрузки допамина в липосомы
2.1.3. Перекисное окисление липидов в липосомах
2.1.4. Влияние концентрации липидов на эффективность включения допамина в липосомы
2.1.5. Влияние липидного состава на эффективность включения
вещества в липосомы
2.1.6. Влияние свойств включаемого вещества на эффективность
процесса активной загрузки
2.2. Влияние липосомной формы допамина на двигательную активность животных при моделировании экспериментального МФТП-индуцированного паркинсонического
синдрома
2.3. Влияние липосом с повышенной удельной загрузкой на обмен допамина в стриатуме у животных с экспериментальным МФТП-индуцированным паркинсоническим синдромом
2.4. Количественная оценка роли липосом в проникновении катехоламинов
в мозг
3. Экспериментальная часть
4. Выводы
5.Список литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
БОЛ большие одноламеллярные липосомы
ГС гидрогенизированный соевый
ГЭБ гематоэнцефалический барьер
ГВК гомованилиновая кислота
ДА допамин
ДМФХ димиристоилфосфатидилхолин
ДОБА 3,4-Дигидроксибензиламин
ДОПА 3,4-дигидроксифенилаланин
ДОФГ диолеилфосфатидилглицерин
ДОФК диолеилфосфатидная кислота
ДОФУК 3,4-дигидроксифенилаланинуксусная кислота
ДОФХ диолеилфосфатидилхолин
ДОФЭ диолеилфосфатидилэтаноламин
ДПФХ дипальмитоилфосфатидилхолин
дспх дистеароилфосфатидилхолин
млл мультиламеллярные липосомы
мол малые одноламеллярные липосомы
МФТП 1 -метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин
олл олиголамеллярные липосомы
пол перекисное окисление липидов
ПС паркинсонический синдром
РЭС ретикулоэндотелиальная система
см сфингомиелин
Хол холестерин
ФГ фосфатидилглицерин
ФИ фосфатидилинозит
ФК фосфатидная кислота
ФС фосфатидилсерин
ФХ фосфатидилхолин
яФХ яичный фосфатидилхолин

практически невозможно получить липосомы с асимметричным расположением липидов, наблюдаемым в мембране эритроцитов. Однако, липидную асимметрию в составе бислоя можно создать с помощью градиента pH [56,57,70], что может найти применение в моделировании межбислойных взаимодействий [68,69]. Так, было показано, что БОЛ, состоящие из кардиолипина, ДОФХ и Хол (1:1:1), содержащие 20% мольн. олеиновой кислоты, практически не подвержены слиянию в присутствии Са2+ при рН=6, в то время как их резистентность к слиянию теряется при рН=7.5, когда олеиновая кислота частично депротонируется [78]. В присутствии градиента pH (рНт=10.5, рНоию7.5) олеиновая кислота мигрирует во внутренний монослой, что приводит к резкому замедлению скорости Са2+- зависимого слияния. Выравнивание pH во вне- и внутрилипосомных объемах при добавлении протонного ионофора восстанавливает фьюзогенные свойства липосом.
Также было продемонстрировано, что асимметричное расположение фосфатидной кислоты в составе бислоя позволяет осуществлять контролируемое слияние БОЛ. Так, под влиянием Са2+ происходит агрегация липосом, содержащих 10% мольн. фосфатидной кислоты, при этом скорость слияния определяется pH-зависимым распределением фосфатидной кислоты между внешним и внутренним липидными монослоями [79]. В присутствии Са2+ происходит быстрая агрегация БОЛ, состоящих из ДОФХ/ДОФЭ/ФИ/ДОФК (25:60:5:10), однако не наблюдалось слияния липосом того же состава с рНт>6, содержащих фосфатидную кислоту только во внутреннем монослое. При этом была установлена корреляция между скоростью слияния липосом и концентрацией фосфатидной кислоты в составе внешнего монослоя.
Контролируемое слияние липосом также было продемонстрировано на примере липосом, содержащих синтетические положительно заряженные липиды [68]. В экспериментах использовали липосомы, состоящие из яФХ/ДОФЭ/Хол (35:20:45),