Разработка хроматографического метода получения концентрата фактора IX из плазмы донорской крови

• Автор: Дереза, Татьяна Леонидовна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 103 с. : ил

Оглавление.

Список сокращений

Введение.
Глава I. Об юр литературы. Место хроматографии в технологиях получения лекарственных средств.

1.1. История хроматографии как способа разделения

смесей.

1.2. Технологии, используемые при фракционировании плазмы

донорской крови.

1.3. Технологические и экономические аспекты внедрения хроматографических процессов фракционирования донорской плазмы.
1.4. Особенности применения хроматографических технологий для выделения минорных компонентов плазмы

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Сырье и материалы
2.2. Методики измерения.
Глава 3. Обсуждение результатов.
3.1. Разработка хроматографического процесса выделения фактора IX из плазмы донорской крови.
3.1.1. Изучение факторов, влияющих на хроматографический процесс выделения фактора IX как минорного компонента плазмы донорской крови
3.1.2. Сравнительный анализ спсобов осуществления хромакмрафического процесса получения фактора IX и его оптимизация
3.2. Масштабирование хроматографических процессов выделения минорных компонентов донорской плазмы
3.2.1. Изучение факторов, определяющих масштабирование процесса хроматографического выделения фактора IX как минорного
компонента плазмы
3.2.2. Масштабирование процесса выделения концентрата фактора IX на пилотной установке.
3.3. Изучение состава препарата концентрата фактора IX Агсмфил В и оценка клинической эффективности его применения при терапии гемофилии
Выводы
Список литературы


Плазма донорской крови представляет собой уникальную систему, состоящую из нескольких сотен различных белков, многие из которых могут быть использованы для терапевтических целей. В настоящее время в России в качестве лечебных препаратов из плазмы донорской крови выделяют, главным образом, альбумин и иммуноглобулин. В то же время известен целый ряд белков, так называемых минорных компонентов плазмы, обладающих лечебной эффективностью. Это, в первую очередь, факторы свертывания крови VIII и IX антигемофильного действия. В России до настоящего времени отсутствуют собственные технологии получения препаратов на основе минорных компонентов плазмы донорской крови. В связи с этим терапия больных гемофилией в отсутствие необходимых антигемофильных препаратов осуществляется криофракциями плазмы криопреципитатом и концентратом нативной плазмы, использование которых является малоэффективным изза недостаточно высокого содержания в них активного компонента факторов VIII и IX и наличия большого количества балластных белков. Кроме того, клиническое применение этих компонентов плазмы донорской крови несет опасность передачи вирусных инфекций, главным образом, гепатита и ВИЧинфекции. Обеспечить больным гемофилией эффективную терапевтическую помощь, безопасную в отношении вирусных инфекций, возможно только созданием собственных технологий получения препаратов из плазмы донорской крови. IX. Установление факторов, определяющих оптимальность осуществления хроматофафического процесса выделения фактора IX как минорного компонента плазмы. Разработка одностадийного метода метода выделения концентрата фактора IX на основе изученных факторов. Масштабирование процесса получения концентрата фактора IX в условиях пилотного производства. Изучение состава препарата концентрата фактора IX Агемфил В и оценка клинической эффективности его применения при терапии гемофилии В. Научная повита исследования. В результате проведенных исследований впервые выявлен характер влияния на процесс хроматофафического выделения минорных компонентов плазмы следующих факторов специфической активности целевого компонента в исходном сырье нагрузки на сорбент по специфической активности целевого компонента, значений ii и ионной силы исходного сырья и буферных растворов типа нона, используемого в буферных растворах концентрации стабилизаторов в буферных растворах, что позволило найти оптимальные условия проведения процесса. Установлен характер влияния при масштабировании хроматографического процесса выделения концентрата фактора IX характеристик хроматографической колонны, а именно, высоты, эквивалентной теоретичекой тарелке и фактора асимметрии, а также параметра линейной скорости элюции, что позволило определить оптимальные условия работы пилотной установки. Практи чес кии шачимост ь. На основе изучения факторов, определяющих оптимальность процессов хроматографического выделения минорных компонентов плазмы, разработан одностадийный метод выделения концентрата фактора IX системы свертывания из плазмы донорской крови. Осуществлено масштабирование лабораторного метода хроматографического выделения концентрат фактора IX в условиях пилотного производства, что позволило увеличить производительность процесса до объемов, достаточных для серийных наработок лекарственного препарата Агемфил В концентрата фактора IX. По результатам исследований разработан опытнопромышленный регламент на производство препарата Агемфил В, утвержденный г. Апробация работы. О результатах исследования доложено на международной конференции 2 i i мая г. Мальта. Внедрение в практику. Результаты исследования внедрены в практическую работу экспериментального производства препаратов плазмы ГНЦ РАМН. Публикации по материалам дисертации опубликовано работ. Объем и структура диссертации диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, обсуждения результатов, выводов и списка литературы 3 наименования. Работа иллюстрирована таблицами и рисунками. Материалы изложены на 5 страницах машинописного текста.