+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Регуляция экспрессии генов биосинтеза биотина в Methylobacillus flagellatum

  • Автор:

    Васин, Виталий Михайлович

  • Шифр специальности:

    03.00.15

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    1998

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    85 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы


Оглавление
Введение
Обзор литературы
1 Классификация метилотрофных бактерий. Генетика
метилотрофов.
2. Гены биосинтеза биотина у М. flagellatum
3. Роль биотина в метаболизме
4. Биосинтез биотина у различных микроорганизмов
5. Продукция биотина
6. Количественное определение биотина
Материалы и методы
1. Штаммы бактерий, фаги и плазмиды, использованные в работе
2. Методы работы с бактериями и фагами
3. Манипуляции с ДНК и РНК
4. Анализ внутриклеточных белков
Результаты и обсуждение
1. Уточнение нуклеотидной последовательности генов Ыо¥, ЫоН
ЫоС, ЬюТУ и ЫоА, определение нуклеотидной последовательности областей, прилегающих к Ыо-кластеру и её анализ.
1.1 Определение нуклеотидной последовательности
1.2 Анализ нуклеотидной последовательности
2 Локализация старта 6/оВ-гена
3 Анализ суммарной РНК

4. Локализация промотора и сайта оператора, используя
плазмиды с рекомбинантными bioB-lacZ- генами.
5. Определение точки начала транскрипции Ыо-оперона
6. Изучение условий репрессии Аю-оперона в штаммах с
интегрированными в хромосому bioB-lacZ- конструкциями.
7. Экспрессия генов биосинтеза биотина у М. flagellatum MFK1
Заключение.
8. Продукция биотина при экспрессии А/о-генов в составе
искусственных векторов в E. coli и М. flagellatum.
8.1 Экспрессия A/oß-гена М. flagellatum в E. coli
8.2 Конструирование вектора для координированной
экспрессии всех Аго-генов М. flagellatum в E. coli.
8.3 Конструирование векторов для экспрессии Аш-генов в М
flagellatum.
8.4 Продукция биотина при экспрессии А/о-генов в составе
искусственных векторов в М. flagellatum.
Выводы
Список литературы
Список сокращений
ВКПМ - Всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов
а.к. - аминокислоты
п.н. - пара нуклеотидов
т.п.н. - тысяча пар нуклеотидов
DEPC - диэтилпирокарбонат
KDa - килодальтон
IPTG - изопропил-р-[)-тиогалактозид
ORF - открытая рамка считывания
PAAG - полиакриламидный гель
PCR - полимеразная реакция амплификации
SD - последовательность Шайна-Дельгарно
SDS - додецилсульфат натрия
X-Gal - 5-бром-4-хлор-3-индолил-р-0-галактозид

Поиск последовательности гомологичной консенсусу проводили на фрагменте ВатН 1 -Bgl2 (Рисунок 4.) с помощью программы DNA-SUN [159], и привёл к следующим результатам.
В таблице 3 показано, что найдено 6 последовательностей, степень гомологии которых больше или ровно 16, из них только одна (п.5) находится в непосредственной близости от вероятного начала й/оВ-гена; четыре другие (п.1, 2, 3 и 4) расположены на расстоянии 440-697 п.н. от вероятного начала гена и одна (п.6) -17 п.н. после вероятного начала гена. Максимально соответствует консенсусу последовательность номер 4, более того, перед блоком "-35" находится "АТ"-богатая область с отношением "АТ" к "GC" как 3/1. Таким образом, наиболее вероятно, именно эта последовательность является основным промотором bio-оперона.
Известно, что сайт оператора в йіо-опероне Е. coli представляет собой последовательность с двойной симметрией. Перед йг'оВ-геном у Bacillus subtilis также обнаружен аналогичный сайт [12]. Исходя из этого, проводили поиск последовательностей, которые могли бы участвовать в механизме регуляции транскрипции, а именно прямые и инвертированные повторы. Поиск проводили с помощью программы DNA-SUN [159]. В результате поиска было найдено три сайта с выраженной двойной симметрией. Первый из них расположен в начале гена bioB, его первый нуклеотид находится в позиции 1095 (Рисунок 4, Рисунок 6 а.), сайт включает 12 симметричных нуклеотидов. Следующий сайт находится непосредственно перед й/оН-геном, его образуют 15 симметричных нуклеотидов (Рисунок 6 б.). И последний - за йг'о-опероном, в его состав входят 13 нуклеотидов (Рисунок 6 в.). Указанные последовательности показаны на рисунке 6.
В непосредственной близости от вероятных промоторов ни одной подобной

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.126, запросов: 967