Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Барская, Наталья Вячеславовна
03.00.04
Кандидатская
1984
Москва
192 c. : ил
Стоимость:
499 руб.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
I. Общие представления о регуляции сократительной
активности
1. Роль мембранных структур в регуляции мышечного сокращения
2. Тонкая структура сократительного аппарата
3. Две системы регуляции сокращения мышцы на уровне сократительных белков
а) Миозиновый тип регуляции
б) Актиновый тип регуляции
П. Роль тропонин-тропомиозинового комплекса в регуляции
сокращения скелетных мышц и сердца
1. Структура,свойства тропомиозина
2. Общая характеристика тропонина скелетных мышц и сердца
а) тропонин С
б) тропонин
в) тропонин Т
3. Особенности взаимодействия белков тонкого филамента скелетных мышц и сердца
4. Гипотетические механизмы функционирования тропонин-тропомиозинового комплекса
5. Фосфорилирование как возможный механизм тонкой регуляции активности тропонин-тропомиозинового комплекса
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
I. Выделение белков и пептидов. Исследование взаимодействия изолированных компонентов тропонина друг с
другом
1. Выделение тропонина
2. Разделение тропонина на компоненты
а) Ионообменная хроматография полного тропонина
б) Очистка тропонина С на "голубой"сефарозе
3. Расщепление тропонина С по остаткам цистеина и выделение пептидов тропонина С
4. Исследование взаимодействия С-концевого пептида тропонина С с тропонином I и тропонином Т методом электрофореза
5. Исследование взаимодействия тропонина С с тропонином Т методом гель-фильтрации и электрофореза
П. Спектральные методы исследования
1. Исследование реакционной способности БН-групп тропонина с помощью НБД-хлорида
2. Использование флуоресцентной спектроскопии для изучения катион-связывающих свойств полного тропонина, тропонина С и С-концевого пептида тропонина С сердца
а) Изучение катион-связывающих свойств полного тропонина с использованием гидрофобного зонда диметила-минонафтэйродина
б) Исследование параметров связывания двухвалентных катионов с тропонином С и его С-концевым пептидом
по величине собственной белковой флуоресценции
3. Изучение катион-связывающих свойств тропонина С
и его пептидов методом кругового дихроизма
Ш. Некоторые аналитические методы
1. Использование хелаторов для поддержания постоянной концентрации двухвалентных катионов в среде
2. Электрофорез белков и пептидов в полиакриламидном
геле
а) Электрофорез в присутствии додецилсульфата натрия
АС О
б) Исследование связывания Са с белками и пептидами
3. Определение концентрации белка и пептидов
4. Аминокислотный состав пептидов
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ
I. Ввделение тропонина и его компонентов из сердца быка
П. Изучение катион-связывающих свойств тропонина сердца
1. Использование гидрофобного зонда диметиламинонафтей-родина для обнаружения конформационных изменений тропонина, вызываемых связыванием Са2* по Са ^"-специфическим центрам
2. Локализация и свойства катион-связывающих участков тропонина С сердца
а) Химическое расщепление тропонина С по остаткам цис-теина и выделение пептидов
б) Использование собственной белковой флуоресценции для изучения катион-связывающих свойств тропонина С
и его С-концевого пептида
в) Исследование катион-связывающих свойств тропонина С
и его пептидов мет одом кругового дихрсизма
г) Изучение Са^-связывающих свойств тропонина С и его С-концевого пептида методом электрофореза
взаимодействует с этим пептидом тропонина I. Предполагается, что для модификации ингибиторного действия тропонина I на АТФазу актомиозина необходимо, чтобы произошло взаимодействие N -концевой области тропонина I с фрагментом тропонина С, находящимся между двумя Са^+-специфическими участками (остатки 49-55). Это взаимодействие возможно лишь после насыщения Са^+-епецифических участков тропонина С кальцием /89, 148/.
Несмотря на то, что все компоненты тропонин-тропомиозиново-го комплекса находятся в тесном контакте, лишь взаимодействие тропонина С с тропонином I, тропонина I с тропонином Т, тропонина Т с тропомиозином и тропонина I с актином удается обнаружить при использовании бифункциональных реагентов /37, 38, 119, 286/. Тем или иным способом можно обнаружить взаимодействие между тропонином Т и тропонином С, выделенными из скелетных мышц /67, 79, 119, 123, 308/. В то же время, взаимодействие аналогичных компонентов тропонина сердца удается обнаружить лишь в определенных условиях (значительный молярный избыток тропонина С по отношению к тропонину Т, высокая концентрация Са^+ в среде) /244/. В связи с этим ряд авторов /33, 71, 244/ высказывают предположение, что в тропонине сердца тропонин Т не взаимодействует с тропонином С, а связь этих компонентов осуществляется через тропонин I.
Рассмотрев особенности взаимодействия белков тонкого фила-мента скелетных мышц и сердца, остановимся на рассмотрении механизмов актинового типа регуляции сокращения мышцы.
4. Гипотетические механизмы функционирования троподин-тро-помиозинового комплекса. Анализ данных по дифракции рентгеновских лучей в образцах тонких филаментов мышц, находящихся в различных состояниях /ИЗ, 133, 218/, а также построение трехмерной модели тонкого филамента на основании данных электронной
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Структурные особенности мембран эритроцитов с различным содержанием холестерина в норме и при развитии атеросклероза | Бондарь, Ольга Петровна | 1984 |
Молекулярный анализ ГФИ-дефицитного клонального гематопоэза в пароксизмальной ночной гемоглобинурии | Лякишева, Анна Владимировна | 2002 |
Сателлитные ДНК цитрусовых растений | Брагвадзе, Георгий Парнаозович | 1983 |