Опиоиды костного мозга и их влияние на пролиферативную активность лимфоцитов

• Автор: Пацакова, Элена
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 133 c. : ил

1. СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЕ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАУШЯ
1.1. Опиатные рецепторы и их лиганды
1.1.1. Локализация опиатных рецепторов в органах и тканях
1.1.2. Гетерогенность опиатных рецепторов II
1.1.3. Природа и свойства опиатных рецепторов
1.1.4. Эндогенные лиганды опиатных рецепторов
1.2. Нейроэндокринная регуляция иммунной системы
1.2.1. Механизмы нейрогуморалыюй регуляции иммунной системы
1.2.2. Влияние нейропептидов на функциональное состояние шлмунокомпетентных клеток
1.2.3. Значение опиоидных пептидов в регуляции
иммунной системы
1.3. Эндокринная функция центральных органов иммунной системы
1.3.1. Иммунологически активные препараты тимуса
1.3.2. Регуляторная роль костного мозга
1.4. Цель и задачи исследования
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Радиорецепторный метод
2.1.1. Получение препарата мембран клеток головного мозга крыс
2.1.2. Радиорецепторное тестирование
2.2. Очистка ^Н-мет-энкефалпна
2.2. Радионммунологический анализ
2.4. Реакция бласттрансформации лимфоцитов под действием фжтогемагглютинина и митогена лаконоса
2.4.1. Выделение лимфоцитов из периферической крови человека
2.4.2. Культивирование лимфоцитов и определение пролиферативной активности
2.5. Материалы
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Исследование способности веществ, входящих в состав гуморального фактора костного мозга и Т-активина, взаимодействовать с опиатными рецепторами
3.2. Радгоиммунологическое определение опиоидных пептидов
в составе гуморального фактора костного мозга
3.3. Исследование влияния лигандов опиатных рецепторов и фактора костного мозга на пролиферативную активность лимфоцитов
4. ОЕСУЭДШИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АКТГ - адренокортикотропный гормон
АФТ - активная фракция тимуса
БАБ - биологически активные вещества
БСА - бычий сывороточный альбумин
ВИЛ - вазоактивный интестинальный пептид
ЛИТ - липотропный гормон
МЛ - митоген лаконоса
НЇЇ - нейропептиды
РИА - радиоиммунологический анализ
САП - гуморальный фактор костного мозга, стголулирующий антителопродукцию СТГ - соматотропний гормон ФГА - фитогемагглютинин цАМФ - циклический 3’5’-аденозинмонофосфат ЦНС - центральная нервная система

в 1-2 мл о% водного раствора меркаптоэтанола ври 3?°С. Затем в раствор добавляли 25-50 мкл I М НС1. Полученный материал наносили на колонку, заполненную смолой, и промывали 40 мл воды /скорость промывки 0,3 мл/минуту/. Связавшийся 41-мет-энкефа-лин элюировали 20 мл метанола. От метанола освобождались вакуумной отгонкой на роторном испарителе при температуре 30°С. Полученную метку растворяли в I мл воды и дважды проводили экстракцию I мл этилацетата. После экстракции собирали водный слой. Данный способ очистки обеспечивает выход в водной фазе 80/ мео о
ченого Н-мет-энкефалина. Концентрацию очищенного ^Н-мет-энке-фалина определяли с помощью измерения уровня радиоактивности о МКЛ полученного раствора В сцинтилляторе . Очищенный
Н-метэнкефалин использовали в течение четырех дней после очистки.
для оценки адекватности метода очистки через колонку про-

пускали также °Н-тирозин и трижды замороженный и размороженный
Н-мет-энкефалин. Проведенный анализ показал отсутствие евязы-

вания И-тирозина со смолой. Кроме того была обнаружена выражеиная зависимость связывания °Н-мет-энкефалина со смолой В/о Ъ<гас1 ВН-л от степени интактности пентапептида. Так, выход %-мет-энкефалина, не подвергшегося воздействию, после промывки колонки метанолом составлял около 80% /в пересчете на радиоактивность/, а выход мет-энкефалина, подвергшегося деструкции в результате замораживания, - около 30%.
2.3. Радиоиьплунологкческип анализ.
Радггаиммунологическое определение опиоидных пептидов в составе САП проводили кал; описано Дмитриевым п 'с о авт./1981/.