Механизмы токсического действия фторацетата и экспериментальная терапия острых отравлений

• Автор: Гончаров, Николай Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 352 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ТОКСИКОЛОГИЯ ФТОР АЦЕТАТА И НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ СОВРЕМЕННОЙ БИОХИМИИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Введение в токсикологию фторацетата

1.2. Аконитаза и молекулярный механизм токсического действия ФА

1.3. Вещества, метаболизм которых связан с образованием ФА

1.4. Токсикокинетнка и механизм детоксикации ФА

1.5. Токсикодинамика, клиника и патоморфология при отравлении ФА

1.6. Физиолого-биохимические механизмы действия ФА
1.7. Роль глутамата и глутамина в метаболизме млекопитающих
1.8. Некоторые аспекты биохимии мозга и действие фторацетата на клетки нервной системы
1.9. Терморегуляция и термогенез
1.10. Гонадотоксическое и эмбриотоксическое действие ФА
1.11. Терапия при интоксикации ФА
1.12. Обзор литературы: Резюме
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Токсикологические характеристики фторацетамида и фторацетата натрия в острых экспериментах с лабораторными животными
3.2. Исследование токсикокииетики фторацетата
3.3. Исследование токсикодинамики при интоксикации фторацетатом
3.3.1. Электрофизиологпческие исследования при интоксикации ФАА и ФАН
3.3.2. Биохимические признаки интоксикации ФАА и ФАН
3.3.3. Морфологические особенности токсикодинамики крыс при
остром отравлении ФАН в дозе '/гЛДЗО
3.3.4. Изучение особенностей гемодинамики при интоксикации ФА: Эндотелий-зависимая релаксация сосудов крыс
3.4. Исследование ФАН и ФЦ на изолированных клетках и митохондриях
3.4.1. Действие ФАН и ФЦ на изолированные митохондрии
3.4.2. Изучение действия ФА на эндотелиальные клетки и кардиомиоциты

3.4.3. Действие ФА на клетки асцитной карциномы Эрлиха (АКЭ)
3.4.4. Оценка функционального состояния макрофагов
3.4.5. Действие ФАН на развитие апоптоза клеток иммунной системы
3.4.6. Оценка кинетических параметров агрегации тромбоцитов методом малоуглового светорассеяния
3.4.7. Динамика | Са2' ] в тромбоцитах кролика при интоксикации ФАА
3.5. Разработка эффективных средств терапии при остром отравлении лабораторных животных ФАН
3.5.1. Выбор и апробация веществ - компонентов потенциальной терапии
3.5.2. Принципы формирование терапевтического комплекса МЕТИС
и проверка его эффективности при остром отравлении ФАН
3.6. Эксперименты по токсикокинетике и токсикодинамике при
интоксикации ФАН с применением препаратов серии МЕТИС
3.6.1. Определение фторацетата в плазме крови, гомогенатах органов
и моче крыс при интоксикации ФАН
3.6.2. Тестирование комплекса МЕТИС при интоксикации ФАН в модельных экспериментах in vivo
3.6.3. Влияние ФА на процессы ацетилпрования у крыс ‘
3.6.4. Физиологические и биохимические показатели крыс при острой интоксикации ФАА с использованием экспериментальной терапии
3.6.5. Физиологическое исследование ЭКГ, параметров внешнего дыхания и температуры крыс при осгрой интоксикации ФАН с использованием экспериментальной терапии
3.6.6. Биохимические показатели в органах и плазме крови крыс при интоксикации ФАН и применении лечебных препаратов
Глава 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
Русские аббревиатуры
АДГ - алкогольдегидрогеназа
АКЭ - асцитная карцинома Эрлиха
АлТ - аланиламинотрансфераза
АсТ - аспартатаминотрансфераза
АФК - активные формы кислорода
БАВ — биологически активные вещества
ВСР - вариабельность сердечного ритма
в/б - внутрибрюшинное (введение препарата)
в/в - внутривенное (введение препарата)
в/ж - внутрижелудочное (введение препарата)
Г6Ф - глюкозо-6-фосфат
Г6ФДГ - глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа
ГА1 — печеночная нзоформа глутаминазы
ГА2 - почечная изоформа глутаминазы
ГАМ К - у-аминомасляная кислота
ГАФДГ - глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназа
ГГТ - у-глутамилтрансфераза
ГДФ, ГТФ - гуанозинди- и гуанозинтрифосфаг
ГлДГ - глутаматдегидрогеназа
ГН — глутамат натрия
Г нС - глутаминсинтаза
ГОМК - у-оксимасляная кислота
ГТА - 4-гидрокси-»2/;анг-аконитат
ГФ - глицерол-3-фосфат, а-глицерофосфат, глицерофосфат ГФДГ - глицерофосфатдегидрогеназа, глицерол-3-фосфатдегидрогеназа мГФДГ - митохондриальная глицерофосфатдегидрогеназа цГФДГ,— цитоплазматическая глицерофосфатдегидрогеназа ГЦ - гуанилатциклаза
ГХМС - газовая хроматография - масс-спектрометрия
ГЭБ -гематоэнцефалический барьер
ДМСО - диметилсульфоксид
ДНПГ — дини гратпропиленгликоль
ДНФ - 2,4-динитрофенол

абсолютно смертельной дозы ФАА (20 мг/кг) изменения биохимических показателей нарастают через 4-5 часов: уровень глюкозы и лактата повышается в 3 раза, цитрата в сердце - в 4 раза, в почках - в 2,5 раза [Egyed, Brisk, 1965].
У других животных при сублетальных дозах ФА концентрация цитрата в тканях начинает увеличиваться через 30 минут после введения яда, достигает максимума через 4-6 часов с последующим падением до нормы примерно через 40 часов [Pattison, 1959]. При острой интоксикации ФА концентрация цитрата в сердце крыс увеличивается в 8-15 раз и в сыворотке в 5-10 раз. Однако у собак цитрат увеличивается всего в 2-3 раза в сердце и сыворотке, а концентрация АТФ в сердце уменьшается незначительно. И у крыс, и у собак наблюдается значительная гипергликемия - двукратное увеличение глюкозы- в крови, коррелирующее с уровнем цитрата в плазме. Общий кальций плазмы собак был уменьшен на 18% при дозе ФЦ 8 мг/кг в/в, наблюдалась обратная корреляция с уровнем цитрата в плазме [Bosakowski, Levin, 1986]: Снижение ионизированного кальция и выраженный
метаболический ацидоз с повышенным уровнем лактата наблюдали в эксперименте на анестезированных кошках с искусственной вентиляцией и внутривенным введением ФАН [Taitelman et al., 1983а]. Концентрация глюкозы в крови крыс может повышаться в 3 раза через 24 часа после введения ФА (250 мг% по сравнению с 80 мг% в контроле), при этом также было отмечено повышение лактата в крови, время и дозозависимые изменения данных показателей [Engel et al., 1954]. Однако уровень общего кальция в крови крыс не изменился [Bosakowski, Levin, 1986].
Увеличение концентрации цитрата прямо пропорционально дыхательной активности ткани: метаболически активные ткани - сердце, почки, селезенка - в максимальной степени накапливают цитрат. Однако в печени, также имеющей высокий респираторный уровень и метаболическую активность, наблюдается невысокое накопление цитрата [Cole et al., 1955; Twigg et al., 1986]. Отмечена корреляция уровня цитрата с мышечной активностью: так, в диафрагме накапливается больше цитрата, чем в мышцах бедра. Получены данные о том, что в печени скорость накопления цитрата регулируется половыми гормонами [Ord, Stocken, 1953; Buffa et al., 1972], а также зависит от характера питания: в печени голодного животного накопление цитрата незначительно или отсутствует вовсе [Buffa, Peters, 1950; Potter, Busch, 1950; Ord, Stocken, 1953]. В то же время имеются сведения, что и при голодании интоксикация ФА вызывает накопление цитрата в печени, если содержание глутатиона в этом органе ниже нормы [Mead et al., 1985].
Повышение уровня цитрата в- клетках при интоксикации ФА приводит к нарушению метаболизма глюкозы вследствие снижения активности ключевого фермента гликолиза — фосфофруктокиназы [Bowman, 1964; Peters, 1972]. Кроме того, снижается активность