Пируваткиназа печени и ее роль в регуляции гликолиза у крыс при витамин B1-недостаточности

• Автор: Коноваленко, Ольга Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1992
• Место защиты: Гродно
• Количество страниц: 118 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Характеристика физико-химических и термодинамических свойств пируваткиназы
1.2. Выделение, очистка и характеристика свойств молекулярных форм пируваткиназы..,..,,..
1.3. Регуляция пируваткиназы 1-типа
Глава 2. УСЛОВИЯ ОПЫТОВ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Условия опытов
2.2. Методы исследования
Глава 3. ОЧИСТКА И НЕКОТОРЫЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА I—ПИРУВАТКИНАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ
3.1. Выделение и очистка фермента 44 .
3.2. Фракционирование изоформ пируваткиназы печени крысы
3.3. Гомогенность фермента, его субъединичный состав
3.4. Влияние ионной силы раствора, ионов pH среды и нуклеозиддифосфатов на активность 1 -пируваткиназы тиаминдефицитных животных
Глава 4. РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ (.-ПИРУВАТКИНАЗЫ ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ВИТАМИН В1-НЕДОСТАТОЧНОСТИ
Глава 5. . ИЗОФЕРМЕНТНЫЙ СПЕКТР ПИРУВАТКИНАЗЫ ПЕЧЕНИ ТИАМИВДЕФЙВДТНЫХ КРЫС И КИНЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЬИЗОФОРШ ФЕРМЕНТА

Глава 6. ВЛИЯНИЕ ГОЛОДАНИЯ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ И ИЗОФЕРМЕНТНЫЙ СОСТАВ ПИРУВАТКИНАЗЫ
ПЕЧЕНИ
Глава 7. РЕГУЛЯЦИЯ ГЛИКОЛИЗА НА УРОВНЕ ПИЕШТКИНА-ЗЫ В ТКАНИ ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ВИТАМИН В-[-НЕ-
ДОСТАТОЧНОСГИ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ Аденозиндифосфат АДФ
Аденозинмонофосфат циклический цАМФ
Глюкозо-6-фосфат г-б-ф
Гуанозиндифосфат ГДФ
Гексокиназа . ГК
Додецилсульфат натрия Дс-ша
Дитиотреитол ДТТ
Инозиндифосфат ИДФ
Лактатдегидрогеназа ЛДГ
Никотинашдадениндинуклеотид НАД+
Никотинащцадениндину кле отид
восстановленный НАДН
Пируваткиназа ПК
Транекетолаза ТК
Тиаминдифосфат ТДФ
Уридиндифосфат УДФ
Феназинметосульфат ФМС
Фруктозо-1,6-дифосфат фр-1,6-диф
Фосфоэнолпируват . ФЭП
Цитидиндифосфат ЦЦФ
Этилендиаминтетраукеусная кислота ЭДТА

Глава 2 . УСЛОВИЯ ОПЫТОВ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Условия опытов.
2.1.1. Подготовка животных, забор тканей и
их хранение.
Исследования проведены на 300 белых беспородных крыеах-самцах массой 140-200 г. Отобранные по массе в однородные группы животные во время опыта содержались на обычном рационе вивария и имели свободный доступ к воде. За 12 часов до забоя, который осуществлялся декалитацией, крыс лишали корма. Быстро извлеченные ткани фиксировали жидким азотом и в дальнейшем использовали для определения общей активности ферментов и выделения пируваткиназы. Забор тканей для определения концентрации субстратов проводили на наркотизированных животных. Ткань фиксировали методом замораживания-сдавливания и хранили для проведения анализов.
2.1.2. Окситиаминовый В|-гиповитаминоз.
Моделирование витамин Врнедостаточности у животных осуществляемое применением бестиаминовой диеты сопряжено е трудностями и сопутствующими нарушениями. Использование окситиами-на в моделировании тиаминового дефицита (18) дает возможность достичь воспроизводимого и специфического авитаминоза у животных в короткие сроки. Особенность тиаминовой недостаточности, вызываемой окситиамином, заключается в отсутствии неврологических нарушений, так как антивитамин не проникает через гема-то-энцефалический барьер. Дозированное применение окситиамина позволяет достигнуть гиповитаминозного состояния различной степени глубины: от слабо выраженных до тяжелых форм тиаминового дефищта у животных.
Экспериментальное моделирование Врнедостаточности (18)