+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Функциональные свойства продуктов генетического локуса киназы легких цепей миозина

  • Автор:

    Кудряшов, Дмитрий Семенович

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2000

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    170 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы


ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ РАБОТЫ
ГЛАВА 1. МИОЗИН М-ОГО ТИПА
1. Строение и особенности функционирования немышечного и 11 гладкомышечного миозина И-оготипа.
1.1. Строение миозина ll-ого типа
1.1.1. Молекула миозина - гексамер
1.1.2. Регуляторные легкие цепи миозина
1.1.3. Существенные легкие цепи миозина
1.2. Конформационные состояния молекулы миозина
1.2.1. 10S и 6S конформации
1.2.2. Зависимость преобладания 10S или 6S конформаций
миозина от внешних условий
1.3. Полимеризация миозина
1.3.1. Структуры молекулы миозина, участвующие в
формировании межмолекулярных связей в филаменте
1.3.2. Динамика формирования филаментов
1.3.3. Строение миозиновых филаментов
1.3.4. Дефосфорилированный миозин поддерживает
филаментарную структуру in vivo
1.3.5. Возможные механизмы стабилизации филаментов
дефосфорилированного миозина
ГЛАВА 2. КАЛЬДЕСМОН - БЕЛОК РЕГУЛЯТОР СОКРАТИТЕЛЬНОГО АППАРАТА НЕМЫШЕЧНЫХ ТКАНЕЙ И ГЛАДКИХ МЫШЦ
2.1. Введение
2.2. Экспрессия кальдесмона в различных тканях
2.3. Внутриклеточная локализация изоформ кальдесмона
2.4. Физико-химические свойства кальдесмона
2.5. Доменная организация и функциональные свойства
молекулы кальдесмона
2.5.1. Общий план доменной организации молекулы кальдесмона
2.5.2. Функционально значимые участки С-концевого домена
кальдесмона
2.5.2.1. Участки взаимодействия с актином
2.5.2.2. Связывание с тропомиозином
2.5.2.3. Взаимодействие с комплексом Са2+-кальмодулин
2.5.3. Функционально значимые участки N-концевого домена
кальдесмона
2.5.3.1. Миозин-связывающие центры
2.6. Тропомиозин-зависимое ингибирование АТФ-азы актомиозина
2.7. Кальдесмон как структурный компонент сократительного
аппарата
ГЛАВА 3. ПРОДУКТЫ ГЕНЕТИЧЕСКОГО ЛОКУСА КЛЦМ
3.1. Введение

3.2. Строение генетического локуса киназы легких цепей миозина
3.2.1. Ген КИР
3.2.1.1. Строение гена КИР
3.2.1.2. Сравнение устройства гена КИР человека и курицы
3.2.2. Строение гена КЛЦМ
3.3. Тканевое распределение продуктов генетического локуса
КЛЦМ в эмбриогенезе и во взрослом организме
3.3.1. Экспрессия КЯР регулируется промотором, специфичным
для гладких мышц
3.3.2. Экспрессия изоформ КЛЦМ в разных тканях в различные
периоды онтогенеза
3.3.2.1. Экспрессия изоформ КЛЦМ в мышечных тканях
3.3.2.2. Экспрессия изоформ КЛЦМ в немышечных тканях и
клеточных культурах
3.3.2.3. Внутриклеточная локализация изоформ КЛЦМ
3.4. Строение и функциональные свойства продуктов
генетического локуса киназы легких цепей миозина
3.4.1. Строение КЛЦМ
3.4.1.1. Физико-химические свойства КЛЦМ
3.4.1.2. Доменное строение КЛЦМ
3.4.2. Функциональные свойства КЛЦМ
3.4.2.1. Роль КЛЦМ в функционировании немышечных тканей и
гладких мышц
3.4.2.2. Механизм регуляции активности КЛЦМ
3.4.2.3. Ингибиторное действие КЛЦМ-108 на подвижность
актомиозиновых нитей in vitro
3.4.2.4. Связывание КЛЦМ-108 с актином
3.4.2.4.1. Участки связывания КЛЦМ с актином
3.4.2.5. Взаимодействие КЛЦМ-108 с миозином
3.4.2.6. Фосфорилирование КЛЦМ как способ регуляции ее
активности
3.4.2.6.1 Фосфорилирование КЛЦМ Са /кальмодулин-зависимой
ПКІІ
3.4.2.6.2. Фосфорилирование КЛЦМ ПК-С
3.4.2.6.3. Фосфорилирование КЛЦМ ПК-А
3.4.2.6.4. Фосфорилирование КЛЦМ МАП-киназой и циклин
зависимой киназами-1 и 2 (cdk-1,2)
3.4.2.6.5. Аутофосфорилирование КЛЦМ
3.4.3. Строение и функциональные особенности КЛЦМ
3.4.3,1. Первичная структура КЛЦМ
3.4.3.2. Функциональные свойства КЛЦМ
3.5. Структура и свойства КИР
3.5.1. Строение молекулы ККР
3.5.1.1. Физико-химические свойства КИР
3.5.1.2. Третичная структура молекулы КРР
3.5.2. Гетерогенность К(ЧР
3.5.3. Функциональные свойства ИКР
3.5.3.1. Взаимодействие КРР с миозином
3.5.3.1.1. Участки молекулы КИР, ответственные за связывание
миозина
3.'5.3.1.2 Участки связывания с КИР на молекуле миозина

3.5.3.1.3. KRP стабилизирует развернутую конформацию миозина
3.5.4. KRP ингибирует активность КЛЦМ
ГЛАВА 4. МЕТОДЫ
4.1. Биохимические и физико-химические методы
4.1.1. Определение концентрации белков
4.1.2. Электрофорез и денситометрия
4.1.3. Выделение белков
4.1.4. Электронная микроскопия белков
4.1.5. Дифференциальное ультрацентрифугирование
4.1.6. Определение активности КЛЦМ и фосфорилирование
миозина
4.1.7. Фосфорилирование фрагментов КЛЦМ
4.1.8. Приготовление образцов тканей для электрофореза
4.2. Иммунохимические методы
4.2.1. Получение и характеристика антител к уникальному
домену КЛЦМ
4.2.2. Иммуноблоттинг
4.3. Молекулярно-биологические методы
4.3.1. Генетическое конструирование фрагментов N934 и N875
КЛЦМ-210 для экспрессии в клетках E.coli
4.3.2. Генетическое конструирование фрагмента N875 для
экспрессии в эукариотической бакуловирусной системе; экспрессия и выделение продукта
4.3.3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
4.4. Статистический анализ
РЕЗУЛЬТАТЫ
ГЛАВА 5. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА КПЦМ-210 И ЕЕ
УНИКАЛЬНОЙ N-КОНЦЕВОЙ ОБЛАСТИ
5. Введение
5.1. Выделение КЛЦМ-210 и изучение ее функциональных
свойств
5.1.1. Выделение КЛЦМ-210 из ткани аорты курицы
5.1.2. Функциональные свойства КЛЦМ
5.1.2.1. Каталитическая фосфотрансферазная активность КЛЦМ
5.1.2.2. Связывание КЛЦМ-210 с актином и миозином
5.2. Изучение функциональных свойств уникальной N
концевой области КЛЦМ
5.2.1. Создание генетических рекомбинантных фрагментов
соответствующих уникальной части КЛЦМ-210, и экспрессия кодируемых ими полипептидов
5.2.2. Связывание фрагментов N934 и N875 с актином и
миозином
5.2.3. Связывание уникальных доменов КПЦМ-210 с актином
приводит к образованию пучков Ф-актина
5.2.4. Связывание фрагмента N875 с кератином

Располагаясь вдоль актинового филамента, тропомиозин может занимать «включенное» положение, когда актин может активировать АТФазу миозина, или «выключенное» положение, когда активации АТФазы не происходит. Именно кальдесмон при невысоком молярном соотношении к актину, так же как тропониновый комплекс в скелетных мышцах, переводит тропомиозин в выключенное состояние. Снятие ингибирующего действия кальдесмона in vitro, и, по всей видимости, in vivo достигается связыванием с кальдесмоном комплекса Са2+-кальмодулин. Интересно, что при этом не происходит диссоциации кальдесмона от актина, а снятие ингибирования происходит за счет индуцированного кальдесмоном перехода тропомиозина из «выключенного» во «включенное» состояние (Marston & Huber, 1996).
Физиологические эксперименты показали, что в условиях in vivo кальдесмон проявляет свое ингибирующее действие. Установлено, что транзиторная трансфекция l-кальдесмона приводит к ингибированию зависимого от миозина-ll сократительного ответа клеток и к уменьшению количества фокальных контактов (Helfman et al., 1999). Понижение уровня экспрессии h-кальдесмона на 78 % в ткани коронарной артерии с помощью трансфекции антисмысловой ДНК показало, что в покоящихся гладких мышцах кальдесмон, по всей видимости, ингибирует оставшиеся активными мостики между актином и миозином (Earley et al., 1998).
2.7. Кальдесмон как структурный компонент сократительного аппарата
Кальдесмон играет важную структурную роль в формировании цитоскелета клетки. Он принимает участие в формировании контактов

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.185, запросов: 967