Шапероноподобная активность фактора ингибирования миграции макрофагов

• Автор: Черепкова, Оксана Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 107 с. : ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Актуальность проблемы
Цели и задачи исследования
Научная новизна и практическая ценность работы
ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1. Молекулярные шапероны
• Семейство ШрбО
Семейство Шр70
Семейство НБр90
Семейство ШрІОО
Малые белки теплового шока
Специализированные шапероны
Роль белков теплового шока в функционировании живых систем в норме и патологии
• Шапероноподобные белки
Кальнексин и кальретикулин
Протендисульфидизомераза
Пептидил-пролил-цис-транс-изомераза, триггер фактор
Антитела как специфические шапероны
Ускорение агрегации белков
2. Фактор ингибирования миграции макрофагов
• МІБ и глюкокортикоиды

Структура МІР
Ф Механизм таутомеразной активности МІР
Таутомеразные ингибиторы
Рецептор МІР
МІР-связьівающие белки
М1Р-подобные белки
Клеточные и тканевые источники МІР
Передняя доля гипофиза
Моноциты/макрофаги
ф Т-клетки
Участие МІР в патогенезе некоторых заболеваний
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы
Получение экстракта мозга быка
Г ель-фильтрация
]Ч-концевое микросеквенирование
Кето-енол таутомеразная активностьМИ1
Электрофорез и иммуноблоттинг
Обратно-фазовая НРЬС
Эксклюзионная хроматография в системе РРЬС
Выделение гликогенфосфорилазы Ь из скелетных
мышц кролика
Определение ферментативной активности РЬ Ь
и МИН
Анализ шапероноподобной активности
• РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Выделение МИ? из мозга быка
Свойства МП?
Шапероноподобная активность МП?
Влияние М1И па агрегацию модельных белковых субстратов
Анализ кинетических кривых агрегации
Предполагаемый механизм действия М1И
Исследование изменения ферментативной активности
субстратов в процессе агрегации
Усиление агрегации белков в присутствии М1Б
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ

Обнаружение того, что мощный противовоспалительный агент -кортизол способен стимулировать макрофаги и Т-клетки секретировать "провоспалительный" цитокин, является парадоксом. Это стало понятным, когда MIF, будучи добавленным вместе с дексаметазоном к моноцитам, мог "преодолевать" дозо-зависимым образом подавление глюкокортикоидами секреции моноцитами TNF, IL-10, IL-6 и IL-8 [Frantz, Wilson, 1992]. Этот эффект был доказан также на первичных культурах моноцитов и различных макрофагов. Кроме того, способность rMIF "преодолевать" подавление секреции цитокинов глюкокортикоидами также наблюдалась на альвеолярных макрофагах, полученных от пациентов с острым респираторным дистресс-синдромом и, таким образом, активизированных in vivo, в отсутствие экзогенного LPS.
Экспериментально было доказано, что эндогенное высвобождение MIF направлено на противодействие подавлению глюкокортикоидами накопления TNF. Это оказалось возможным при использовании анти-MIF антител на культурах моноцитов человека, подвергнутых действию LPS и дексаметазона. В этом случае накопление TNF ингибировалось только на 9%, в то время как в присутствии анти-MIF антител - на 32% [Orth et al., 1992]. Таким образом, анти-MIF антитела потенцировали ингибирующее действие дексаметазона на секрецию моноцитами MIF, который является основным фактором, определяющим продукцию цитокинов в данной модельной системе in vitro.
Т-клетки. Хотя изначально MIF рассматривался как Т-лимфокин, действующий на макрофаги, в настоящее время показана его экспрессия макрофагами. Эндотоксины, экзотоксины и цитокины, в числе которых IFNy и TNF, стимулируют высвобождение MIF из макрофагов.
Очень мало известно относительно участия MIF в функционировании Т- или В-клеток. Было продемонстрировано присутствие преформированного MIF в нестимулированных Т-клетках [Nishino et al., 1995]. Показано также,