Исследование тополитических эндоглюканаз и ксиланаз ферментных комплексов Penicillium verruculosum и Trichoderma reesei

• Автор: Берлин Хенис, Алехандро
• Шифр специальности: 02.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 179 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
ГЛАВА 1. КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ ЦЕЛЛЮЛАЗНЫХ И КСИЛАНАЗНЫХ КОМПЛЕКСОВ
ГЛАВА 2. ДОМЕННАЯ СТРУКТУРА ЦЕЛЛЮЛАЗ И КСИЛАНАЗ
ГЛАВА 3. МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ ЦЕЛЛЮЛАЗ И КСИЛАНАЗ
ГЛАВА 4. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О КЛАССИФИКАЦИИ ЦЕЛЛЮЛАЗ И КСИЛАНАЗ
ГЛАВА 5. ХАРАКТЕРИСТИКИ ШТАММОВ PENICILLIUM VERRUCULOSUM И TRICHODERMA REESEIИ КОМПОНЕНТОВ СЕКРЕТИРУЕМЫХ ИМИ ФЕРМЕНТНЫХ КОМПЛЕКСОВ
ГЛАВА 6. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТОПОЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЦЕЛЛЮЛАЗ И КСИЛАНАЗ В ТЕКСТИЛЬНОЙ И БУМАЖНОЙ ОТРАСЛЯХ ПРОМЫШЛЕННОСТИ
II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 7. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
7.1. Использованные вещества
7.1.1. Ферментные препараты
7.1.2. Субстраты и реактивы
7.1.3. Хроматографические носители

7.2. Методы.
7.2.1. Аналитические методы
7.2.2. Методы определения активностей ферментов
а) Определение активностей целлюлаз и ксиланаз.
б) Определение активности папаина.
7.2.3. Изучение pH- и температурных оптимумов гомогенных ферментов
7.2.4. Изучение адсорбционной способности ферментов на целлюлозе
7.2.5. Определение кинетических параметров ферментов
7.2.6. Выделение и очистка индивидуальных ферментов из ферментных комплексов Pénicillium verruculosum и Trichoderma reesei
7.2.7. Определение биохимических параметров индивидуальных ферментов
7.2.8. Субстратная специфичность индивидуальных целлюлаз и ксиланаз
7.2.9. Протеолиз целлюлаз и ксиланаз папаином
7.2.10. Химическая модификация карбогидраз: титрование карбоксильных групп
7.2.11. Цветометрическая оценка тополитических свойств ферментных препаратов и гомогенных целлюлаз и ксиланаз
а) Оценка “абразивности” ферментов по “депигментации” окрашенных индиго хлопковой ткани и волокон.
б) Оценка способности ферментов к удалению лазерных тонеров из офисной бумаги.
в) Оценка способности ферментов к биоотбеливанию целлюлозной пасты.
7.2.12. Оценка влияния целлюлаз и ксиланаз на ресорбцию индиго
на целлюлозной матрице
7.2.13. Методы компьютерного моделирования структуры белка

III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 8. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ГИДРОЛИТИЧЕСКОЙ И ТОПОЛИТИЧЕСКОЙ СПОСОБНОСТИ ЦЕЛЛЮЛАЗНЫХ ПРЕПАРАТОВ.
8.1. Разработка метода оценки тополитической активности целлюлаз на основе эффекта “депигментации” хлопковой ткани, окрашенной
индиго
8.2. Сравнительная оценка тополитической и гидролитической активностей ферментных препаратов
ГЛАВА 9. ИЗУЧЕНИЕ СПОСОБНОСТИ ЦЕЛЛЮЛАЗНЫХ И КСИЛАНАЗНЫХ КОМПЛЕКСОВ К УДАЛЕНИЮ ЛАЗЕРНЫХ ТОНЕРОВ ИЗ БУМАЖНЫХ ВОЛОКОН И К БИООТБЕЛИВАНИЮ ЦЕЛЛЮЛОЗНОЙ МАССЫ.
9.1. Сравнительная оценка тополитической способности целлюлаз и ксиланаз по их способности к удалению лазерных тонеров из офисной бумаги
9.2. Сравнительная оценка тополитической способности целлюлаз и ксиланаз по их активности к отбеливанию целлюлозной массы
ГЛАВА 10. ТОПОЛИТИЧЕСКИЕ КСИЛАНАЗЫ И ЭНДОГЛЮКАНАЗЫ ИЗ ФЕРМЕНТНЫХ КОМПЛЕКСОВ PENICILLIUM VERRUCULOSUMR TRICHODERMA REESEI.
10.1. Выбор «»политических фракций ферментных комплексов.
10.1.1. Разделение ферментных комплексов на белковые фракции
10.1.2. Изучение гидролитической способности фракций
10.1.3. Выявление ключевых «политических фракций
ферментных препаратов
10.1.4. Изучение способности основных ксиланазных фракций к биоотбелива-ншо целлюлозной пасты
Таблица 2. Свойства гомогенных ферментов, секретируемых микроскопическим грибом Тпскос1егта гееве1.
Фермент Обозначение КФ М, кДа р! Аминокислоты Ген Вид синергизма % углеводов
ЦеллобиогидролазаI СВН I112 3.2.1.91й4 59-68 И6-1,7 3,95'24 3.5-4.2116 497116 СЪЪ1"7 Экзо-Эндо (с ЕС 3 и Ев II)128 Экзо-Экзо (с СВН Ц)125 128 129 10ш
Целлобиогидролаза II СВН II112 3.2.1.91112 50-58"*"» 5,90124 51.611,111.11? 447П6 С.Ък2"'"' Экзо-Эндо (с ЕЭI и Ев II)128 Экзо-Экзо (с СВН у)125 128-129 8130
Целлобиаза (р-глюкозидаза) рЧ5Ьи! 3.2.1.21112 98121 70122 4,4Ш 8,4122 и.о. но. И.О. Н. О.
Эндоглюканаза 1 БОГ12 3.2.1.4112 50.55116,120 4,0-4,б116,120 437И6 Е%11т Экзо-Эндо (с СВН I, П)ш 2-7530
Эндоглюканаза II (III) ЕОИ'12 3.2.1.4,,:2 48116-120 5,7124 5,5й6' 120 397116 (раньше еф) Экзо-Эндо (с СВН I, II)128 н.о.
Эндоглюканаза Ш ЕСIII"6 3.2.1.4112 2116, 125 7,4"6'115 218116 Н. О. н.о.
Эндоглюканаза V Ев V1“ 3.2.1.4116 23'“ И. О. 225116 Н. О. н.о.