Клинико-патогенетическое значение исследования активности ферментов адениловой ветви пуринового метаболизма в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ревматоидным артритом

• Автор: Ушакова, Ирина Сергеевна
• Шифр специальности: 14.00.39
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 202 с. : 8 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРА1ЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. ЭНЗИМЫ АДЕНИЛОВОГО ПУЛА ПУРИНОВОГО

МЕТАБОЛИЗМА В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Часть II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ

РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ

Глава 3. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Выделение клеток крови и приготовление их лизатов

3.2. Определение активности аденозиндезаминазы
3.3. Определение активности АМФдезаминазы
3.4. Определение активности адениндезаминазы
Глава 4. ЭНЗИМНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ У ЗДОРОВЫХ ЛЮДЕЙ
Глава 5. АКТИВНОСТЬ ЭНЗИМОВ В КРОВИ БОЛЬНЫХ РА
В ПРОЦЕССЕ ЛЕЧЕНИЯ.
5.1. Энзимные исследования у больных РА с I степенью активности процесса.
5.2. Энзимные исследования у больных РА с II степе
ныо активности процесса.
5.3. Энзимные исследования у больных РА с III степе
ныо активности процесса
ОБСУЖДЕНИЕ.
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ .
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Существуют различные методы определения активности АДА в биологических жидкостях и тканях организма. Широко распространены мето
ды, основанные на определении аммиака, выделяющегося в ходе катализируемой АДА реакции. Наиболее простым является метод, основанный на определении аммиака с помощью реактива Несслера. Недостатками метода являются токсичность реагента Несслера и нестабильность раствора комплекса Несслера . Метод Мартинека основан на калориметрическом определении аммиака с помощью фенолгипохлоритного реактива 1. В ферментативном методе освобождающийся аммиак измеряется путем НАДНзависимой реакции восстановительного аминирования 2оксоглутарата с помощью глутаматдегидрогеназы, для которой образующийся в ходе первой реакции аммиак является одним из субстратов. За кинетикой, реакции следят по уменьшению оптической плотности при 0 нм 9,3,3. Большой популярностью пользуются методы определения активности АДА по количеству образовавшегося в ходе катализируемой реакции инозина. Наиболее часто в таких случаях применяется спектрофотометрический метод, предложенный Ка1скаг в г. Метод удобен, прост и достаточно чувствителен. Кинетический непрерывный вариант основан на использовании ферментов пуриннуклеозидфосфорилазы и ксантиноксидазы, которые последовательно превращают выделяющийся в основной реакции инозин сначала в гипоксантин, а затем в мочевую кислоту с увеличением в абсорбции при 3 нм 8, 6. Такой ферментативный метод определения АДА с участием пуриннуклеозидфосфорилазы и ксантиноксидазы был предложен Норктэоп в г.