Молекулярно-генетические методы в изучении эпидемиологии инфекций, возбудители которых передаются парентеральным путем

• Автор: Бобкова, Марина Ридовна
• Шифр специальности: 14.00.30
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 216 с. : ил

ВВЕДЕНИЕ. Эпидемиология ВИЧ1 в России. ВИЧ1 особенности биологии и структура генома. ВИЧ1 и парентеральные инфекции. Вирус гепатита С. Возможные механизмы взаимного влияния ВИЧ и ВГС при коинфекции. Вирусный гепатит В. Эпидемиология и биологические свойства вируса гепагита В. ВГВ и его связь с ВИЧинфекцией. Эпидемиология инфекций, вызываемых V I II. Биология вирусов V III. Клинические проявления инфекции V III. V III и его связь с ВИЧинфекцией. Факторы, влияющие на развитие ВИЧинфекции. Клиническое значение анализа генома человека. А.2. Детекция ВИЧ. Обратная транскрипция и ОТПЦР. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Группы обследованных лиц. Бактериальные штаммы. Питательные среды. Приготовление компетентных клеток ii i и трансформация их епаратами плазмидной ДНК. Иммуноферментный анализ ИФА. Определение генотипа ВИЧ1 методом ИФА с применением ВИЧ1субтипецифических пептидов I. Принцип их использования основывается на том факте, что с течением времени естественный мутационный процесс приводит к накоплению мутаций в составе генома вируса в результате эпидемически связанные варианты вируса проявляют большую степень генетического родства, чем не связанные между собой т.


Данные, полученные с помощью секвенирования, однако, опровергли это предположение и с уверенностью позволили определить источник указанной эпидемии в популяции наркоманов СШЛ v i, . В ЮгоВосточной Азии аналогичным образом были использованы данные секвенирования для отслеживания путей распространения героина Веугег , . Метод секвенирования является наиболее надежным и информативным для проведения типирования, однако недостатком ею является высокая стоимость исследований и необходимость специального оборудования. Принцип метода , основывается на том факте, что двуцепочечная ДНК имеет более правильно организованную структуру по сравнению с одноцепочечной ДНК. Образование двуцепочечных участков при гибридизации одноцепочечных молекул ДНК приводит к формированию компактных и, как следствие, более подвижных в электрическом поле гибридных молекул гетеродуплексов, при этом их подвижность обратно пропорциональна содержанию двуцепочечных участков в составе гстсродуплскса и, таким образом, отражает степень генетического родства молекул ДНК, участвующих в гибридизации. В качестве стандартов для гибридизации используются фрагменты генома, предварительно расшифрованные методом секвенирования и клонированные в составе того или иного вектора процедуре гибридизации предшествует амплификация методом ПЦР раздел 4. Метод достаточно прост в исполнении, не требует дорогостоящей экипировки лаборатории, при этом наблюдается высокая степень совпадения получаемых результатов с данными прямого секвенирования , v , Бобков и др.