Орексинэрические нейроны гипоталамуса крыс Wistar при введении липополисахарида

• Автор: Перекрест, София Владимировна
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 94 с. : 15 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Перечень условных обозначений.

Введение.

Обзор литературы.

Взаимодействие нервной и иммунной систем

Изучение влияния нейроэндокринной системы на функции иммунной системы

Изучение влияния медиаторов иммунной системы на активацию клеток

сшрукур ЦНС.

Орексин и орексннсодержащие нейроны

Структура орексинов А и В.

Характеристика орексинсодержащих нейронов

Рецепторы к орексином.
Участие орексинсодержащих нейронов в регуляции вегетативных функций.
Пищевое поведение.
Цикл сонбодрствование
Влияние орексина на гемодинамику и водносолевой обмен
Участие орексина в эндокринной регуляции
Орексины и стресс.
Эффекты лнпонолнсахарида
Заключение
Методы исследовании.
Экспериментальные животные и схема эксперимента.
Экспериментальные группы
Иммуногистохимическое окрашивание.
Подсчет количества клеток
Полимсразноцепнан реакция в режиме реального времени.
Электрофорез в агарозном геле.
Статистическая обработка данных.
Результаты исследования.
Количество сГовиозитивных нейронов гипоталамуса после введения ЛПС.
Орексннпозитнвные нейроны гипоталамуса поеле введения ЛГС.
Определение уровня экспрессии гена препроорексина в нейронах гипоталамуса крыс после введення ЛПС.
Обсуждение результатов
Список литературы


В этих же структурах локализованы нейроны, имеющие рецепторы к орексину (Hervieu G. J. et al, ; Trevedi P. Taheii S. Рецепторы к орексину или их мРНК обнаружены и на клетках различных тканей, участвующих в реализации иммунного ответа (клетки селезенки, надпочечников, печени, стволовые клетки фенотипа CD+) (Randeva H. S. et al, ; Zhang S. Steidl U. Установленные к настоящему времени многочисленные факты могут свидетельствовать в пользу возможного участия системы орексин-содержащих нейронов и самого орексина в регуляции функций иммунной системы. Наличие нейро-иммунных взаимодействий не вызывает сомнений, однако механизмы их до сих пор остаются не до конца раскрытыми и нуждаются в дальнейших исследованиях. Известно, что нейроны LHA участвуют в регуляции функций иммунной системы, например, электростимуляция этой области гипоталамуса, где и локализованы орсксин-содержащие нейроны, усиливает цитотоксическую активность NK клеток селезенки (Wrona D. Wenner М. Нейроны латеральной гипоталамической области также связаны полисинаптически с нейронами, иннервирующими селезенку (Cano G. Denes А. Denes A. Необходимо подчеркнуть, что переднее гипоталамическос ядро, заднее гипогаламическое поле и латеральная гипоталамическая область активируются в первые часы после введения антигенов различной природы, таких как липополисахарид (ЛПС) (Elmquist J. K. et al, ; Gaykema R. P.H. Yi-Hong et al, ), столбнячный анатоксин (Корнева EA и др. В (Gaykema R. P.H. Goehler L. E. et al, ). Изучение паттерна активации гипоталамических структур, а также исследование динамики распределения орексин-содежащих нейронов гипоталамуса в первые часы после антигенного воздействия представляется важным этапом для расшифровки этих механизмов на ранней стадии формирования иммунного ответа. Определение уровня экспрессии гена препроорексина в клетках гипоталамуса позволяет проанализировать молекулярные механизмы формирования ответа орексин-содержащих нейронов, вовлекающихся в реакции ЦНС на антигенный стимул. Целью данного исследования явилось изучение реакций орексинэрги-ческих нейронов гипоталамуса крыс на введение антигена липополисаха-рида в различных дозах. Исследовать степень активации клеток и структур гипоталамуса (по выявлению с-Роб белка) через 2 часа после внутривенного введения липополисахарида в дозах и 0 мкг/кг веса животного. Исследовать морфо-функциональные характеристики орексин-содержащих нейронов гипоталамуса крыс через 2, 4 и 6 часов после внутривенного введения липополисахарида в дозах и 0 мкг/кг веса животного. Исследовать уровень экспрессии гена препроорексина в клетках гипоталамических структур крыс через 2, 4 и 6 часов после внутривенного введения липополисахарида в дозе и 0 мкг/кг веса животного. Впервые получены данные о степени активации гипоталамических структур в ответ на введение антигена лииополисахарида в различных дозах (иессптической и субсептической). Показано участие орексин-содержащих нейронов в ответных реакциях ЦНС па антигенное воздействие, а также выявлен дозозависимый характер динамики изменений их морфо-функциональных характеристик. Впервые проведен сравнительный анализ изменений уровня экспрессии гена препроорексипа и выявление орексина по иммунореактивности орсксин-содержащих нейронов гипота-ламических структур после введения антигена. Полученные в работе данные значимы для раскрытия центральных механизмов нейроиммунных взаимодействий и являются важным этапом в изучении процесса реализации реакции ЦНС на антигенное воздействие, что создает основу для поиска путей коррекции нарушений процессов взаимодействия нервной и иммунной систем. Результаты работы расширяют и дополняют сложившиеся в настоящее время представления о морфо-функциональных особенностях системы орексинэргичеких нейронов и могут быть использованы в научной практике, связанной с исследованием клеточных и молекулярных механизмов формирования реакций организма на антигенное воздействие, а также могут быть включены в курс преподавания по физиологии, патофизиологии, нейрофизиологии и иммунологии.