Изменения локусов Alu-VpA/MycL1 (1p34.3) и YNZ22 (17p13.3) в первичных опухолях толстой кишки человека

• Автор: Кашкин, Кирилл Никитич
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 152 с. : ил

1.1.НЕСТАБИЛЬНОСТЬ ГЕНОМА ПРИ РАКЕ ТОЛСТОЙ КИШКИ ЧЕЛОВЕКА.

. I. 1. Нестабильность на уровне нуклеотидов.

I. 1.2. Нестабильность хромосом.

II.3. Нарушения других систем , теломераза, метилирование.

1.2.Делеции 1 р и 1 7р прогностически значимые нарушения генома при раке толстой

КИШКИ ЧЕЛОВЕКА

1.2.1. Генетические нарушения при раке толстой кишки

1.2.2.Нарушения короткого плеча 1 хромосомы.

1.2.3.Нарушения р и их прогностическое значение.

1.2.4. Высоковариабельные повторы удобные маркеры для изучения генетических повреждений в опухолях.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

.1.Растворы
.2.Образцы тканей.
.3.Подготовка образцов тканей и гистологический анализ
II. 4. Выделение ДНК из тканей
II. 5. Выделение ДНК из срезов
Н.б.Выделение плазмиднойДНК.
.7. ДНК блотгибридизация.
.8. Электрофорез нуклеиновых кислот, фотографирование и анализ электрофореграмм.
II. 9.Полимеразная цепная реакция.
II. . Анализ локуса с помощью ПЦР.
II. II. Анализ аллельных утрат генир методом ПЦРПДРФ.
II. Аналз локуса VАМус. I методом НЦРблопитшга
II. . Очистка из легкоплавкой агарозы и рестрикционный анализ проОуктов ПЦР 6
II. . Статистический анализ.
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
П.1 .Клиникоморфологические признаки и кариотип опухолей
III. 1.1 .Характеристика выборки опухолей распределение и группировка
III. 1.2. Особенности кариотипа опухолей
1.2.Анализ хромосомы 1 и локуса VI.
III. 2. . Цитогенетические особенности опухолей с делециями 1р. Сочетание делеций 1р с другими особенностями кариотипа.
III. 2.2.Деясции i и клиникоморфологические свойства опухолей
II. 2. Нарушения локуса V и клиникоморфологические свойства опухолей
Ш.З. Анализ хромосомы и локуса
I.3.1 .Нарушения хромосомы , выявленные при цитогенетическом исследовании
Ш.3.2.Делеции короткого плеча хромосомы и клиникоморфологические признаки
опухолей
3.3. Анализ локуса и гена р.
2Ательиые утраты локусов , К4СТ.1 и генар.
II 1.4. Аллельные утраты и VI статистический анализ по двум ЛОКУСАМ
ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
IV. I.Клиникоморфологические особенности опухолей
IV. 2. Нарушения 1р и локуса V
IV. 3. Нарушения р и локуса .
IV 4.Продолжительность жизни пациентов анализ по двум прогностически важным
маркерам.
IV. 5. Информативность ПЦР и цитогенетического метода.
ВЫВОДЫ
Благодарности.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Поэтому7 в обзоре литературы рассмотрены нарушения механизмов, отвечающих за стабильность генома на разных уровнях его организации, и прогностическое значение этих нарушений при РТК. Сохранение неизменной структуры генома в нормальных клетках зависит, с одной стороны, от репликативного аппарата, белков репарации, рекомбинации ДНК и систем, обеспечивающих правильность расхождения хромосом при делении клеток, а с другой стороны, от
систем контроля, т. В настоящее время выделяют, по меньшей мере, 4 сверочиыс точки см. ДНК перед репликацией 2в Эфазе контроль правильности репликации ДНК 3в фазе контроль полноты репликации ДНК 4сверочпая точка веретена деления задержка в метафазе до тех пор, пока все кинетохоры не будут прикреплены к микротрубочкам. Невозможность прохождения одной из сверочных точек служит сигналом к апоптозу, то есть программированной гибели клеток. Каждая из этих сверочных точек, кроме собственного назначения, является также фильтром1 для клеток, по какойлибо причине не остановившихся на предыдущих этапах. При нарушении функциональности сверочных точек клетки с различными повреждениями генома приобретают способность делиться и передавать эти повреждения дочерним клеткам. Белки, участвующие в работе сверочных точек, условно разделяют на сенсоры повреждений ДНК, трансмиттеры сигналов о повреждениях и эффекторы, запускающие апоптоз. Молекулярные системы, которые обеспечивают целостность генетического материала, часто являются сенсорами повреждений ДНК или хромосом. Рассмотрим повреждения этих систем и, как следствие этого, нестабильность генома в клетках опухоли при раке толстой кишки человека.