Сравнительная характеристика бактерицидных систем нейтрофилов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях

• Автор: Охотина, Софья Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 164 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. Обзор литературы

1.1. Современные представления о бактерицидных системах нейтрофилов

1.1.1. Кислородзависимая система

1.1.2. Кислороднезависимая система

1.1.3. Нитроксидсинтаза и реактивные нитрогенные радикалы при бактери альных инфекциях

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1. Материал

2.1.1. Инфекционные агенты

2.1.2. Экспериментальные животные
2.2. Методы
2.2.1. Методы выделения фагоцитирующих клеток и их культивирования
2.2.2. Методы оценки функциональной активности нейтрофилов
А Спектрофотометрические
Б Гистохимические и иммуноцитохимичекие
2.2.3. Методы статистической обработки данных ГЛАВА 3. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой бак терицидных систем нейтрофилов при заражении . i и . в системе i vi
3.1. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой систем нейтрофилов человека при заражении . i и .
3.2. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой систем нейтрофилов воспалительного экссудата мышей при заражении .
i и .
3.3. Сравнительная характеристика бактерицидных систем нейтрофилов воспалительного экссудата мышей и крови доноров при заражении клеток
. i и .
3.4. Сравнительная характеристика кислородзависимой и кислороднезави симой систем лейкоцитов крови и перитонеального экссудата интактных морских свинок при заражении . i и . ГЛАВА 4. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой бактерицидных систем лейкоцитов животных, зараженных У. i и .
ГЛАВА 5. Нитроксидсинтаза и реактивные нитрогенные радикалы в пей трофилах при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях
5.1. Нитроксидобразующая активность нейтрофилов при псевдотуберку лезной и листериозной инфекциях в системе i vi
5.2. Нитроксидобразующая активность лейкоцитов животных, зараженных 8 . i и .
ГЛАВА 6. Взаимосвязь нитроксидобразующей, кислородзависимой и кисло 3 роднезависимой бактерицидных системам нейтрофилов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРА ТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АМК активные метаболиты кислорода
ГМФШ гсксозомонофосфатный шунт
КБ катионные белки
лдг лактатдегидрогеназа
Мф макрофаг
мпо миелопероксидаза
НАДН никотинамидадениндинуклеотид восстановленный
НАДФ никотинамидадениндинуклеотидфосфат
НАДФН никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный
нет нитросиний тетразолий
Нф нейтрофил
пмял полиморфноядерный лейкоцит
едг сукцинатдегидрогеназа
ФП фагоцитарный показатель
ФЧ фагоцитарное число
цАМФ циклический аденозинмонофосфат
цхо цитохромоксидаза
еЫОБ эндотелиальная нитроксидсинтаза
БАО флавиновый динуклеотид
БМЫ флавиновый мононуклеотид
НЬ гемоглобин
ОН гидроксильный радикал
НО пероксидный радикал
О X пероксидный ион
н2 перекись водорода
Жу интерферон гамма
Шв индуцибельная нитроксидсинтаза
пЫОв нейрональная нитроксидсинтаза
0 оксид азота
0 нитроксильный анион
0 нитросониевый катион
нитрит
го О 2 нитрат
молекулярный кислород
супероксидный анионрадикал
о2 синглетный кислород
реактивные промежуточные продукты окисления кислорода
ЯОБ реактивные кислородные радикалы
ИЮ реактивные промежуточные продукты окисления оксида азота
ЮТа фактор некроза опухолиальфа
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


К примеру, протеиназа 3 сериновая протеаза, найденная в азурофильных гранулах, локализуется также в мембранных секреторных везикулах наиболее подвижных компартментах нейтрофилов . Ключевым событием в микробицидном действии нейтрофилов является дегрануляция везикул в фаголизосоме или во внеклеточном пространстве. Доставка белков в различные компартменты клетки, выделение их в межклеточную жидкость, межклеточный белковый транспорт представляют критические механизмы деятельности нейтрофилов 2. Явление резкого усиления синтеза РНК установлено также в нейтрофилах, поглотивших не микробы, а клеточный детрит , 2. Известен феномен резорбтивной клеточной резистентности резкой активации антимикробной функции макрофагов, поглотивших катионные белки, секретированные нейтрофилами 6. Нсйтрофилы периферической крови здоровых людей представлены клетками в диаметре 9 мкм с характерным сегментированным ядром. В ядре обнаруживается большое количество гетерохроматина, который плотно примыкает к ядерной мембране и прерывается только в области ядерных пор. Ядрышки встречаются редко или отсутствуют, что указывает на подавление или прекращение синтеза белка. Как правило, нейтрофил имеет округлую или несколько вытянутую форму, а цитоплазматическая мембрана образует небольшое количество выростов и микроворсинок. Умеренноплотный цитоплазматический матрикс содержит свободные рибосомы и полисомы. Гранулярный эндоплазматический ретикулум представлен единичными короткими канальцами, на поверхности которых имеется незначительное количество рибосом. Митохондрии небольшие, округлой или овальной формы, преимущественно с непрозрачным матриксом, присутствуют в нейтрофилах в ограниченном количестве. Комплекс Гольджи развит слабо и образует небольшую сферу в центре клетки, часто располагаясь между сегментами ядра. В области комплекса Гольджи обнаруживается центриоль с отходящими от нее микротрубочками. В цитоплазме нейтрофилов в большом количестве выявляется гликоген в виде отдельных частиц или розеток, и в небольшом количестве фагоцитарные вакуоли и пиноцитозные пузырьки . В конце х гг. В. Е. Пигаревским была предложена следующая классификация бактерицидных системы нейтрофильных гранулоцитов 1 миелопероксидазная система 2 лизоцим 3 лактоферрин 4 неферментные катионные белки . Н2 миелопероксидазную систему 3 образующую систему, включающую реактивные посредники азота, производные 0синтазы 4 систему белков нейтрофильных гранул антимикробные белки, протеазы, серинпротеиназы, метаплопротеиназы. Активация фагоцитов сопровождается существенными морфологическими, биохимическими и биофизическими перестройками клеток. Так, антимикробная эффективность нейтрофилов человека зависит от параллельных событий, происходящих в молодых фаголизосомах стимулированных клеток в цитоплазматических гранулах при сборке и активации НАДФНзависимой оксидазы происходит генерация разновидностей кислородных радикалов и производство ферментов и антимикробных белков. Антимикробные ответы включаются многочисленными агонистами промоторами адгезии или мишенями фагоцитов. Специфичные механизмы нейтрофила запускают защитные механизмы против патогенов в воспалительном процессе . Известно, что для нейтрофилов характерны два хорошо различаемых состояния исходное, с низким уровнем протекания процессов, и активированное, переход в которое обусловлен взаимодействием клеток с различными стимуляторами . Наиболее яркий результат взаимодействия этих клеток со стимуляторами, в том числе и с бактериями это усиление метаболизма, миграции, адгезии, дегрануляции ив конечном счете, резкое увеличение потребления клетками глюкозы, кислорода, повышение активности ферментов, образование активных форм кислорода АФК и других прооксидантов, продуктов активации липо и циклооксигеназ. Это явление, применительно к фагоцитам, получило название прайминга ii 8, т. Нейтрофилы, достигнув места воспаления, способны распознать патоген либо непосредственно через мембранные рецепторы для опсонинов факторы комплемента СЗЬ и i3 и компонент иммуноглобулинов, либо через лектины микробов и фагоцитов опсониннезависимый фагоцитоз 8.