ЭФР - зависимая передача сигнала при участии фосфолипазы С γ1 и транскрипционного фактора SP1

• Автор: Чупрета, Сергей Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 127 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ.
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Структура рецептора ЭФР
2.2. Активация и рецептор-опосредованный эндоцитоз ЭФР, роль
ИНТЕРНАЛИЗОВАННОГО ЭФР-Р В ЗАПУСКЕ И ПРОВЕДЕНИИ МИТОЕЕННОГО
СИГНАЛА

2.3. ОСНОВНЫЕ ПУТИ ПЕРЕДАЧИ СИГНАЛА С РЕЦЕПТОРА ЭФР
2.4. ФОСФОЛИПАЗА Су 1, ЕЕ СТРУКТУРА И СВОЙСТВА
2.5. РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ ФЛСуІ
2.6. РОЛЬФЛСуІ ВО ВНУТРИКЛЕТОЧНОЙ РЕГУЛЯЦИИ
2.7. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ФЛСу 1 С ЭЛЕМЕНТАМИ ЦИТОСКЕЛЕТА
2.8. ТРАНСКРИПЦИОННЫЙ ФАКТОР ИРІ, ЕГО СТРУКТУРА И СВОЙСТВА.
2.9. Регуляция активности транскрипционного фактора брі
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Клеточные линии и их культивирование
3.2. Иммунофлуоресцентный АНАЛИЗ
3.3. Иммунопреципитация, электрофорез и иммуноблотинг
3.4. Субклеточное фракционирование
3.5. ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ белков
3.6. Анионообменная хроматография
3.7. In vitro киназная реакция
3.8. Мечение клеток радиоактивным ортофосфатом и иммунопреципитация
3.9. Киназная реакция в геле
3.10. Метод сдвига электрофоретической подвижности
3.11. ФОСФОАМИНОКИСЛОТНЫЙ АНАЛИЗ
3.12. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ВКЛЮЧЕНИЯ РАДИОАКТИВНОГО ОРТОФОСФАТА
4. РЕЗУЛЬТАТЫ
4.1. Ассоциация ФЛСу1 с мембранным и интерн авизованным РЕЦЕПТОРОМ ЭФР В КЛЕТКАХ А
4.2. Связь ФЛСу 1 с элементами цитоскелета в клетках А431.
4.3. ЭФР-ЗАВИСИМОЕ ДНК-СВЯЗЫВАНИЕТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА SP
4.4. Динамика ЭФР-зависимого фосфорилировабия ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА SPl
4.5. РОЛЬ RAS-ERK ПУТИ ПЕРЕДАЧИ СИГНАЛА В АКТИВАЦИИ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА SPl

4.6. Роль Erk 1,2 в ЭФР-опосредованной активации ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА SP
4.7. Определение молекулярной массы spI киназы
5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
6. ВЫВОДЫ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

белка. При этом делеция SH3 домена никак не влияла на актин-связывающую способность ФЛСу1 (Pei et al., 1996). Эти данные позволяют предположить наличие сложного механизма связывания ФЛСу1 с актином, в котором помимо SII2 и SH3 доменов принимают участие какие-то неидентифицированные факторы. Практически ничего неизвестно и о роли, которую играет взаимодействие ФЛСу1 с актином в рефляции внутриклеточных процессов.
2.8. Транскрипционный фактор Spl, его структура и свойства.
В настоящий момент суперсемейство Sp-подобных транскрипционных факторов только у высших позвоночных объединяет более 16 различных белков (Philipsen, Suske, 1999). При этом собственно семейство Spl, включающее в себя белки, имеющие наиболее сходное строение и эволюционное происхождение, состоит из 4 членов: Spl-Sp4. Все эти транскрипционные факторы, характеризуясь в первую очередь сходным строением ДНК-связывающего участка, имеют строгую ядерную локализацию и участвуют в регуляции активности генов, имеющих в своем составе GC-богатые промоторы.
Транскрипционный фактор Spl был изначально идентифицирован в качестве транскрипционного фактора, способного активировать ранний промотор гена SV40. Было показано, что Spl специфически