Выживание и гибель кардиомиоцитов при генетически обусловленной миодистрофии мышей mdx

• Автор: Веженкова, Ирина Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 120 с. : ил.

Введение

Обзор литературы

1. Общая характеристика тканевой и ультраструктурной организации миокарда в норме

1.1. Морфологические особенности строения миокарда млекопитающих

1.2. Кардиомиоциты взрослых млекопитающих.

1.2.1. Желудочковые кардиомиоциты.

1.2.2. Предсердные кардиомиоциты

2. Основные черты кардиомиогенеза

2.1. Дифференцировка кардиомиоцитов.

2.2. Пролиферация и регенерация кардиомиоцитов ,,

2.3. Программируемая гибель кардиомиоцитов

2.3.1. Представления о механизмах регуляции апоптоза
2.3.2.Морфологичсские проявления апоптоза.
2.3.3. Механизм апоптоза
2.3.4. Регуляция апоптоза.
2.4.Роль р в выживании клеток при повреждении ДНК.
2.4.1.Рольр в процессах канцерогенеза.
2.4.2. р ирбЗ членыр семьи
2.4.3. Участиер в процессе репарации ДНК
Повреждение ДНК
Фосфорилирование р.
3. Сердечная недостаточность.
3.1. Миодистрофия Дюшенна.
3.1.1. Строение молекулы дистрофииа.
Материал и методы
1. Материал
2. Методы
2.1. Приготовление гистологических препаратов.
2.1.1. Приготовление парафиновых срезов.
2.1.1. Приготовление криосрезов.
2.2. Окраска гистологических препаратов гематоксилином эозином.
2.3. Метод нероксидазы антипероксидазы ПАП. Полак и др.,
2.4. Метод авторадиографии Жинкин,
2.5. Метод морфометрии.
Для измерения площадей исследуемых срезов и для статистического анализа были использованы программы I и i x.3. Результаты и
обсуждение.
3. Результаты и обсуждение.
3.1. Выживание и апоптоз кардиомиоцитов мышей x
3.1.1. Регистрация двунитевых разрывов ДНК в кардиомиоцитах мышей x
3.1.1.1. Некоторые особенности строения и функционирования гистонов семейства Н2А, в частности гистона Н2АХ , i .,
3.1.1.2. Роль в процессе репарации кардиомиоцитов мышей x
Сокращения, используемые в рукописи
ДрДнк двунитевые разрывы ДНК
МДД миодисгрофия Дюшена
фосфатносолевой буфер
нуклеотидэксцизионная репарация
Кмц кардиомиоциты
Нмк немынтечныс клетки
Введение


Таким образом, одной из проблем биологии кардиомиоцитов является их выживание при неблагоприятных ситуациях, возникающих в случаи патологии в миокарде. Так как факт существования камбиальных клеток миокарда пока остается недоказанным, будем придерживаться мнения, что кардиомиоциты млекопитающих некамбиальная популяция. Одним из подходов к анализу выживаемости кардиомиоцитов может быть использование животных с генетическим дефектом мышей тбх. Отсутствие в сократительных клетках мышей тбх синтеза дистрофина сопровождается развитием в них окислительного стресса, вызывающего гибель клеток. Таким образом, сократительные клетки мышей шбх являются моделью выживания клеточных популяций в условиях окислительного стресса. Исходя из этого, целью настоящей работы являлось изучение цитохимических особенностей кардиомиоцитов при генетически обусловленной кардиомиодисгрофии на модели мышей тбх. Изучение включения 3Нтимидина в кардиомиоциты мышей шбх и сВ1 до и после стресса. Регистрация двунитевых разрывов ДНК в кардиомиоцитах мышей шбх до и после динамического стресса. Морфометрический подсчет изменений абсолютного количества кардиомиоцитов мышей шбх и СВ до и после стресса с целью вычисления клеточной потери кардиомиоцитов мышей тбх и СВ, вызываемой динамическим стрессом. Анализ динамики экспрессии гена р до и после динамического стресса. Работа выполнена в группе генетики клеточных популяций Института цитологии РАН. Обзор литературы. Общая характеристика тканевой и ультраструктурной организации миокарда в норме. Морфологические особенности строения миокарда млекопитающих. Открытие клеточного, а не синцитиального, как считалось ранее, строения мышцы сердца явилось одним из крупнейших достижений ранних электронномикроскопических исследований. Дальнейший анализ ультраструктуры миокарда самых различных позвоночных и беспозвоночных животных показал, что сердечная мышца состоит из тесно контактирующих друг с другом клеток кардиомиоцигов, которые, соединяясь конец в конец, образуют мышечные волокна Румянцев, Непомнящих, Колесникова, Непомнящих, . При светооптическом исследовании в продольно срезанных мышечных волокнах, как правило, хорошо различается регулярная поперечнополосатая исчерченность, которая отражает наличие в сердечных миоцитах многочисленных миофибрилл, формирующих чередование темных и светлых участков цитоплазмы. Мышечные волокна отделяются друг от друга нежными прослойками соединительной ткани называемой по аналогии со скелетными мышцами эндомизием, в которых располагаются многочисленные кровеносные капилляры. Группы мышечных волокон, располагающихся параллельно друг другу, формируют пучки, которые окружены более толстыми прослойками соединительной ткани, содержащими кровеносные сосуды. Кардиомиоциты, находящиеся в соседних мышечных волокнах, часто формируют анастомозы, благодаря чему образуется своеобразная мышечная сеть. В структурнофункциональном отношении мышечная ткань сердца представляет собой синцитий, структурную основу которого составляют упорядоченные в мышечные волокна кардиомиоцигы, между которыми имеются щелевые соединения или нексусы, обладающие низким сопротивлением, что способствует быстрому распространению электрических импульсов. В отличие от мышечных волокон скелетной мышцы, каждое из которых иннервируется отдельным двигательным аксоном или одной из его ветвей, сокращения сети сердечных миоцитов регулируется группой особых клеток пейсмеккеров, Рклеток, которые располагаются в синусном и атриовентрикулярном узлах и иннервируется волокнами вегетативной нервной
системы. Генерируемые этими клетками электрические импульсы распространяются как по специализированным клеткам проводящей системы сердца, так и по мышечным волокнам предсердий и желудочков, в результате чего происходит сокращение вначале предсердий, а затем желудочков Непомнящих, Колесникова, Непомнящих, . Основной объем мышечной ткани сердца, как уже упоминалось, занимают кардиомиоциты. Классификацию кардиомиоцитов проводят обычно или по их локализации в сердце желудочковые или предсердные, или в соответствии с их основной функцией рабочие сократительные, или проводящей системы Румянцев, , .