Регуляция апоптоза и пролиферации клеток эпидермоидной карциномы А431 при действии эпидермального фактора роста

• Автор: Грудинкин, Павел Сергеевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 138 с. : ил.

Для большинства рецепторов но не для рецептора трансавтофосфорилирование остатка тирозина в тирозинкиназном домене приводит к усилению тирозинкиназиой активности i, , i, . Фосфорилирование остатков тирозина в Сконцевом домене рецептора инициирует связывание с рецептором белков, содержащих 2 или РТВдомены. Оба типа доменов эффективно узнают пептидные последовательности, в составе которых обязательно должен присутствовать фосфорилированный остаток тирозина. Специфичность связывания определяется последовательностью нескольких аминокислот, непосредственно примыкающих к фосфотирозину для 8Н2доменов это, в первую очередь, 4 аминокислоты, прилегающие к фосфотирозину в Сконце , . Дальнейшая активация сигнальных молекул после связывания их 2 или РТВдоменов с фосфотирозинсодержащей последовательностью в составе рецептора может осуществляться по одному или нескольким из трех механизмов 1 Само по себе связывание БН2домена сигнальной молекулыфермента изменяет его внутреннюю активность. Сигнальная молекула фосфорилируется рецептором по остатку тирозину, и это приводит к ее активации. В результате связывания с рецептором сигнальная молекула сближается с плазматической мембраной и за счет этого получает возможность взаимодействовать с примембранными белками или мембранными липидами i, . В некоторых случаях для предоставления домену сигнальной молекулы подходящей фосфотирозинсодержащей последовательности с рецептором связывается дополнительный белок, называемый адаптерным белком. Он фосфорилируется по тирозину, и уже с ним связывается сигнальная молекула. В широком смысле слова адаптерные белки это белки, основной функцией которых является обеспечение взаимодействия других белков , . Фактор роста
Рис. Последовательность событий, инициируемых связыванием фактора роста с рецептором. Штриховкой обозначена активация белков или доменов. Примеры активации субстратов 1 активация фосфорилированием 2 активация за счет конформационных изменений при связывании 8Н2домена активация за счет сближения с плазматической мембраной активация с участием адапторного белка. Отдельного упоминания требуют многочисленные факты обнаружения рецепторов факторов роста в ядре клетки, которые уже не рассматриваются как курьез или артефакт, а являются всесторонне доказанным явлением. Рецепторы и поступают в ядро в комплексе с лигандом, причем рецептор способен связываться с последовательностями ДНК под названием . Тем не менее, механизм их поступления в ядро остается загадкой , . Для ПгЬВ4 открыт механизм лигандзависимого отщепления цитоплазматического домена системой из двух протеаз, подобно тому, как это происходит при передаче сигнала от . Образующийся фрагмент в комплексе с белками ТАВ2 и репрессирует транскрипцию ряда генов i . Эпидермальный фактор роста , другие факторы семейства и рецепторы семейства ЕгЬВ был впервые выделен Коэном из гомогената подчелюстных желез мыши , . Он обнаружил, что оказывает стимулирующее действие на эпидермальные ткани, вызывая преждевременное открывание глаз и прорезывание зубов у новорожденных мышей. Молекула состоит из аминокислотных остатков и имеет молекулярную массу 6 кДа поэтому часто используемая в исследованиях концентрация нМ соответствует нгмл. Одноцепочечный полипептид свернут в глобулярную структуру, стабилизированную тремя дисульфидными мостиками Мауо, . Достаточно высокая для секреторного белка гидрофобность позволяет обогащать содержащую фракцию методом обратнофазной хроматографии Никольский и др. Дальнейшие исследования привели к открытию гомологов , вместе образующих семейство подобных ростовых факторов и связывающихся с близкородственными рецепторами. К семейству принадлежит различных лигандов сам , , , амфирегулин, эпирегулин, Рцеллюлин и неурегулины рис. Все лиганды семейства синтезируются как трансмембранные предшественники, которые могут образовывать растворимую форму после протеолиза или, реже, функционировать в мембране как сигнальная молекула межклеточной адгезии. Рис. Рецепторы семейства ЕгЬВ по НоЬго е а. Показана возможность связывания лигандов и образования гомо или гетеродимеров рецепторами семейства ЕгЬВ рецептор ЕСРЕгЬВНЕЯ 1, ЕгЬВ2ЫеиНЕ2 2, ЕгЬВЗНЕЯЗ 3 и ЕгЬВ4НЕР4 4.