Получение культуры ткани и эпителиальных клеток мантии пресноводных моллюсков родов Unio и Anodonta, обитающих в реках Подмосковья

• Автор: Ковтун, Надежда Евгеньевна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 102 с.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

Введение

Г лава 1. Обзор литературы

1.1. Анатомия и физиология двустворчатых моллюсков

1.2. Минеральноорганическая система перламутрового слоя

раковины

1.2.1. Строение раковины

1.2.2. Представление о процессах биоминерализации в х годах

прошлого столетия

1.2.3. Комплекс протеинов как основа кристаллизации арагонита в

перламутровом слое. Новые представления о процессах биоминерализации
1.2.4. Карбоангидраза перламутрового слоя жемчужниц
1.2.5. Характеристика новых белков, входящих в состав минеральноорганической системы раковин моллюсков
1.3. Остеоиндуктивные свойства перламутра и его компонентов
1.4. Получение культуры ткани мантии моллюсков и
эпителиальных клеток. Ростовые среды
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Подготовка животных для получения тканевых эксплантатов
2.2. Культура ткани мантии и эпителиальных клеток мантии
моллюска
2.3. Приготовление модифицированной ростовой среды
2.4. Гистологическос и микроскопическое исследование ткани
мантии и эпителиальных клеток мантии моллюска
2.5. Обработка дна чашек Петри различными типами субстратов и
мембран
2.6. Рентгеноспектральный и рентгеноструктурный анализы
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Культивирование ткани мантии и эпителиальных клеток в
стандартных условиях. Гистологическое исследование ткани мантии моллюска
3.2. Культивирование ткани мантии в модифицированной
ростовой среде и на чашках Петри, обработанных различными субстратами.
3.2.1. Субстрат поли Ь лизин гидробромид
3.2.2. Использование в качестве субстрата белковых мембран на основе ЭПЖ
3.3. Рентгеноструктурный и рентгеноспектральный анализы
перламутра
Г лава 4. Обсуждение результатов
Выводы
Благодарности
Список литературы


Перламутр может применяться как ортопедический наполнитель, обладая остеоиндуктивным потенциалом, связанным с его структурными свойствами , . Таким образом, актуальным представляется изучение в рамках одной работы вопросов, связанных как с получением культуры ткани мантии, так и с проблемой образования полноценного перламутра i vi. Подобное исследование может не только углубить теоретическое представление о процессе формирования перламутра, но и будет способствовать получению модели, образующей перламутр в комплексе с функционально активными белковыми компонентами, обладающими остеоиндуктивными свойствами. Целью настоящей работы явилось получение культуры ткани и эпителиальных клеток мантии пресноводных моллюсков с сохранением их секреторной активности. Получить функционально активную культура ткани мантии и эпителиальных клеток пресноводных моллюсков родов i и . Оптимизировать качественный состав питательной среды для обеспечения успешного процесса кристаллизации перламутра и его основного структурного компонента арагонита. Индуцировать и форсировать процесс кристаллизации арагонита, в культуре ткани и эпителиальных клеток мантии. Изучить этапы процесса образования перламутра i vi. Изучить типы кристаллизации арагонита i vi. Рентгеноструктурным и рентгеноспектральным анализами подтвердить получение в культуре ткани мантии моллюска арагонита и перламутра, идентичного природному. Глава 1. Обзор литературы. Общее число двустворчатых моллюсков около ООО видов. Все они относятся к классу двустворчатых моллюсков ivvi и составляют один из классов типа . Подавляющее большинство двустворчатых моллюсков по способу питания фильтраторы. Ы.Анатомия и физиология двустворчатых моллюсков. Многочисленными представителями пресноводных двустворчатых моллюсков на территории России, являются перловицы i и беззубки рис. ii, и семейству Перловиц ii. Поскольку анатомическое строение родов и i почти идентично, рассмотрим строение моллюсков, на примере . Рис. Внешний вид раковин моллюсков родов i А и Б. Род беззубок относится к самому большому надотряду настоящих пластинчатожаберных шi. На заднем конце между приоткрытыми створками заметны два щелевидных отверстия, расположенных одно над другим. Это сифоны через нижний вода направляется в пространство между створками, через верхний удаляется наружу. Лигамент связка хорошо виден на спинной стороне раковины за счет пружинных свойств лигамента створки при расслаблении мускуловзамыкателей аддукторов автоматически приоткрываются. Лигамент состоит из волокнистого рогоподобного вещества конхиолина. Створки раковины соединены аддукторами, один из которых расположен в передней части животного, а другой в задней. Если аддукторы моллюска перерезаны, створки, растягиваемые лигаментом, сами приоткрываются, открывая пару тонких полупрозрачных листков, прикрывающих тело слева и справа, мантию рис. Эти листки соединены на спинной стороне, а их свободные утолщенные края прикрепляются посредством небольших мантийных мускулов к внутренней поверхности раковины вдоль краев створок. Правый и левый листки мантии, срастаясь местами, образуют в задней части два щелевидных отверстия сифона. На брюшной стороне между правым и левым листками мантии у беззубки выдается вперед большая клиновидной формы нога, которая очень подвижна, что обеспечивается согласованными сокращениями групп мышц, имеющих различную ориентацию косую, продольную, поперечную. В пространстве, заключенном между мантийными листками и телом, в мантийной полости располагаются жабры, ротовые лопасти, некоторые органы чувств и открываются отверстия задней кишки, почек и половых желез. Ротовое отверстие помещается в углублении позади переднего аддуктора. Жабры занимают заднюю часть мантийной полости. Каждая жаберная пластинка состоит из рядов отдельных нитей филаментов, а каждая нить соответственно образует нисходящее и восходящее колена.