Влияние растворимых факторов фотомодифицированной крови на репарацию ДНК и пролиферацию поврежденных радиацией лимфоцитов человека

• Автор: Зубанова, Ольга Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 141 с. : ил.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Виды оптического излучения и особенности его проникновения в кожу человека

1.2. Основные современные методы фототерапии.

1.2.1. Механизмы лечебного действия света

1.2.1.1. УФ излучение

1.2.1.1.1. УФ облучение кожи.

1.2.1.1.2. УФ облучение крови

1.2.1.2. Видимый и инфракрасный ИК свет

1.3. Участие ростовых факторов в репарации ДНК и апоптозс

1.4. Заключение

Глава 2. Материалы и методы исследований.
2.1. Образцы крови.
2.2. Приготовление культур лимфоцитов
2.3. Облучение добровольцев и процедура
2.4. Облучение крови i vi
2.5. Оценка митотической активности и уровня структурных нарушений хромосом
2.6. Авторадиографическое исследование репаративного синтеза ДНК.
2.7. Оценка количества апоптотических клеток.
2.8. Оценка количества клеток с проапоптотическими маркерами.
2.9. Статистическая оценка результатов.
Глава 3. Результаты исследований .
3.1. Влияние плазмы крови добровольцев, облученных полихроматическим УФ светом в терапевтической дозе, на неповрежденные и поврежденные радиацией аутологичные лимфоциты
3.1.1. ФГАиндуцированная пролиферация и структурное состояние хромосом
лимфоцитов периферической крови добровольцев, облученных полихроматическим
УФ светом в терапевтической дозе
3.1.2. ФГАиндуцированная пролиферация и структурное состояние хромосом
лимфоцитов, поврежденных УФС излучением.
3.1.3. ФГАиндуцированная пролиферация и структурное состояние хромосом лимфоцитов, поврежденных рентгеновским излучением
3.1.4. Влияние плазмы крови добровольцев группы на ФГАиндуцированную пролиферацию и структурное состояние хромосом аутологичных лимфоцитов, поврежденных рентгеновским излучением
3.1.5. Репаративный синтез ДНК в нестимулированных митогеном лимфоцитах, поврежденных УФС излучением.
3.1.6. Заключение.
3.2. Влияние плазмы крови добровольцев, облученных полихроматическим
видимыминфракрасным поляризованным ВИП светом в терапевтической дозе, на поврежденные радиацией аутологичные лимфоциты
3.2.1. ФГАиндуцированная пролиферация и структурное состояние хромосом лимфоцитов, поврежденных рентгеновским излучением.
3.2.2. Репаративный синтез ДНК в нестимулированных митогеном лимфоцитах, поврежденных УФС излучением.
3.2.3. Количество ФГАстимулированных апоптотических лимфоцитов.
3.2.4. Количество ФГАстимулированных лимфоцитов с проапоптотическими маркерами и .
3.2.5. Заключение.
3.3. Влияние плазмы крови, облученной монохроматичным видимым светом
лазера, на интактные и поврежденные радиацией аутологичные лимфоциты
3.3.1. ФГАиндуцированная пролиферация и структурное состояние хромосом лимфоцитов крови, облученной монохроматичным видимым светом лазера
3.3.2. ФГАиндуцированная пролиферация и структурное состояние хромосом лимфоцитов, поврежденных рентгеновским излучением.
3.3.3. Заключение.
3.4. Влияние ростовых факторов и на ФГАиндуцированную
пролиферацию и частоту структурных нарушений в поврежденных радиацией
лимфоцитах человека.
3.4.1. Заключение.
Глава 4. Обсуждение.6
Список литературы.7
Список сокращений
АФК активные формы кислорода
АУФСЖ аутотрансфузия ультрафиолетом облученной крови
ВИП свет видимыйинфракрасный поляризованный свет
ИК излучение инфракрасное излучение
МИ митотический индекс
МЭД минимальная эритемная доза
ПД пиримидиновый димер
УФИ ультрафиолетовое излучение
УФА длинноволновое ультрафиолетовое излучение
УФВ средневолновое ультрафиолетовое излучение
УФС коротковолновое ультрафиолетовое излучение
ФГА фитогсмагглютинин
ФДТ фотодинамическая терапия а2М альфа2 макроглобулин
xii i эксцизионная репарация оснований
синдромом Кокейна
ДНКзависимая протеинкиназа
каталитическая субъединица ДНКзависимой протеинкиназы
i эпидермальный фактор роста
i рецептор эпидермального фактора роста x i экстраклеточнорегулируемые киназы
i общегеномная репарация
фактор роста гспатоцитов
I i интерферон
I ii интерлейкин
i i
МАРК iiv i i активируемые митогеном протеинкиназы i xii i эксцизионная репарация нуклеотидов
оксид азота
iv фактор роста, выделяемый тромбоцитами I3 фосфатидилинозитол3киназа
РК i i протеинкиназа
i i протеинкиназа, связывающая двунитевую РНК
V V терапия с помощью псоралена и УФА излучения
i iv ii белок, передающий сигнал и активирующий транскрипцию
ii i репарация, связанная с транскрипцией
i трансформирующий фактор роста
i фактор некроза опухоли
i i i меченье концов ДНК с помощью терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы
терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза
V v i фактор роста эндотелия и сосудов
ХР x i пигментная ксеродерма.
ВВЕДЕНИЕ


Фотохимический процесс начинается с поглощения кожными покровами энергии излучения, что вызывает перегруппировку атомов и молекул клеток, переводя их в физически новое состояние, при котором изменяется запас энергии и способность к химическим реакциям Кати, . Фототерапия сегодня является результатом прогресса не только в физике, но и химии, молекулярной биологии, иммунологии и клинической медицине. Для лечения различных патологических состояний современная медицина широко использует различные методы фототерапии неинвазивные облучение поверхности тела, облучение проекции больного органа или рефлекторных зон и инвазивные эндоскопическое облучение больного органа, внутрисосудистая, внутриссрдсчная и экстракорпоральная фотомодификация крови пациента. При этом, наряду с традиционным применением УФИ и видимого нелазерного света, успешно используется когерентный монохроматический поляризованный видимый свет от лазерных источников, а в последние годы и некогерентный видимый поляризованный свет широкого спектрального диапазона. Методы терапии, использующие источники УФ света за исключением, V терапии, о которой речь пойдет ниже, вызывают настороженное отношение со стороны зарубежных врачей. Эго вполне понятно, учитывая опасную способность УФИ повреждать ДНК, белки и липиды, увеличивая тем самым риск возникновения мутаций, иммуносупрессии и раковой трансформации клеток. Однако, все не так однозначно, поскольку хорошо известна другая особенность УФ лучей они абсолютно необходимы для синтеза регулирующего усвоение кальция витамина Дз, активные метаболиты которого, в свою очередь, являются своеобразными противоопухолевыми препаратами , , . Добиться поддержания баланса между вредным и полезным действием света, как, впрочем, и смещения эффекта в ту или иную сторону, возможно, используя различные дозы излучения. Подбор доз, как правило, осуществляется эмпирическим путем, что, конечно, нельзя отнести к достоинствам фототерапевтических методов. В настоящее время в зарубежной медицине практикуются методы, использующие высокие дозы УФИ от 0 до Джм2, которые как известно, индуцируют антигенспсцифичсскую толерантность и направлены на подавление иммунных реакций, таких, например, как реакция несовместимости, возникающая при трансплантациях органов и тканей, или аллоиммунизация, развивающаяся при многократных трансфузиях суспензии тромбоцитов е1 а1. Апсйеи е1 а. Ооос1пс е а. Карандашов и др. В нашей стране, благодаря традиционному использованию УФИ в клинической практике, создано большое разнообразие аппаратов и подобран диапазон лечебных доз, позволяющих эффективно применять УФ свет и для лечения других патологических состояний. УФИ в небольших дозах МЭД минимальная эрнтемная доза, определяемая временем, за которое развивается покраснение используются в отечественной медицине для внешнего облучения пациентов как мощный фактор, влияющий на вегетативную нервную и эндокринную системы организма, на механизмы иммунной и неспецифической защиты, формирующиеся при участии ферментативных, обменных и окислительновосстановительных процессов. В результате стимулируются или нормализуются процессы самовосстановления функций важнейших физиологических систем организма Владимирова, . Метод внешнего УФ облучения доказал свою эффективность при лечении различных заболеваний кожных фурункулез, рожистое воспаление, раны кожных покровов, угри вульгарные, псориаз и др. Бслугин, Прошкина, Щеметило, Воробьев, Владимирова, Кушхабиев, . Профилактическое облучение используется в целях компенсации естественной УФнедостаточности при астениях у детей, анемиях, кроме того, для общего закаливании организма повышается устойчивость к инфекциям грипп и др. Карачевцева, Обросов, Ибрагимова, Карапетян, Кочарян, Царфис . Следует отметить, что для внешнего облучения пациентов применяется также и видимый синий свет. Этот метод используется для лечения гипербилирубинемии, развивающейся в некоторых случаях у новорожденных детей Карандашов и др. Облучение ребенка оказывается эффективным, поскольку билирубин, вызывающий данную патологию, является акцептором синего света.