Белок DAXX и механизмы его локализации в ядерных доменах ND10

• Автор: Сотников, Алексей Геннадьевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 88 с. : ил.

Оглавление
Введение б

1. Обзор литературы

1.1. Функциональная компартаментализация клеточного ядра

1.1.1. Ядрышко

1.1.2. Расположение хромосом и их участков в интерфазе

1.1.3. Локализация транскрипции и сплайсинга РНК

1.1.4. Организация, состав доменов и их клиническое значение

1.1.4.1. Заболевания, связанные с ядерными доменами

1.1.4.2. Белок

1.1.4.3. Белок 0

1.1. 4.4. Антиген 2 О
1.1. 4.5. Белок I6
1.1.4.6. Белок СВР
1.1.4.7. Белок XX
1.2. Модификация белков малыми убиквитинподобными белками

1.3. Получение моноклональных антител современное состояние проблемы
1.3.1. Гибридомная технология 2
1.3.2. Получение моноклональных антител с помощью фагового дисплея
1.3.3. Получение моноклональных антител в препаративных количествах
2. Материалы и Методы
2.1. Реактивы
2.2.Амплификация и клонирование
2.3. Получение слитных белков
2.4. Иммунизация мышей
2.5. Слияние спленоцитов
2.6. Скрининг клонов методом твердофазного иммуноферментного анализа I
2.7. Иммуноблотинг 4
2.8. Иммуноцитохимическое окрашивание
2.9. Трансфекция эукариотических клеток
2 Экспрессия в эукариотических клетках
2 Дрожжевая дигибридкая систем
3. Результаты и Обсуждение
3.1. Анализ данных группы Жалино о накоплении белка I6 в ядерных доменах
3.2. Проверка данных группы Эванса о накоплении гистонацетилазы СВР в ядерных доменах
3.3. Исследование взаимодействия белка XX с белками и 0 в дрожжевой дигибридной системе
3.4. Локализация белка XX в клетках с отсутствием экспрессии белка 0
3.5. Локализация белка XX в мышиных фибробластах дикого типа и мутантных по гену белка
3.6. Значение модификации малыми убиквитинподобными белкамимодификаторами белка для накопления белка XX
3.7. Получение и характеристика моноклональных антител к белку XX человека
3.7.1. Выделение слитного белка XX для иммунизации
3.7.2. Получение гибридомы, продуцирующей МКА к белку XX человека
3.7.3. Определение аминокислотной последовательности, узнаваемой полученными МКА
3.7.4. Получение препарата МКА для экспериментов по
иммунопреципитации
3.7.5. Характеристика антител в тесте иммунопреципитации
Выводы 7
Литература


малый убиквитинподобный белокмодификатор 0 основной антиген перзичного цирроза печени СВР ii i XX i i i iii i i Введение. i ,. В дальнейшем, было показано, что являются местами локализации целого ряда белков , , , , ii . ,0. Кроме того, было обнаружено, что служат местами первичной локализации, транскрипции и репликации некоторых ДНКвирусов вируса V, вирус простого герпеса, аденовируса V Iv ,, Iv , . Все эти вирусы за исключением V продуцируют белки, накопление которых либо модифицирует , либо ведет к деградации белков, ассоциированных с , . Деградация , в свою очередь, сопровождается гидролизом изопептидных связей между белкамимодификаторами и белками, ассоциированными с , а, в дальнейшем, и их деградацией по убиквитинпротеосомному пути v .