Динамика белков пострепликативной репарации ДНК Poln и hRad18 в клетках млекопитающих

• Автор: Никифоров, Андрей Анатольевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 108 с. : ил.

Пострепликативная репарация ДНК. ДНКполимераза к

2. Актуальность проблемы. Повреждения ДНК, возникающие в клетках эукариот под воздействием УФоблучения и ряда химических агентов, эффективно удаляются при помощи эксцизионной репарации ЭР i . Однако некоторые повреждения могут оставаться в ДНК к моменту вхождения клетки в фазу. Основные репликативные ДНКполимеразы не способны осуществлять синтез на поврежденной матрице, поэтому при прохождении репликативной вилки через дефектный участок происходит ее блокировка, что ведет к появлению однонитсвых пробелов в дочерней нити напротив поврежденного участка ДНК. Толерантность клетки к такого рода повреждениям, препятствующим завершению раунда репликации, обеспечивается пострепликативной репарацией ДНК ПРР, посредством прямого обхода поврежденных нуклеотидов в матричной нити ДНК или за счет генной конверсии, при которой в качестве матрицы временно используется неповрежденная дочерняя нить сестринского дуплекса ДНК , , . На протяжении последних лет был открыт ряд новых ДНКполимераз, способных осуществлять синтез с обходом повреждений в матричных нитях ДНК , , . ДНКполимераза ц Ро1г относится к группе этих полимераз и катализирует эффективное и точное встраивание остатков дАМФ напротив УФиндуцированных циклобутановых тиминовых димеров а. ДНКполимсраза высокой точностью не обладает . Мутации гена приводят к увеличению риска возникновения рака кожи у пациентов, относящихся к вариантной группе X i XV i . Клетки XV обладают нормальной ЭР, но имеют дефект ПРР, наблюдаемый после облучения УФсветом . Ро в процессе нормальной репликации. Обход повреждений с помощью Ро1г необходим только когда репликативные комплексы останавливаются на повреждениях, блокирующих синтез ДНК. Как было показано, через несколько часов после повреждения ДНК накапливается в фокусах репликации, содержащих заблокированные репликативные вилки . После блокировки репликативных комплексов повреждениями ДНК замещает основную ДНКлолимеразу и катализирует элонгацию вновь синтезируемой нити ДНК на поврежденном участке матрицы, однако механизм, посредством которого Ро1т накапливается в репликативных центрах и взаимодействует с белками репликативного комплекса, неизвестен. В дрожжах . Е2 . ЕЗ еще одного класса ферментов, участвующих в процессе данной постгрансляционной модификации белков , iv, . Предполагается, что белок 6 перемещается к местам заблокированных повреждениями репликативных вилок за счет его взаимодействия с белком i8 i, , . I iдомен АТФзависимая убиквитинлигаза ЕЗ, связывающаяся с однонитевой ДНК i . Было показано также, что при блоке репликации белковый комплекс при участии белков 2 Е2 и 5 ЕЗ убиквитинирует белок , фактор процессивности ДНКполимеразы 5. ПРР .