Морфологические изменения в парауретральной области при введении тканеинженерной конструкции на основе мультипотентных стромальных клеток жировой ткани

• Автор: Макаров, Андрей Витальевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 70 с. : 56 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы.

Цель и задачи исследования

Научная новизна.

Научнопрактическая значимость.

Положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные методы коррекции дефицита соединительных тканей

1.2. Методы тканевой инженерии.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Выделение культуры стромальиых клеток жировой ткани.
2.2. Трансфекция культуры клеток маркерным геном i
,
2.3. Девитализация культуры клеток
2.4. Постановка экспериментального исследования
2.5. Гистологические методы исследования.
2.6. Иммуиогистохимическое исследование
2.7. Морфометрическое исследование.
2.8. Статистические методы исследования.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Создание тканеинженерной конструкции
3.2. Результаты морфологического исследования
3.2.1. Интактная ткань.
3.2.2. Группа с введением тканеинженериой конструкции, содержащей
аутологичную культуру стромальных клеток жировой ткани АУ
3.2.3. Группа с введением тканеинженерной конструкции, содержащей
аллогсиную культуру стромальных клеток жировой ткани АЛ
3.2.4. Группа с введением тканеинженерной конструкции, содержащей
девитализированную культуру стромальных клеток жировой ткани Д.
3.2.5. Группа с введением матрикса тканеинжеиерной конструкции без
клеточной культуры М.
3.3. Иммуиогистохимическое исследование
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Выбор стромальной фракции жировой ткани в качестве клеточного компонента тканеинженерной конструкции был основан на соответствии культуры определенным параметрам. По данным литературы данная культура характеризуется высокой пролиферативной активностью и активным синтезом внеклеточного матрикса . ., . При этом ряд авторов утверждает, что мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, выделенные именно из жировой ткани, обладают более выраженной способностью образовывать коллаген, при сравнении с клеточными культурами из других источников . vv . V., . Однако, в современной литературе отсутствует описание морфологических изменений, которые развиваются при введении тканеинженерных конструкций на основе мультипотентных стромальных клеток фракции жировой ткани и желатиновой матрицыносителя в область собственно соединительной ткани. В свете приведенных положений, разрабатываемая проблема является актуальной, представляет не только теоретическое, но и практическое значение, что определяет актуальность данного экспериментального исследования. Целыо исследования является изучение морфологических изменений в парауретральной области при введении ткансинженерной конструкции на основе мультипотентных стромальных клеток жировой ткани и желатиновой матрицыносителя. Изучить морфологические изменения в парауретральной области при введении тканеинженерной конструкции на основе девитализированной клеточной культуры стромальных клеток жировой ткани и при введении только желатинового матрикса конструкции без клеточного компонента. Впервые дана сравнительная структурная характеристика реакции соединительной ткани на введение инъекционной формы тканеинженерной конструкции на основе клеточной культуры стромальных клеток жировой ткани. Парауретральное введение тканеинженерной конструкции, содержащей клеточную культуру стромальной фракции жировой ткани и желатиновую губку, в качестве носителя, сопровождается активным образованием соединительной ткани, что позволяет длительное время сохранять заданный объм. Сохранение массы образованной соединительной ткани конструкции обеспечивается функционированием трансплантированной культуры стромальных клеток жировой ткани. Трансплантация только носителя или носителя с девитализированной клеточной культурой дат временный эффект и не приводит к выраженному образованию соединительной ткани и коллагеновых волокон. Начальная стадия формирования соединительной ткани одинакова во всех группах и характеризуется преобладанием клеточного компонента в основных группах наблюдения. По мере удлинения срока эксперимента при использовании тканеинжеиерных конструкций, содержащих клеточные культуры, как аллогенные, так и аутологичные, отмечается увеличение объма соединительной ткани, по сравнению с его деградацией в контрольных группах. Иммуногистохимическое исследование выявило сохранение витальной метки i на всех сроках эксперимента, что свидетельствует о длительном выживании трансплантированных клеточных культур. Трансплантация тканеинженерной конструкции, содержащей аутологичную культуру стромальной фракции жировой ткани, вызывает наиболее быструю деградацию матрикса и образование максимального количества коллагеновых волокон даже на ранних сроках эксперимента и является максимально эффективной. Па основе изучения морфологических изменений соединительной ткани парауретральной области после введения тканеинженерной конструкции показано, что наиболее эффективным является введение трансплантата, содержащего аутологичную клеточную культуру, что приводит к выраженному образованию коллагеновых волокон. Полученные данные открывают перспективы для разработки методов коррекции дефектов собственно соединительной ткани при ряде патологических состояний. Разработана инъекционная форма тканеинженерной конструкции, содержащая желатиновую губку и обладающую высокой пролиферативной активностью клеточную культуру стромальных клеток жировой ткани. При парауретральном введении тканеинженерной конструкции происходит образование собственно соединительной ткани.