Влияние 13-цис-ретиновой кислоты на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов крыс

• Автор: Жучков, Сергей Александрович
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 87 с. : 33 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Строение интерфолликулярного эпидермиса

1.1.1. Кератиноциты

1.1.2. Меланоциты

1.1.3. Клетки Лангерганса

1.1.4. Клетки Меркеля

1.1.5. Клетки Гринстейна.

1.1.6. Лимфоциты.

1.1.7. Эпидермальная пролиферативная единица.

1.2. Ретиноиды, их метаболизм и влияние на морфогенез кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса
1.2.1. Фармакологические свойства ретиноидов.
1.2.2. Влияние ретиноидов на морфогенез кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы
2.1.1. Животные
2.1.2. Субстанция
2.2. Методы.
2.2.1. Морфологические и морфометрические методы исследований
2.2.2. Иммуноморфологические методы исследований.
2.2.3. Методы обработки цифровых изображений,
увеличение.
2.3. Статистическая обработка экспериментального материала
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Изучение состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса у интактных крыс
3.1.1. Гистологическое и морфометрическое исследование интерфолликулярного эпидермиса
3.1.2. Иммуногистологическое исследование пролиферативной активности кератиноцитов.
3.1.3. Иммунопатологическое исследование процессов дифференцировки кератиноцитов.
3.2. Изучение состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса при накожном нанесении растворов цРК
3.2.1. Гистологическое и морфометрическое исследование интерфолликулярного эпидермиса животных опытных групп.
3.2.2. Иммуноги стологическое исследование пролиферативной активности кератиноцитов при накожном нанесении
3.2.3. Иммуноги стологическое исследование процессов дифференцировки кератиноцитов при накожном нанесении
3.3. Изучение состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса после прекращения накожного нанесения растворов цРК.
3.3.1. Гистологическое и морфометрическое исследование интерфолликулярного эпидермиса у животных контрольных
и опытных групп
3.3.2. Иммуногистологическое исследование пролиферативной активности кератиноцитов после прекращения нанесения растворов цРК
3.3.3. Изучение процессов дифференцировки кератиноцитов после прекращения нанесения растворов цРК.
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ.
4.1. Циркадные ритмы в популяции кератиноцитов
интерфолликулярного эпидермиса крыссамцов Вистар.
4.2. Отдельные аспекты влияния и возможный механизм действия
цРК на интерфолликулярный эпидермис крыссамцов Вистар
4.3. Длительность полученных эффектов после окончания накожных аппликаций цРК.
4.4. Дозозависимость воздействия цРК на интерфолликулярный эпидермис крыс
4.5. Заключение.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В связи с этим, изучение морфогенетических процессов в эпидермисе в норме и при воздействии на кожу биологически активных форм витамина А представляется актуальным. Учитывая, что многослойный плоский ороговевающий эпителий кожи является полидифферонной тканью, ведущая роль в которой принадлежит дифферону кератиноцитов основному компоненту эпидермальной пролиферативной единицы, изучение гистогенстических процессов внутри этой клеточной популяции является целесообразным, так как может послужить более глубокому пониманию процессов, лежащих в основе регенерации эпидермиса, а также механизмов местного действия ретиноидов. Целью настоящего исследованияявилось изучение пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса у крыс при накожном нанесении растворов цисретиноевой кислоты. Изучить структурнофункциональные аспекты пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса у интактных крыссамцов. Изучить структурнофункциональные аспекты пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса при накожномнанесении цисретиноевой кислоты в виде растворов разных концентраций. Изучить структурнофункциональные аспекты пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса после прекращения нанесения растворов цисретиноевой кислоты. Основные положения диссертации, выносимые на. Клеточный цикл кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса интактных крыссамцов имеет суточные колебания. Днем в ч доля покоящихся клеток во период составляет 0,, делящихся ,0,, полиплоидизирующихся ,0,. В предутренние часы ч покоящихся кератиноцитов ,0,, делящихся ,0,, полиплоидизирующихся , 0,. Аппликации растворов цРК приводят к увеличению количества делящихся клеток на фоне снижения числа покоящихся С0 и полиплоидных клеток, что способствует накоплению в эпидермисе низкодифференцированных кератиноцитов. Наряду с кераголитическим действием цРК это обусловливает омоложение популяции кератиноцитов росткового слоя эпидермиса. Этот эффект сохраняется на протяжении 2 недель после отмены цРК его снижение было отмечено только через 5 недель. Впервые разработан способ оценки пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса с использованием моноклональных антител. Впервые с помощью иммуноморфологических методов охарактеризованы суточные ритмы в эпидермисе крыс с использованием объективных параметров индексов РСКА, Кл, индекса полиплоидизации. Впервые с помощью моноклональных антител проанализировано состояние популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса при местном воздействии цРК. Охарактеризована динамика структурных, морфометрических и иммуноморфологических показателей популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса в различные сроки после окончания накожных аппликаций цРК и установлено, что эффект от воздействия цРК является в значительной степени устойчивым, так как ряд характеризующих его параметров отличается от таковых у животных контрольных групп на протяжении 5 недель после окончания аппликаций. В результате проведенных исследований выявлены основные характеристики цитогенеза кератиноцитов. Вистар в норме, изученные с помощью иммуноморфологических методик с использованием моноклональных антител МКА к i, ii i ядерный антиген пролиферирующих клеток, цитокератину . Установлено, что клеточный цикл кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса крыссамцов имеет суточные колебания. Определено процентное соотношение покоящихся , делящихся и полиплоидных кератиноцитов в дневное и ночное время. Установлено что в предутренние часы ч в популяции кератиноцитов больше делящихся и покоящихся клеток и меньше клеток полиплоидных. Установлены структурные и иммуноморфологические проявления воздействия цРК на популяцию кератиноцитов. Ежедневные, в течение двух недель аппликации растворов цРК вызывают утолщение клеточного эпидермиса, увеличение доли делящихся клеток, снижение представительства клеток покоящихся и полиплоидных и накопление в эпидермисе низкодифференцированных клеток.