Методические особенности анализа микроядер в клетках человека и животных при скрининге и мониторинге кластогенных факторов в окружающей среде

• Автор: Юркин, Александр Юрьевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 184 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Обзор литературы

1.1. Исторические предпосылки в становлении микроядерного анализа

1.2. Методические и методологические особенности микроядерного анализа

1.3. Сравнительная оценка микроядерного теста с другими методами цитогенетического анализа

1.4. Использование микроядерного теста при оценке последствий загрязнения условий

окружающей среды

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Методические особенности исследования

2.2. Микроядерный тест

2.3. Математикостатистические особенности метода учета клеток с микроядрами

Результаты собственных наблюдений
3.1. Методические подходы к изучению микроядер эритроцитов периферической крови у интактных мышей
3.1.1. Результаты микроядерного анализа
эритроцитов крови, полученных из различных кроветворных органов и крови интактных белых беспородных мышей
3.1.2. Результаты микроядерного анализа
полихроматофильных эритроцитов в различных участках стандартного мазка периферической крови белых беспородных мышей
3.1.3. Результаты микроядерного анализа
нормохромных эритроцитов белых беспородных мышей в мазках периферической крови при использований различных видов фиксации
3.1.4. Результаты микроядерного анализа
нормохромных эритроцитов белых беспородных
мышей в мазках периферической крови при использовании различных видов окраски
3.1.5. Результаты микроядерного анализа
нормохромных эритроцитов белых беспородных мышей в мазках периферической крови мышей различных линий
3.1.6. Результаты микроядерного анализа
нормохромных эритроцитов белых беспородных мышей в мазках периферической крови интактных белых беспородных мышей обоего пола
3.1.7. Результаты микроядерного анализа
нормохромных эритроцитов белых беспородных мышей в мазках периферической крови интактных белых беспородных мышей различного возраста
3.1.8. Результаты микроядерного анализа
клеток различных органов и тканей интактных белых беспородных мышей
3.2. Изучение микроядер эритроцитов крови у различных видов животных и человека
3.3. Микроядерный анализ и уровень тяжелых металлов в тканях моллюсков ВлЬупХа зпГХаба, обитающих в бассейне р. Томи
3.4. Результаты микроядерного анализа
эритроцитов голубей, отловленных в различных городах Сибири, Центральной Азии и Казахстана
3.5. Результаты микроядерного анализа
эритроцитов голубей, отловленных на территории Томской области и в городе Томске
3.6. Результаты микроядерного анализа эритроцитов периферической крови у жителей различных населенных пунктов Томской области
ОБСУЖДЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Жолли имеют ядерное происхождение, а образование их связано с нарушением внутриклеточного хроматинолиза ядер. Жолли всегда окрашиваются в цвет хроматина и поэтому должны быть строго отдифференцированы от базофильной зернистости эритроцитов цит. Согласно описанию Юе1с1епге1сЬ , тельца Жолли представляют собой более крупные или более мелкие, круглые или угловатые тельца, находящиеся в эритроците в числе одного или двух и очень сильно окрашивающиеся всеми типичными для хроматина ядерными красками, например метилгрюном, который базофильной точечности никогда не окрашивает 4, 5,
Тельца Жолли, как писал А. А. Максимов , следует отличать от базофильной зернистости эритроцитов, поскольку они действительно . В то же время, основываясь на факте совместного существования этих телец и базофильной зернистости в одном и том же эритроците, МаедеИ , , сделали вывод об субстанциональной тождественности этих образований , 1. Хроматиновая природа телец Жолли признавалась большинством гематологов того времени , . Так, по мнению Юе1с1епге1сЬ , в процессе развития клеток эритроидного ряда нормобласты подвергаются фрагментации, при этом крупные фрагменты выталкиваются из клеток, а мелкие остаются в эритроцитах в виде телец Жолли 6. В одном из первых отечественных руководств по гематологии Е. Жолли являются тельца, так же отшнуровавшиеся от ядра, но при окраске азурными смесями окрашивающиеся в голубой цвет тельца Жолли при окраске азурэозиномвишневокрасные, азуррофильные. Мне кажется правильным назвать эти тельца парануклеиновыми от парануклеина ядра, также окрашивающего в голубой цвет. Паранукленновые тельца в мегалобластах имеются в большом количестве в крови эмбрионов человека от 1,5 до 2 мкм длиной, также местами и в мегалоцитах. При витальной окраске они резко окрашиваются в темносиний цвет, так что очень легко проследить весь процесс отшнуровывания их от поверхности ядра . Признавая ядерную природу эндоглобулярных телец, полагал, что превращение нормобластов в зрелые эритроциты происходит путем внутриклеточного растворения ядра. При переходе эритроцитов из костного мозга в кровоток сохраняющиеся в них остатки ядерной субстанции претерпевают превращения, связанные с более сильным по сравнению с костным мозгом газбобменом в кровяном русле. В результате базохроматин переходит в оксихроматин, имеющий высокое сродство к метилвиолету. Аргументируя тезис о ядерном происхождении телец Жолли, сторонники этой теории основывались на одновременном присутствии их в эритроцитах с кольцами кольца Кабо и с азурофильными зернами, а также отсутствии их в нормобластах с неповрежденными ядрами. По мнению этих авторов, тельце Жолли представляет собой фрагмент ядра, который рассасывается труднее, чем остальная масса ядерного вещества. Жолли. По их мнению, это капсульные тела, адсорбировавшие на себе хроматиновую субстанцию, растворенную в цитоплазме. В г. Эти зернышки были названы краевыми тельцами эритроцитов цит. I , указывает, что краевые тельца эритроцитов имеют диаметр около 0,5 мкм и отличаются от телец Жолли более сильным светопреломлением. По описанию ii, , , краевые тельца представляют собой очень маленькие не более 0, мкм одиночные или парные зернышки в эритроцитах, расположенные эксцентрично или у самой периферии клетки и окрашивающиеся в краснофиолетовый цвет при применении особых методов окраски. В периферической крови больных анемиями и у анемизированных животных краевые тельца, по наблюдениям ii , обнаруживаются почти в каждом эритроците цит. Гимза в течение часа, находил в большинстве эритроцитов человека, морских свинок и кошек единичные темнофиолетовые зернышки, лежащие эксцентрично и в ряде случаев окруженные светлой зоной. Особенно хорошо они выявлялись в полихроматофильных эритроцитах 6. Вопрос о происхождении краевых телец эритроцитов долгое
время оставался предметом дискуссий специалистов, занимавшихся изучением субклеточных структур клеток красной крови. Так, по мнению , они появляются в погибающих эритроцитах в результате постепенного разрушения их оболочки. Жолли.