Исследование роли конденсинов в формировании высших уровней организации хроматина и структурно-функциональной организации ядрышка

• Автор: Тимирбулатова, Эльмира Раисовна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 115 с. : ил

Оглавление
ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

КЛЕТОЧНАЯ КУЛЬТУРА

Синхронизация клеток культуры X2 мимчмчмммичмммм1х

анализ И1ИЧЧМММЧМ1МИМИНММИН1ЧМНИМММИИМИ

Гипотонические воздействия

ЦИТОСТАТИЧЕСКИЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ИМ4МЧММ1МЧМММ1МИМ1ЧтММИЧ1МИИММММ1ЧЧМММММММИ

ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ИЧИИМИИМИМЧИММИИМ1МИНМИЧЧМ

ВОЗДЕЙСТВИЕ АКТИНОМИЦИНОМ Д ..
ВОЗДЕЙСТВИЕ ДРБ
ПОЛУЧЕНИЕ НУКЛЕОИДОВ. ММ МИИЧМ1НММЖИИЧММИМтМММИММЧИИМИ11ЧМИЧЧНМЧИ ОБРАБОТКА НУКЛЕАЗАМИ
ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ
РЕЗУЛЬТАТЫ.
Уровень экспрессии белков ХСАРЕ и 7 остается постояннным на протяжении
КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА
Локализация боков ХСАРЕ и 7 в митотических хромосомах. .
Локализация белков ХСАРЕ и 7 в клетках, подвергнутых гипотоническому ШОКУ. ММ.
Локализация белков ХСАРЕ и 7 в митотических клетках в условиях блокады
митоза мммтн1мтммммммммнтм1мммммтммммммммммми9тмммммм1мм1мммммм1мммм
Локализация белков ХСАРЕ, 7 и мажорных белков ядрышка в интерфазных КЛЕТКАХ.
Влияние актиномицина Д и ДРБ на локализацию ХСАРЕ в ядрышках интерфазных
Иммунолокализация белков ХСАРЕ и коилина в интерфазных клетках Локализация ХСАРЕ в нуклеоидах и ядерном матриксе Локализация ХСАРЕ в хромосомном сюффолле
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Центральный домен представлен двумя длинными спирализованными доменами, которые разделены небольшим шарнирным участком, , . концевоЙ глобулярный домен состоит из 0 0 аминокислот и обладает способностью связывать АТФ А. СООНконцевой глобулярный участок x, В состоит из 0 0 аминокислот и обладает ДНК связывающей активностью. Этот участок является наиболее консервативным и способен принимать конформацию спиральпетляспираль ixix. i . Между глобулярными доменами располагаются два длинных а спиральных участка, каждый из 0 0 аминокислот. Между ними находится не спирализованный домен, включающий около 0 аминокислот. Молекулярная масса белков составляет около 0 0 кДа iv . С помощью электронномикроскопического анализа было показано, что спирализованные участки способны образовывать антипараллельные гомодимеры и гетеродимеры . Гидродинамические свойства димера согласуются с идеей о том, что центральный домен между спирализованными участками обладает гибкостью и является своебразным шарниром i . Антипараллельные конфигурации приводят к тому, что 3 и СООН концевые домены связываются друг с другом, образуя глобулярные структуры на каждом конце димера. В мотивы способны тесно взаимодействовать друг с другом . АТФ i . Концевые домены способны соединяться в такой конформации, когда молекула белка изогнута в шарнирной области наподобие сложенной удочки конформация . Структура, похожая на структуру белков трхдоменная полипептидная цепь с высококонсервативными участками, характерна для механохимических моторных белков типа кинезинов. В связи с этим была выдвинута гипотеза о функциональном сходстве кинезинов и белков , . Описаны три различных типа гетеродимеров, выделенных из клеток разных организмов 13, 24 и 56 гетеродимеры. Эти гетеродимеры ассоциируют с другими не белками, образуя мультимерные комплексы, которые выполняют разные функции в клетках различных организмов. Так, комплекс, в состав которого входит гетсродимср 13 необходим для когезии сестринских хроматид. Гетеродимер 24 участвует в компактизации митотических хромосом, а гетеродимер 56 в репарации ДНК i, . Участие белков в митотической конденсации хромосом. Каждая хромосома состоит из двух хроматид, несущих идентичный генетический материал. Именно эти два события обеспечивают равномерное распределение наследственного материала между дочерними клетками. Исследования композиции митотических хромосом выявили три мажорных класса белков. Первый класс включает основные структурные компоненты интерфазного хроматина, такие как нуклеосомные гистоны и гистон Н1. Второй класс включает белки, которые присутствуют и на митотических, и на интерфазных хромосомах, но обладают различной активностью на разных стадиях клеточного цикла. К таким белкам относится топоизомераза И. К третьему классу относятся белки iv, . В году были идентифицированы два белка, ХСАРС и ХСАРЕ ХСАР обозначает X i i i ii, . Оба эти белка являются белками и принадлежат подсемействам 4 и 2, соответственно i, . iv, i, . Конденсиновый комплекс с коэффициентом седиментации был впервые выделен из экстракта яиц X vi i . i . . ii . i . В состав этого комплекса входят две коровые субъединицы 2 или по другой классификации САРЕ, 4 САРС и три дополнительных белка 2, САР и САРН i . конденсиновый комплекс необходим для митотической конденсации хромосом. Также было показано, что белок X2 он же 7, необходим для этого процесса i vi i . Подсчитано, что конденсиновыс комплексы расположены с периодом 5 кб ДНК в хромосомах, собранных в экстракте яиц X vi и в нативных хромосомах i i i, .