Культивирование эфедры односемянной (Ephedra monosperma) в условиях in vitro и получение биологически активных веществ на ее основе

• Автор: Плынская, Жанна Александровна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Красноярск
• Количество страниц: 116 с. : ил.

Содержание
Введение

1 Аналитический обзор

1.1 Характеристика семейств эфедровые .

1.2 Культура клеток и тканей растений источник

биологически акгивных соединений.

1.3 Каллусная ткань в изолированной культуре.

1.4 Вторичный метаболизм в растениях i viv и i vi

1.4.1 Физикохимические факторы среды

1.4.2 Способы культивирования и их влияние на вторичный синтез

в культуре ткани.

2 Методическая часть
2.1 Объект исследования.
2.2 Исследование химического состава интактного растения .
2.3 Определение влажности
2.4 Определение суммарного содержания алкалоидов.
2.5 Количественное определение эфедрина
2.6 Определение флавоноидов
2.7 Определение сапонинов
2.8 Количественное определение витаминов
2.9 Определение содержания хлорофилла АиБ.
2. Разделение липидов на силикагеле
2. Спектрометрическое определение содержания белка.
2. Определение минеральных компонентов.
2. Определение легко и трудногидролизуемых полисахаридов
2. Определение содержания лигнина
2. Определение экстрактивных веществ.
2. Определение эфедрина в интактном растении и клеточной биомассе методом ГХМС.
2. Определение эфедрина в интактном растении и клеточной биомассе методом ИК спектров.
2. Определение содержания жирных кислот.
2. IЬлучение кагтусных тканей
2. Статистическая обработка результатов эксперимента
3 Экспериментальная часть
3.1 Химический состав .
3.2 Культивирование в условиях i vi.
3.2.1 Получение интактных стерильных растений и введение в культуру i vi.
3.2.2 Влияние регуляторов роста на каллусогенез
3.2.3 Влияние способа культивирования на рост каллусной ткани
4 Получение алкалоидов из каллусной ткани
Выводы.
Список используемых источников


Ее корневая система имеет несколько крупных скелетных корней, выполняющих опорную функцию, и множество более мелких корней, обеспечивающих снабжение растений водой и минеральным питанием. Особенностью эфедры является опадение большинства побегов и замена их на следующий год молодыми. Лишь немногие побеги одревесневают и продолжают вегетировать. Отрастание побегов имеет большое практическое значение их умеренная обрезка не вредит растению. Заросли эфедры почти всегда расположены на открытых солнечных участках, по склонам южной, западной и восточной экспозиции. Вблизи нижнего предела распространения заросли переходят на северные склоны и на днище ущелий. На верхней границе заросли эфедры выходят на гребни хребтов, т. Светлолюбием эфедры объясняется ее полное отсутствие под пологом леса и кустарников. Ее заросли располагаются в горностепном, лесном и субальпийском поясах максимум их приходится на границу между лесным и субальпийским поясом. Местами эфедра образует почти чистые заросли. Среди ее кустов встречаются многие другие кустарники и травянистые растения, но строгой приуроченности какихлибо видов к эфедровым зарослям не отмечено. Рациональная система использования зарослей эфедры должна предусматривать чередование эксплуатируемых участков. При правильной эксплуатации заросли эфедры полностью восстанавливаются после обрезки зеленых побегов в среднем через от 3 до 5 лет ,4. Различные виды эфедры распространены в умеренных и субтропических зонах всего земного шара. Растения, содержащие эфедрин, используются в медицине с глубокой древности. Так, за три тысячи лет до нашей эры vi морской хвощ употребляли при кашле и высокой температуре 6. Во всех частях растения содержатся алкалоиды эфедрин и псевдоэфедрин. Наибольшее количество алкалоидов находится в зеленых веточках до 3,5 , гораздо меньше в семенах до 0,6 , в одревесневших веточках до 0,8 и в мясистой части семени до 0, . Доля эфедрина в сумме алкалоидов составляет около 5. Структурная формула эфедрина представлена на рисунке 1. Впервые эфедрин был выделен в году из китайского вида ii . Псевдоэфедрин найден в году Мерком в европейской эфедре vi 5,7. Не все виды эфедры содержат алкалоиды. Они найдены в ii , . ii , ii , . . и др. Рисунок 1. Суммарное содержание алкалоидов тоже подвержено колебаниям и может меняться для одного и того же вида от 0,2 до 2,5 . Из всех видов эфедры, встречающихся на территории бывшего СССР, наибольшим содержанием 1эфедрина отличается забайкальская , а такие виды, как ii и ii , содержат больше псевдоэфедрина, чем 1эфедрина 7,8,9. Известно, что на основе эфедрина получают такие препараты как Эфедрина гидрохлорид и Дэфедрин, применяемых при бронхиальной астме, крапивнице, гипотонии, ринитах. Эфедрин антагонист наркотиков, снотворных и употребляется при отравлении ими . Эфедрина гидрохлорид также входит в состав комплексных препаратов Теофедрин, Эфатин, Солутан и др. Многие виды эфедры помимо алкалоидов, содержат также дубильные вещества, лейкоантоциаииды, флавоновые красители, ароматические кислоты и другие соединения. Препараты лейко дельфин и дин, выделенный из горной эфедры, приготовленный из него краситель дельфинидин при испытании на Рвитаминное действие проявили высокую активность, близкую к активности катехинов из листьев чая. Дубитель эфедротаннид высокотаннидный продукт, содержащий от до таннидов, можно использовать для дубления кожи в смеси с синтанами. Комплексное использование эфедры для получения алкалоидов, лейкоантоцианидов, антоцианидов и таннидов, несомненно, будет способствовать расширению сырьевой базы для изготовления фармацевтических препаратов, пищевых красителей и высококачественных дубителей, что неизбежно приведет к сокращению численности природной популяции ,.