Технология генотипирования культурных и дикорастущих форм Brassica на основе анализа полиморфизма микросателлитов

• Автор: Анискина, Юлия Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 144 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Литературный обзор.

1.1. Род i как объект исследования.

1.1.1. Систематика рода i.

1.1.2. Эволюция и геномные взаимосвязи видов i.

1.1.3. Селекция и регистрация культурных форм i

1.1.3.1. Селекция хозяйственноценных признаков.

1.1.3.2. Селекция культур i, устойчивых к болезням и неблагоприятным условиям среды.

1.1.3.3. Регистрация сортов.

1.2. Молекулярные маркеры в генотипировании растений рода i
1.2.1. Полиморфизм длин рестрикционных фрагментов марксры
1.2.2. Произвольно амплифицируемые ДНКмаркеры маркеры.
1.2.3. Анализ полиморфизма длин амплифицированных фрагментов маркеры.
1.2.4.1 олиморфизм простых повторяющихся последовательностей маркеры
1.2.5.1 олиморфизм межмикросателлитиых последовательностей Iмаркеры.
1.2.6. Полиморфизм селективно амплифицируемых микросателлитных локусов маркеры
1.2.7. Амплифицируемые маркеры с известной нуклеотидной
последовательностью и маркеры
ГЛАВА 2. Материалы и методы.
2.1. Материалы и реактивы.
2.2. Приборы и методы.
2.3. Общие методики.
2.3.1. Выращивание растений.
2.3.2. Выделение геномной растительной ДНК СТАВмстодом.
2.3.3. Выделение геномной растительной ДНК на силикагелевомсорбенте
2.3.4. Выделение плазмидной ДНК.
2.3.5.олимеразная цепная реакция
2.3.6. Электрофорез в агарозном геле
2.3.7. Электрофорез в полиакриламидном i еле
2.3.8. Визуализация ДНК в полиакриламидном геле с помощью нитрата серебра.
2.3.9. Анализ флуоресцентномеченных ПЦРфрагментов.
2.3 Ссквснированис ДНКматриц по Сэнгеру
2.3 При отопление маркера длины I
2.3 Проведение ферментативных реакций.
2.3 Клонирование амплифицированных фрагментов ДНК.
2.3 Трансформация и анализ клонов.
2.3 Анализ клонов с помощью ЦРамплификации.
2.3 Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей
м и кросатсл л ни i ых фрагментов
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение
3.1. Исследование генетического разнообразия растений рода i.
3.1.1. Выбор праймеров для анализа полиморфизма микросателлитных локусов.
3.1.2. Микросазеллитный анализ видов i и родственных представителей семейства i.
3.1.3. Оценка Iснетического полиморфизма видов и разновидностей i
3.2. Исследование интрофессии генетического материала геномов А, В и С
i в межвидовые и межродовые гибриды
3.3. Исследование природы полиморфизма микросателлитных локусов геномов А,
В и С i
3.4. Создание маркера для анализа интрофессии Вгенома i
3.5. Практическое применение метода микросателлитного анализа в селекции
3.5.1. Гснотипированис близкородственных сортов рапса В .
3.5.2. Исследование интро1рессии аллельных форм микросателлитных локусов листовых овощных сортов В гара в их гибриды.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Среди видов i наибольшую экономическую ценность имеют масличные культуры В масличный рапс, В гора син. В i сурепица, В горчица сарептская и В i горчица эфиопская, обеспечивающие значительную долю пищевою и промышленного растительного масла в мире. Овощные и кормовые культуры В брюква, В гора восточноажатские капусты, репа и турнепс и В кочанная, брюссельская и цветная капуста, брокколи, кольраби считаются ценным источником клетчатки, витамина С и минералов. Риды В. В i и В i горчица черная широко используются для коммерческого производства специй. Дикорастущие сородичи i отличаются рядом важных признаков, таких как цитоплазматическая и ядерная мужская стерильность, устойчивость к болезням и вреди Исследование юнетичсского потенциала культурных и дикорастущих видов i и родственных представителей семейства представляет большое значение для селекции. Систематика рода i. Систематика семейства i остается одной из наиболее спорных. Со времен Линнея она мноюкратно пересматривалась, однако многочисленные попытки не привели к созданию общепринятой системы. В настоящее время семейство i насчитывает около видов и 0 родов, i авизованных в триб i, , . Одной из наиболее значимых и многообразных является триба i включающая родов и приблизительно 0 видов vi, , . В пределах трибы па основе морфологических характеристик выделяют семь субтриб ii, ii, iii, i, vii, Vi, и ii. Род i наряду с родами i, ixi, , , ii, ii, ii, и относят к субтрибе ii. Классификацию субтрибы ii на родовом и видовом уровнях значительно усложняет неопределенный статус многих таксонов. выделил в субтрибе ii родов и видов, однако определил 9 родов и 0 видов. Такое расхождение обусловлено большим морфологическим разнообразием среди различных таксонов капустных. В последнее время в систематике капустных появилась тенденция сокращения некоторых дополнительных родов и придание ранга подвидов некоюрым видам , , . Существующие границы субтриб и родов, основанные на нескольких морфологических особенностях ПЛОДОВ и семян, считаются I ими систематиками в значительной степени искусственными и вызывают большие разногласия, поскольку довольно часто встречаегся явление межродовой гибридизации Ii, , . Чтобы решить эти таксономические проблемы были предприняты попытки морфологических, цитогенетических и биохимических исследований , , ii, , , . Однако данных, позволяющих четко разделять рода, получено не было. Благодаря большому разнообразию форм систематика рода i является наиболее сложной. Жуковский насчитывал более ста дикорастущих и культурных видов i Жуковский, . В результате всестороннего исследования систематики мировой флоры i . i и родственных представителей ii, поскольку в последние 0 лет систематики ссылались на одни и те же виды под разными названиями. В настоящее время в ранге вида i принято таксонов i . I . Табл. Большое количество таксонов нуждается в уточнении. Многие виды i отличаются большим внутривидовым разнообразием фенотипов и имеют сложную внутривидовую структуру Габл. Таксономическое положение многих растительных форм многократно пересматривалось. Гак, например, блаюдаря значительным морфологическим различиям растительные формы вида В гара и нередко выделяли в отдельные виды В i, В iii, В ii, В ii, В viii Артемьева и Фарбер, . Советский ботаник Лизгунова Т. В. различала самостоятельные виды капусты кочанная В i, савойская В. В i, кольраби В и цветная В i Жуковский, . В систематике подвидов и разновидностей i в настоящее время также встречаются некоторые разночтения, требующие дополнительного уточнения.