Поликлональные, моноклональные и антиидиотипические антитела к разным серотипам вируса болезни Марека

• Автор: Румянцева, Ирина Викторовна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Щелково
• Количество страниц: 125 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Вирус болезни Марека как представитель семейства герпес

вирусов, вызывающих опухолевые заболевания у птиц

1.1.1. Эволюция вируса болезни Марека

1.1.2. Персистенция вируса болезни Марека

1.1.3. Специфическая профилактика болезни Марека.

1.2. Поликлональные антитела, обеспечивающие резистентность

к болезни Марека

1.2.1. Пассивно приобретенная резистентность к БМ
1.2.2. Активно приобретенная резистентность к БМ
1.2.3. Антигены ВЬМ, участвующие в развитии иммунных реакций организма птицы.
1.2.4. Другие белковые комплексы.
1.3. Моноклональные антитела к антигенам ВБМ, обладающие
высокой специфичностью
1.3.1. Получение гибридом, синтезирующих МА Г
1.3.2. Применение МАТ для изучения структуры и функций антигенов ВБМ 1, 2 и 3 серотипов.
1.4. Антиидиотипические антитела, участвующие в иммунных
реакциях организма
1.4.1. Идиотипический каскад и внутренний образ антигена
1.4.2. Антиидиотипические антитела вакцинные препараты нового поколения.
1.5. Заключение.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Синтез иммунопероксидазного конъюгата.
3.1.1. Разработка упрощенного метода выделения, очистки и концентрирования из желтков яиц кур.
Гипериммунизация животных препаратом 10
Конъюгация бараньих антител к кур с пероксидазой
Изучение активности и специфичности антител класса в коллекционных сыворотках, реагирующих с разными серо
типами ВБМ
Поликлональные антиВБМ антитела, полученные в лабораторных условиях
Поликлональные антиВБМ антитела, полученные в условиях птицехозяйств
Моноклональные антитела, направленные к белкам ВПГ и
реагирующие с белками ВГИ и ВПК.
Динамика антител в сыворотках цыплят из птицехозяйств с
различной степенью благополучия по БМ.
Разработка способов получения неинфекционных препаратов ВГИ с различными антигенными свойствами.
Получение термоинактивированных антигенов из инфекционного препарата на основе ВГИ
Фракционирование антигенных препаратов ВГИ на колонке 1 Ълучение поликлональных антиидиотипических антител,
имитирующих внутренний образ антигенов ВГИ
Получение специфических сывороток, содержащих антитела первого порядка ИД АТ к инфекционному ВГИ
Получение антител первого порядка к термоинактивированным антигенам ВГИ.
Получение антиидиотипических антител на антитела к термоинактивированным антигенам ВГИ
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАИЙ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Что касается ВБМ, то исследования в этом направлении проводили в основном с антигеном МАТБА и онухолеассоциированными антигенами 7. В связи с вышеизложенным представляется своевременным и обоснованным создание и систематизация коллекции поликлональных и моноклональных антиВБМ сывороток, фракционирование и выделение иммуноактивных вирусных антигенов, получение антитсльиого образа антигенов ВБМ антиидиотинические антитела, определение динамики накопления антител у вакцинированной птицы. Марека, а также продемонстрировать возможность создания неинфекционных вакцин против болезни Марека. ВГИ. Разработан упрощенный метод получения чистого препарата 1С из желтка яиц кур и синтезирован иммунопероксидазный антивидовой конъюгат антиО кур приоритетная справка от г. Впервые проведены исследования с коллекционными сыворотками, полученными в годы от вакцинированных против БМ птиц в условиях лаборатории и птицехозяйств. Сыворотки подразделили на 6 групп, отличающихся по характеру взаимодействия в ИФА с антигенами ВГИ, ВБМ и КК. Установлено, что для детекции в ИФА гликопротеинов О ВГИ и В1 К пригодны МАТ 6, направленные к 0 ВПГ человека. Впервые проведено фракционирование термоденатурированных антигенов ВГИ, получены различающиеся по иммунобиологическим свойствам неинфекционные препараты ВГИ белки В и С. Получены идиотипические антитела антитела первого порядка к отдельным фракциям термоденатурированного ВГИ, способные нейтрализовать инфекционную активность вируса. Впервые получены и изучены в серологических реакциях АИД АТ, которые содержат внутренний образ ВГИ, способный заменить антиген в индукции иммунного ответа. Методика по выявлению антител к вакцинному вирусу герпеса индеек и вирусу болезни Марека в сыворотках крови кур иммуиоферментным анализом утверждена директором ВНИТИБП в г. Методика изготовления неинфекционных антигенов ВГИ, пригодных для получения специфических идиотипических антител утверждена директором ВИТИБП в г. Методика получения антиидиотипических антител, имитирующих внутренний образ антигенов цельновирионного вируса герпеса индеек утверждена директором В ИТИБП в г. Материалы работы и ее отдельные разделы доложены на Всероссийской научной конференции по ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии ВНИИВВиМ, посвященной летию академика И. А. Бакулова Покров, г. Всероссийской научнопрактической конференции, посвященной летию ВНИТИБП Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов Щелково, г. Международной конференции молодых ученых научные основы производства ветеринарных биологических препаратов, Щелково1. Болезнь Марека БМ паралич птиц, нейролимфоматоз птиц, энзоотический нейроэнцефаломиелит птиц описанная как полиневрит Марека , , является типичным лимфопролиферативным вирусным заболеванием птиц, преимущественно отряда куриных , , . Болезнь проявляется образованием лимфоидных опухолей острая форма, поражением периферической, центральной нервной системы и развитием параличей классическая форма , , , . Болезнь Марека характеризуется мононуклеарной инфильтрацией одного или нескольких из следующих органов и тканей периферические нервы, гонады, радужная оболочка глаза и хрусталик, различнЕле висцеральные органы печень, селезенка, почки, мышечная ткань и кожа , , , . Возбудитель вирус болезни Марека ВБМ онкогенный альфагерпесвирус первого серотипа относится к группе вирусов, вызывающих опухолевые заболевания птиц , , , , , . ВБМ является сложной структурой, состоящей из сердцевины, окруженной капсидом, тегумента и оболочки , 3 рис. Сердцевина зрелого вириона содержит двухцелочечную ДНК в форме тороида. Капсид ВБМ икосаэдрической формы, состоит из 2 капсомеров, диаметром около 0 нм. Тегумент, термин, впервые предложенный i , 3, 8, является структурой, расположенной между капсидом и оболочкой. Оболочка ВБМ расположена вокруг тегумента и содержит липиды. Наличие липидов подтверждено при биохимическом анализе вириона и по чувствительности вириона к липидным детергентам.