Оптимизация агробактериального метода трансформации кукурузы

• Автор: Данилова, Светлана Алексеевна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 120 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

Обзор литературы

Глава I. Трансгенные растения для целей практической селекции.

1.1. Устойчивость к гербицидам

1.2. Устойчивость к насекомым

I. 3. Устойчивость к вирусам

1.4. Устойчивость к фитопатогенам

I. 5. Устойчивость к абиотическим стрессам

1.6. Сбалансированный аминокислотный состав запасных белков

I. 7,Изменснне состава вторичных метаболитов

1. 8.Получение вакцин с помощью трансгенных растений
I. 9.Экологическая роль трансгенных растений
Глава Н.Генетическая трансформация растений представителей
семейства злаковых
II. 1. Методы генетической трансформации однодольных растений
.1.1. Метод прямою переноса генов в протопласты
И. 1. 2. Трансформация с помощью опыления
И. 1. 3. Баллистическая трансформация
И. 1.4. Трансформация с использованием агробактерий
II. 2. Маркеры трансформации
И. 2.1. Селективные гены
II. 2.2. Репортерные гены
II. 3. Экспрессия чу жеродных генов и ее регуляция в трансгенных растениях
II. 4. Генегическая трансформация кукурузы
Экспериментальная часть
Глава III. Материал и методы
Глава IV. Результаты и обсуждение
IV. I.Влияние антибиотика канамицина на каллус и растения кукурузы
IV. 2. Влияние антибиотика цефотаксимэ на рост каллуса и регенерално
растений кукурузы
IV. 3. Трансформация кукурузы с использованием суспензии агробактсрий
IV. 4. Оптимизация условий агробактериальной трансформации при
культивировании каллуса кукурузы в суспензии агробакгерий
IV. 5. Трансформация кукурузы путем культивирования на газоне азробакгерий
16. Тестирование семян полученных из канамнцин устойчивых растений
кукурузы
IV. 7. Введение гена дефензина редькн
Заключение
Выводы
Список литературы


Уже клонированы гены, определяющих устойчивость к гербицидам таким, как глнфосфат коммерческое название i , i , , фосфинотрицин , , хлорсульфуроновыс и имнлаюлиноновые гербициды i , , 2,4 , , далапон , . С использованием этих генов получены трансгенные растения у различных сельскохозяйственных видов, среди которых кукуруза, соя, хлопчатник и т. Работа над получением резистентных к гербицидам растений сулит большой экономический эффект. I. 2. Несколько подходов может быть использовано для генетической инженерии растений с повышенной резистентностью к насекомым. ii ii . Существует ряд вторичных метаболитов растений, которые естественным способом предохраняют растение от паразитов, например, соединения, которые имитируют гормоны насекомых, нарушая при этом развитие последних. Перенос в культивируемые растения генов, необходимых для синтеза таких метаболитов, может повысить резистентность культурных растений i , . i , , , , i , i , . Наибольшие успехи в создании растений, устойчивых к насекомым, были достигнуты после переноса в растения генов б эндотоксинов i iii. Особый интерес к группе б эндотоксинов вызван широким разнообразием инсектицидной специфичности этих белков но отношению к различным насекомым , V . , и безвредностью для теплокровных животных, что доказано летним опытом их применения в качестве пестицидов. Все белки дельтаэндотоксина В. I белки, токсичные для i. С белки, токсичные для i и i. 1II белки, токсичные для куда входит и колорадский жук. I белки, токсичные для i i , Кучук, . С использованием модифицированных гснов получены устойчивые к различным насекомым траншейные растения томатов i , , , хлопчатника , , кукурузы i , , хризантемы V , , риса Ii . i . . , , сои , , тополя , , арахиса ii . , Кучук, . Устойчивость к вирусам. Для создания растений, устойчивых к вирусным заболеваниям, активно разрабатывается несколько подходов. Один из них, конструирование различных антисмысловых, i конструкций. Существует принципиальная возможность подавления экспрессии в клетке любого гена с помощью его антисмысловой РНК аеРНК. Так, показано повышение устойчивости растений, экспрессирующих асРНК белка оболочки вируса золотистой мозаики томатов, а также антисмысловой последовательности межцистроппой области вируса мозаики костра Бурьянов, Кадо, . Такой подход был использован при получении трансгенных растений табака, несущих антисмысловые конструкции для вируса мозаики огурца , и вируса табачной мозаики , . Другой подход в борьбе с вирусными заболеваниями состоит в клонировании и встраивании в геном растений гена синтеза белка оболочки i вирусов. Активный синтез такого белка, обладающею большим сродством к РНК вируса, не дат последней возможносги активно реплицироваться в клетке хозяина, что приводит к достаточно высокой устойчивости такого грансгенного растения к вирусам i , , , . В литературе встречаются сообщения о повышении устойчивости при встраивании фрагментов ДНК, кодирующих нстранслируемыс последовательности РНК вирусов i . От вирусной инфекции можно защищаться также путем встраивания в геном растения гснаов, кодирующего специфические антитела, узнающие вирусные белки vi , . Примером может служить встраивание сДНК юна антивирусного белка из растения i , , обеспечивающее широкий спектр устойчивости к вирусам растений.