Диагностика инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности

• Автор: Дмитриенко, Марина Александровна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 180 с. : ил

Введение

Глава 1. Обзор и обсуждение литературы.

1.1. i i, история открытия, свойства микроорганизма, эпидемиология инфекции и ассоциированность ее с другими заболеваниями

1.2. Хеликобактериоз и методы его диагностики

1.3. Уреаза, се свойства и методы исследования.

1.4. Методы определения уреазной активности

1.5. Уреазная система i i

Глава 2. Объекты и методы исследования.

Глава 3. Процесс определения i i по уреазной активности

3.1. Кинетика ферментативного гидролиза карбамида

3.2. Кинетика диффузионных процессов.

З.З.Обнаружение продуктов реакции гидролиза. Линейноколористический метод индикации веществ
3.4. Формулирование требований к разрабатываемым тестсистемам. Глава 4. Разработка способа определения уреазной активности i vi
4.1. Определение биоптата.
4.2. Оптимизация индикаторной системы
4.3. ХЕЛПИЛтест
4.4. Проверка ХЕЛПИЛтеста .
Глава 5. Способы определения уреазной активности i viv
5.1. ХЕЛИКтест как метод определения уреазной активности i
5.2. Пассивные дозиметры для определения аммиака
5.3. Индикаторные трубки как детектор содержания аммиака
5.4. Диагностика хеликобактериоза с помощью электрохимического сенсора.
5.5. Повышение чувствительности ХЕЛИКтеста.
Глава 6. Оценка возможности применения ХЕЛПИЛ и ХЕЛИКтеста для диагностики хеликобактериоза в медицинской лечебной и исследовательской практике
6.1. Применение ХЕЛПИЛ и ХЕЛИКгестов в медицине.
6.2. Схема диагностики инфекции i i.
Выводы
Благодарности.
Библиографический список использованной литературы
Приложения
Приложение 1. Протокол оценки чувствительности пассивных шельфдозиметров на аммиак Приложение 2. Акт испытаний работоспособности ХЕЛПИЛтестов Приложение 3. Акт испытаний работоспособности ХЕЛПИЛтестов Приложение 4. Акт испытаний ХЕЛПИЛтестов для определения уреазной активности биоптатов Приложение 5. Отзыв на методику диагностики геликобактериоза с помощью ХЕЛПИЛтсста Приложение 6. Отчет об использовании ХЕЛПИЛтеста Приложение 7. Акт технических приемочных испытаний Приложение 8. Протокол клинических испытаний устройств Приложение 9. Протокол клинических испытаний устройств Приложение . Протокол клинических испытаний устройств Приложение . Выписка из протокола Комитета по новой технике М3 РФ
СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ
ИТ индикаторная трубка
ИДС иондрейфовая спектрометрия
i i
НР наличие
НР отсутствие
ПВС паровоздушная смесь
ПЦР полимеразная цепная реакция
СОЖ слизистая оболочка желудка
СКО среднеквадратическос отклонение
УА уреазная активность
ФЭГДС фиброгастродуоденоскопия
ВВЕДЕНИЕ


По результатам этих испытаний Министерство Здравоохранения РФ рекомендовало тесты к серийному производству и практическому применению в медицинской практике, к внесению в Реестр изделий медицинского назначения. Диссертационная работа изложена на 1 странице машинописного текста, содержит рисунков и таблиц. Работа состоит из введения, 6 глав, выводов, благодарностей, приложений протокол проверки, отзывы, акт технических испытаний, протоколы клинических испытаний, выписка из протокола комиссии М3 РФ и библиографии 8 наименований. Глава 1. Предположения об инфекционном начале некоторых заболеваний желудка, таких как гастрит и язвенная болезнь, о присутствии в желудке млекопитающих и человека неких микроорганизмов высказывались уже достаточно давно. Наиболее полный систематический обзор по истории открытия бактерии сделан в сборнике лекций по проблеме инфекции Н. Е.К. Баранской . События, определяющие основные этапы предыстории и развития того раздела гастроэнтерологии, который в статье назван наукой гсликобактериологией, приводятся здесь в виде таблиц и интересно комментируются. На основе материалов, приведенных в сборнике Е. К. Баранской, а также в работе . I.i Век i i. Парадигмы утрачены, парадигмы вновь обретены 0, можно составить сводную таблицу наиболее значительных событий в исследовании инфекции i i таблица. Предположил влияние инфекции, попадающей в желудок изо рта, на возникновение септического гастрита и послеоперационных пептических язв ,. Предположили, что уреаза желудка имеет бактериальную природу. Приняты Маастрихтские рекомендации по диагностике и лечению инфекции Я. Из таблицы 1 видно, как менялись представления исследователей, как довольно долго накапливались разрозненные факты, приведшие затем к появлению инфекционной гипотезы этиологии и патогенеза некоторых гастритов и язвенной болезни. Затем гипотеза была подтверждена научным экспериментом самозаражением Барри Маршалла, продемонстрировавшим справедливость постулатов ГенлеКоха применительно к инфекции 4, 7. Сегодня известно, что бактерии Н. Сиднейская система. Гастриты являются важным фактором риска в развитии язвенной болезни перстной кишки и рака желудка , 0, 5. Признание роли НР в развитии гастрита и язвенной болезни привело к необходимости пересмотра ранее принятых принципов лечения. В настоящее время приняты Стандарты протоколы диагностики и лечения болезней органов пищеварения 3, предусматривающие эрадикацию НР при обнаружении его в случае гастритов и язвенной болезни. Только уничтожение НР ведет к излечению гастритов и в значительной степени снижает вероятность возникновения язвенной болезни. Таким образом, сегодня известно, что i i это микроорганизмы преимущественно образной формы длиной 2,5 4 мкм, шириной 0,5 мкм. На одном полюсе 4 7 жгутиков длиной 5 мкм, которые обеспечивают бактерии возможность активно передвигаться Рисунки 1 и 2 . Жгутики покрыты чехлами, достигающими толщиной нм и заканчиваются колбовидными утолщениями. Вегетативные спиралевидные формы , имеющие жгутики, могут трансформироваться в овоидные и кокковые формы Рисунок 3. Это происходит чаще в более старых культурах или в неблагоприятных условиях . Естественной средой для является слизь желудка. Часто они находятся глубоко в желудочных ямках, концентрируясь в межклеточных соединениях Рисунок 4. Однако она может заселять участки желудочной метаплазии в пищеводе или перстной кишке. Биохимические исследования показали, что продуцирует большое количество фермента уреазы, который расщепляет мочевину, входящую в состав почти всех пищевых продуктов, на аммиак и СО2 2, 8. За счет этих процессов вокруг бактерий создается защитное микроокружение в виде облака ионов аммония, связывающих Н ионы и таким образом нейтрализующих вредное воздействие на бактерию НС1 желудочного сока. Кроме того, как пишет Л. НОС1, генерируемой нейтрофилами, вырабатывает ряд цитотоксичсских продуктов, в том числе гидроксиламин 2 и монохлорамин . Эти продукты вызывают повреждение эпителия. Рис. Рис. Рис. Бактерии i со жгутиками на одном конце Н. Кокковая форма i i Н. Рис. Бактерии i i между клетками слизистой желудка Н.