Иммунологические и цитологические показатели вакцинированных подсвинков, трансгенных по рилизинг - фактору гормона роста человека

• Автор: Костерева, Наталия Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: п. Дубровицы, Московской обл.
• Количество страниц: 81 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Введение

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Перспективы биотехнологии

Общая характеристика трансгенных по рилизингфактору СТГ человека свиней 4 поколения.

Нейро гормональная регуляция иммунитета.

Воздействие стресса на показатели иммунитета.

Иммунная реактивность свиней.

Некоторые особенности иммунной реактивности

Взаимосвязь иммунной реактивности с развитием кроветворно лимфоидной системы.

Взаимодействие клеток в иммунном ответе.

Особенности протизсбактериального и противовирусного иммунитета
Гистологическая картина иммунного ответа в лимфоидных органах.
Ядрышковый организатор ЯОР и его значение.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Молекулярногенетический анализ животных на трансгенность и наличие толковой мутации в гене ЯУР1.
Отбор проб и экстракция ДНК из ткани.
Параметры ПЦРанализа для определения присутствия рекомбинантной генной конструкции в геноме тМИИСИЕ и наличие точковой мутации в гене БУР1.
Определение уровня экспрессии гена гормона роста свиней иммуноферментным анализом.
Приготовление сыворотки для исследований
Определение неспецифических и специфических факторов защиты организма
Исследование уровня иммуноглобулинов в и М.
Определение уровней Л1.ЦИМН0Й и бактерицидной активности.
Определение уровня антител к возбудителям бактериальных и вирус. болезней.
Приготовление мазков л перечет лейкограммы.

2.5. Цитологический анализ подопытных групп.
2.5.1. Отбор проб для постановки культур клеток периферической крови и тка..ей.
2.5.2. Постановка клеточной культуры для получения цитологических препаратов хромосом.
2.5.3. Приготовление цитологических препаратов.
2.5.4. Окрашивание и методика подсчета уровня ЯОР.
2.5.5. Методика морфометрии ядрышек.
2.6. Анализ клеточных культур из тканей.
2.6.1. Приготовление и окрашивание препаратов клеточных культур.
2.6.2. Методика описания ,р Оологии культур клеток.
2.7. Гистологический анализ лимфоидных органов.
2.7.1. Взятие проб, фиксация и приготовление гистологических препаратов.
2.7.2. Гистохимическое окрашивание
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДч, .,АНИЙ
3.1. Трансгенность и стрессустсйчивость в группах.
3.2. Концентрация гормона роста свиней в подопытных группах.
3.3. Показатели естестее чой зезистентности при вирусной и бактериальной закцинации.
3.3.1. Уровни иммуноглобулинов и М, бактерицидной и лизоцимной активности
3.3.2. Титры антител к возбудителям.
3.3.3. Лейкограммы подог. . .х клвотных.
3.4. Характеристика клеточных культур трансгенного и контрольного подсвинков.
3.5. Характеристика активности ядрышковых организаторов.
3.6. Гистологическая картина иммунной реактивности лимфоидных органе тднегенного и контрольного подсзинков после иммунизации.
Обсуждение полученных результатов
Список литературы


Приготовление мазков л перечет лейкограммы. Цитологический анализ подопытных групп. Отбор проб для постановки культур клеток периферической крови и тка. Постановка клеточной культуры для получения цитологических препаратов хромосом. Приготовление цитологических препаратов. Окрашивание и методика подсчета уровня ЯОР. Методика морфометрии ядрышек. Анализ клеточных культур из тканей. Приготовление и окрашивание препаратов клеточных культур. Методика описания ,р Оологии культур клеток. Гистологический анализ лимфоидных органов. Взятие проб, фиксация и приготовление гистологических препаратов. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДч, . Трансгенность и стрессустсйчивость в группах. Концентрация гормона роста свиней в подопытных группах. Показатели естестее чой зезистентности при вирусной и бактериальной закцинации. Титры антител к возбудителям. Лейкограммы подог. Характеристика клеточных культур трансгенного и контрольного подсвинков. Характеристика активности ядрышковых организаторов. Гистологическая картина иммунной реактивности лимфоидных органе тднегенного и контрольного подсзинков после иммунизации. Развитие биотехнологии и успешные работы по получению трансгенных животных выдвинули на первый план вопрос о взаимодействии экзогенных конструкций с геномом реципиентов, в том числе с наследственными системами, контролирующими иммунитет. Изучение данной проблемы представляет несомненный интерес, так как с помощью генной инженерии сг овится возможным создание линий трансгенных сельскохозяйственных животных, генетически устойчивых к различного рода заболеваниям . Генетические исследования ряда лабораторий мира показали дестабилизирующее действие чужеродных генов на состояние хромосомного аппарата и появление, связанных с этим, генных мутаций ,9. МТ1ЬОРР содержи ИвКР и метгллотионеиновый промотор 1 мыши тМТ1. В ряде предыдущих исследований по проблеме Генноинженерные животные было начато изучение хозяйственнополезных, физиологобиохимических параметров и иммунного статуса этих транс. Наиболее важными показателями, характеризующими естественную резистентность являются бактерици, лая. М и д С . Цели и задачи исследований Цель исследований изучить особенности иммунного статуса и некоторые цито и гистологические характеристик ршхгенных по рилизинг фактору гормона роста человека тМТ1ИОРг подсвинков до и после вакцинации бактериальными и вирусными вакцинами. Провести гистологическое сравнене картины иммунологической реактивности в лимфоидных органах от жиос двух групп и от невакцинированного животного. Научна . Впервые изучены особенности иммунного статуса, показатели ядрышковых организаторов культур клето. Ю до и после иммунизации поливалентными бактериальной и вирусной вакцинами, показавшие определенные различия в иммунных и цитологических ЯОР характеристиках трансгенных животных от нэтрансгенных до и после иммунизации, а также различие показателей ядрышковых сргш. Положения, выносимые на защиту Иммунологические особенности и сравнение концентраций эндогенного гормона роста у подсвинков, трансгенных по рилизинг фактору гормона роста человека до и после иммунизаций вакцинами против бактериальных и вирусных болезней. Уровень активности ядрышковых организаторов ЯОР в группах до и после иммунизаци вакцине узржащей вирусные антигены. Особенности активности ядрышковых организаторов в клетках внутренних органов трансгенного и контрольного животных после иммунизации вакциной, содержащей вирусные антигены. Гистологическая картина иммунного ответа в лимфоидных органах трансгенного и контрольного Апр . Материалы диссертации были представлены на заседании отдела биотехнологии ВИЖа и научной конференции ВИЖз Достижения молодых ученых в области животноводства . С. Структу р. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, обсуждения ос . Объем диссертации страница машинописного текста, включает таблиц и фотографий. Список литературы включает 9 источников, в том числе Л на иностранных языках.