Новые подходы к совершенствованию методов иммунохимического анализа с помощью синтетических полимеров для ряда возбудителей инфекционной патологии

• Автор: Лещук, Светлана Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Иркутск
• Количество страниц: 263 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Г ЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. История развития методов иммунохимического

анализа.

1.2. Принцип создания искусственных иммуногенов

1.2.1. Искусственные антигены

1.2.2. Действие синтетических полимерных адъювантов на иммуногенез

1.3. Получение эритроцитарных диагносгикумов с помощью конъюгации.3

1.3.1.Конъюгирующие компоненты, используемые при конструировании эритроцитарных диагностикумов

1.3.2. О сенсибилизации эритроцитов белковыми антигенами.

1.4. Краткая характеристика интерполимерных комплексов синтетических полимеров
1.4.1.Природа связей, стабилизирующий ИПК интерполимерный комплекс.
1.4.2. Влияние различных факторов на образование и структуру полимерполимерных комплексов
1.4.3 Взаимодействие полимерных комплексов с белками.5.
ГЛАВА 2. Направления, материаты, объекты и методы исследования .
ГЛАВА 3. Исследование взаимодействия синтетических полимеров полиМ
винилазолов с белками
3.1. Краткая характеристика кислотноосновных свойств исследуемых
полимеров.
3.2. Изучение комплексообразования поли1винилазолов с белками
ГЛАВА 4. Исследование иммуностимулирующей активности
синтетических полимерных адъювантов.
4.1. Получение гипериммунных сывороток к НВвА вируса гепатита В с помощью полимерного адъюванта сополимера5изопропилентетразола и Ывинилпирролидола ИПТВД.
4.1.1. Выделение гамма фракции из яиц иммунизированных птиц и очистка иммунных антител от неспецифичсских компонентов
4.2. Получение антибактериальных антител к коринебактериям дифтерии с помощью полимерных адъювантов
ИПТВПД, ПВТ5, ПВИ1.
4.3 Динамика иммуногенеза в ответ на введение дифтерийного микробного антигенавакцины Кодивак с полимерным
адъювантом ИГГГ5
ГЛАВА 5. Исследование иммуноадсорбирующей способности
водорастворимых полимеров и полимерных комплексов.
ГЛАВА 6. Дизайн антигенных эритроцитарных диагностикумов на основе новых конъюгирующих компонентов. НО
6.1. Технологические аспекты конструирования эритроцитарных антигенных диагностикумов
6.2. Сенсибилизационная активность карбоксил и азолсодержащих полимеров при конъюгации эритроцитов барана с бактериальными антигенами.
6.3. Сравнительная характеристика сконструированных диагностикумов по определению антибактериальных антител к коринебактериям дифтерии 8 ГЛАВА 7. Клиникоэпидемиологическое испытание антигенного эритроцитарного диагностикума в изучении антибактериального противодифтерийного иммунитета
7.1. Изучение напряженности противодифтерийных антител антитоксических и антибактериальных в сыворотках крови различных контингентов здоровых лиц, больных дифтерией, бактерионосителей . xь.
7.2. Оценка антибактериального иммунитета у бактерионосителей . x
после лечения биомодулятором вакциной Кодивак
7.3 Оценка иммунопатологического состояния организма при массовых обследованиях населения проживающего в условиях высокого уровня техногенного загрязнения окружающей среды
7.3.1. Оценка иммунопатологического состояния здоровья по иммунологическим показателям 1уровня.
7.3.2. Способ оценки иммунорезистентности организма по уровню
нормальных антител к коринебактериям дифтерии в РИГА.
ВЫВОДЫ.
Список использованной литературы


В году известный ученый М. Села получил фрагмент куриного лизоцима. Суть направления, предложенного М. Села, состоит в получении детерминантных групп антигенов синтетическим путем, с последующим их конъюгированием с синтетическими полиаминокислотами или нативными белками. В начале х годов появились первые сообщения о вакцинирующем эффекте искусственных пептидов. Так же известно, что иммунный ответ развивается при кооперации трех иммунокомпетентных клеток макрофагов, Т и В лимфоцитов, все это происходит под контролем генов иммунного ответа 1 ггенов. А как обойти Учтенный контроль и заставить низко реагирующий организм проявлять высокую активность. Эту задачу и поставили перед собой ученые во главе с академиком Р. В. Петровым. Для решения этой задачи нужно было найти стимулятор, в соединении, с которым, антиген обрел бы силу, достаточную для включения иммунной системы. Исходя из этого, группой академика Р. В. Петрова было разработано принципиально новое направление, состоящее в конструировании вакцин на основе синтетических полианионных молекул полиэлектролитов , 5, 7, 1, 2, 6, 3, 4, 2 и присоединенных к ним гаптенов или детерм инантных групп антигенов, полученных синтетически или выделенных из возбудителя. Поскольку полиэлектролиты оказывают иммуностимулирующее действие и отменяют генный контроль иммунного ответа, вакцины на их основе должны обладать всеми достоинствами и быть эффективными против любого инфекционного заболевания. Перспективным достоинством синтетических вакцин является возможность получения чистых, устойчивых и легко стандартизируемых антигенов за счет химической технологии, которая может быть экономичнее и безопаснее технологии микробного и вирусного происхождения. Кроме того, химический подход открывает перспективу создания поливалентной вакцины в виде единого полимера, содержащего детерминантные группы антигенов различных возбудителей. Простота химического синтеза и строения полиэлектролитов, возможность получения полимерных цепочек в широком диапазоне молекулярных масс, т. Иммунологические исследования последних лет с использованием синтетических полипептидных антигенов привели к ряду крупных открытий и обобщений. В последние годы удалось синтезировать искусственные антигены, которые не имеют природных химических аналогов и представляют собой макромолекулярные комплексы, сочетающие наряду с антигенным началом гапгеном или белком специальные полимерные фрагментыстимуляторы клеточной активности , , , 1, 8, 4, 7. Оказалось, что типичные Тзависимые антигены в комплексе с полимерами способны к связыванию белков, к многоточечной кооперативной сорбции па клеточных мембранах вследствие чего превращаются в сильно действующие Тнезависимые антигены , . При контакте Влимфоцит узнает свой антиген благодаря тому, что гаптен связывается с комплементарным ему рецептором на поверхности клетки. Полимерный носитель в результате многоточечной кооперативной сорбции на поверхности Вклетки, обязательно доставит к ней и связанный с ним гаптен. Иными словами, конъюгант гаптенполимерный адъювант должен обладать свойствами искусственного тимуснезависимого антигена , , 9, 0, 7, 1. Многолетние исследования ученых позволили подобрать носители полимеры, которые заменяли функцию Тлимфоцитов, делая иммунный ответтимуснезависимым и от них и от ггенов , , 5, 6, 9. Это открытие в иммунологии позволило обойти генный контроль. Известно, что в генах заложен характер ответной реакции организма на антиген. А если возбудитель соединить со стимулятором из полимера и вести в организм, то его иммунный ответ, даже генетически ограниченный, будет сильным. Известен широкий круг полимерных соединений как природных полисахариды, нуклеиновые кислоты и др. Ыэтилпиридиний бромид, полиоксидоний и др. Ни одно из приведенных соединений само по себе не является антигеном. В основе иммуностимулирующей активности полимерных адъювантов лежат некоторые общие механизмы, обусловленные прочной многоточечной кооперативной адсорбцией на химически комплементарных поверхностях , , , 1, 5.