Получение и некоторые свойства менингококковой IgAl-протеазы

• Автор: Теймуразов, Марат Георгиевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Оболенск
• Количество страниц: 101 с. : ил.

Оглавление
ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Характеристика Iиротеаз

1.1.1 Открытие Iпротеаз

1.1.2 Секреторный иммунитет. Структура сывороточного и

секреторного I

1.1.3 Структура генов Iпротеаз и экспрессия их продуктов в

грамотрицательных бактериях

1.1.4 Методы обнаружения Iпротеаз и определение активности

1.1.5 Очистка I 1 протеаз и I 1

1.1.6 Гидролиз I 1 и специфичность Iпротсаз
1.1.7 I 1 нротеазы как фактор вирулентности
1.2 Проблема вакцинации против менингита и
менингококкован Iпротеаза
1.3 Факторы патогенности и вирулентности .iiii
1.4 Питательные среды для культивирования
менингококков
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Микроорганизмы, задействованные в работе и методики
по работе с ними
2.1.1 Проверка биохимических, морфологических и
серологических свойств . iiii
2.1.2 Определение чувствительности штаммов .iiii к
антибактериальным препаратам
2.1.
2.1.5 2.
2.2.
2.2.
2.2.
2.
2.3.
2.3.
2.4.
Подбор питательной среды для штаммов . iiii
Подготовка посевного материала
Глубинное культивирование штаммов .iiii
Определение ферментативной активности I
протеазы
Выделение иммунохимически чистых I и 2
Иммунизация животных
Выделение I из кроличьей антисыворотки
Получение конъюгата антител к I с пероксидазой хрена Определение разведения конъюгата
Качественный метод определения ферментативной
активности Iпротеазы методом ИФА
Количественный метод определения ферментативной активности Iпротсазы
Выделение н очистка Iпротеазы
Предварительная обработка культуральной жидкости и концентрирование
Очистка на высокопористом силохроме
Очистка на фенилсефарозе
Г ельфильтрация
Свойства Iпротеазы
Определение изоэлектричсской точки I 1 протеазы
Определение констант ингибирования I I протсазы
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Культивирование . iiii
Проверка морфологических, биохимических и
серологических свойств штаммов . iiii
Определение чувствительности штаммов . iiii к антибактериальным препаратам
Подбор плотной питательной среды для штаммов
. iiii
Подбор жидкой питательной среды для штаммов
. iiii
Выбор штамма . iiii для культивирования
Подготовка посевного материала
Глубинное культивирование штаммов . iiii
Определение ферментативной активности I
протеазы
Качественный метод определения ферментативной
активности Iпротеазы
Количественный метод определения ферментативной активности Iпротеазы
Выделение и очистка Iпротеазы
Предварительная обработка культуральной жидкости
Очистка на высокопорнстом силохроме
Гндрофобная хроматография на фенилсефарозе
Г ельфильтрация на сефарозе 6
Схема очистки и данные по выходу фермента
Свойства Iпротеазы
Определение молекулярной массы I протсазы
6.2 Определение изоэлектрической точки 1А1 протеазы
6.3 Определение констант ингибирования для 1А I протеазы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ЛИТЕРАТУРА


Ж.М. Л.И. Московский научноисследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Рис. Табл. В. ii i ii В. . i i i . Секреторный иммунитет. Факторы патогенности и вирулентности . Определение чувствительности штаммов . Подбор питательной среды для штаммов . Глубинное культивирование штаммов . Культивирование . Определение чувствительности штаммов . Выбор штамма . Глубинное культивирование штаммов .