Приготовление питательных сред на основе гидролизата соевой муки для глубинного культивирования бактерий рода Bacillus

• Автор: Вишняков, Александр Валерьевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 120 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Питательные потребности бактерий рода i

1.2. Факторы, влияющие на интенсивность процессов спорообразования и накопления биомассы бацилл
1.3. Критерии выбора композиционного состава питательных сред при культивировании бактерий рода i.

1.4. Получение и применение гидролизатов в составе питательных

1 1.5. Питательные среды, применяемые для культивирования бактерий

рода i при производстве вакцинных и пробиотических препаратов

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2.1. Выбор условий гидролиза соевой муки
2.2.2. Изучение физикохимических и ростовых свойств эксперимен
тальных образцов гидролизатов соевой муки.
2.2.3. Оптимизация состава питательных сред для глубинного культивирования бацилл.
2.2.4. Стандартизация условий глубинного культивирования различных штаммов бацилл в питательных средах на основе гидролизата соевой муки.
2.2.4.1. Изучение влияния посевной дозы на основные показатели нативной культуры
2.2.4.2. Влияние температуры культивирования на рост и спорообра
зование бацилл
2.2.4.3. Стандартизация условий перемешивания и аэрации при глубинном культивировании бацилл в биореакторах БИОР0,1 и БИОР0,
2.2.4.4. Определение показателей, характеризующих стадию завершения культивирования бацилл в разработанных питательных средах
2.2.5. Оценка воспроизводимости технологии приготовления питательных сред на основе гидролизата соевой муки
2.2.6. Сравнительная характеристика показателей качества препаратов Биоспорин и Биод5, приготовленных по усовершенствованной и существующим технологиям
3. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
5. ВЫВОДЫ.
6. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
7. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ.
8. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.
ПРИЛОЖЕНИЯ.
ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ
БК
БАВ
БИОР 0,1, БИОР 0, ГИСК
ГСМ
Кьа
КМС
КУК
МГАВМиБ
НККЖ
ОКИ
ПД
по

НИИМ БЗ
аппаратурнотехнологическая линия биологическая концентрация клеток биологическая концентрация термоустойчивых клеток биологически активное вещество
биореакторы вместимостью 0 и 0 дм3, соответственно
Государственный научноисследовательский институт стандартизации и контроля медицинских и иммунобиологических препаратов им. Л.А. Тарасевича готовая лекарственная форма гидролизат соевой муки жидкая рецептурная масса
сульфитный коэффициент, характеризующий процесс массопередачи кислорода кислотный гидролизат казеина
концентрированная микробная суспензия
общая концентрация клеток по счету в камере Горяева
кукурузный экстракт концентрированный
Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина мясопептонный бульон
нативная культура культуральная жидкость
нормативнотехническая документация
острая кишечная инфекция
оптическая плотность
посевная доза
посторонняя микрофлора
питательная основа
питательная среда
водородный показатель
Центр военнотехнических проблем биологической защиты НИИ микробиологии МО РФ.
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Определить показатели, характеризующие стадию завершения культивирования бацилл в разработанных питательных средах. Биоспорин и Биод5, полученных из культур микроорганизмов, выращенных в разработанных питательных средах. Обосновать экономическую целесообразность внедрения в производство новых питательных сред для глубинного культивирования бактерий рода i. Научная новизна. Впервые разработан компонентный состав питательных сред В1 и В2 на основе гидролизата соевой муки для глубинного выращивания в биореакторах . Разработанные среды являются стандартизированными и отвечают питательным потребностям указанных микроорганизмов при их росте и спорообразовании. Оптимизированы параметры и режимы глубинного способа культивирования в питательных средах В1 и В2 культур вакцинных штаммов . СТИ1, . ВНИИВВиМ, а также культур пробиотических штаммов . ТПИ , . ТЛИ , обеспечивающие увеличение выхода биомассы бацилл в 1,7 раза, в сравнении с существующими технологиями. При выращивании бацилл в биореакторах определены критерии оценки процесса завершнности накопления биомассы в средах В1 и В2 по водородному показателю, оптической плотности и терморезистентности клеток. Практическая значимость. Для биотехнологической промышленности предложены стандартные питательные среды В1 и В2, пригодные для культивирования трех видов бацилл . Разработана и утверждена г. Разработана и утверждена г. В1 и В2. Результаты исследований по созданию технологии приготовления питательных сред В1 и В2 включены в промышленные регламенты производства пробиотиков Биоспорин утверждн г. Разработаны сборники инструкций предприятия по оценке качества полуфабрикатов для приготовления препаратов Биоспорин и Биод5, утвержденные г. Результаты исследований по технологии приготовления питательных сред В1 и В2 для культивирования бактерий рода i используются в учебном процессе на кафедре биотехнологии МГАВМиБ имени К. И. Скрябина при подготовке студентов по специальностям Ветеринария, Зоотехния, Биофизика, специализации Ветеринарная биофизика Биохимия, специализации Ветеринарная биохимия. Личный вклад соискателя. Автору принадлежат организация и непосредственное осуществление исследований по разработке компонентного состава питательных сред В1 и В2, отработке режимов и параметров глубинного способа выращивания культур штаммов . ТПИ , . ТПИ , . СТИ1 и . ВНИИВВиМ, оценке качества гидролизатов соевой муки и разработанных питательных сред, анализ и теоретическое обобщение полученных данных, разработка научнотехнической документации. В работе использованы материалы, полученные лично автором, а также в соавторстве со старшими научными сотрудниками ЦВТП БЗ, канд. Лиморенко А. П. и канд. Орловым Ю. Н., которым выражаю благодарность за помощь и поддержку. Апробация результатов диссертации. НИИ микробиологии МО РФ . Публикации. По результатам диссертации опубликовано 4 статьи, в том числе 2 в научных журналах и 2 в сборниках научных конференций. Объем и ст руктура диссертации. Материалы диссертации изложены на 0 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, данные о практическом использовании научных результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы 8 источников, из которых 0 отечественных и иностранных, приложения. Работа содержит таблицы и 9 рисунков. Теоретическое и экспериментальное обоснование компонентного состава питательных сред В1 и В2 для глубинного культивирования бактерий рода i. Условия гидролиза соевой муки для приготовления питательных сред и оптимизация их состава. Параметры и режимы глубинного способа культивирования различных видов и штаммов бацилл в разработанных питательных средах В1 и В2. Современная микробиология располагает достаточно большим арсеналом питательных сред. Их количество определяется, в первую очередь, большим числом культивируемых с их помощью микроорганизмов с разными питательными потребностями, а также целевым назначением выращивания, требованиями к получаемой на их основе продукции и т.