Исследование жизнеспособности клеток животных при культивировании в биореакторах в суспензии и на микроносителях

• Автор: Гунин, Максим Александрович
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Щелково
• Количество страниц: 136 с.

Содержание стр.

1. Введение

2. Обзор литературы

3. Собственные исследования

3.1. Материалы и методы

3.2. Результаты исследований

3.2.1. Экспериментальное подтверждение модели кинетики роста клеток

3.2.2. Гипотетический объем гибели клеток

3.2.3. Влияние механического перемешивания и аэрации на гибель клеток животных

в биореакторе

3.2.4. Исследование влияния концентрации сыворотки

в культуральной жидкости на гидродинамические условия культивирования клеток животных в биореакторе
3.2.5. Влияние поверхностноактивных веществ
на гидродинамические условия культивирования клеток животных в биореакторах
3.2.6. Исследования влияния гидродинамических условий на процесс культивирования клеток животных на микроносителях
4. Обсуждение результатов
5.Выводы
6. Практические предложения
7. Использованная литература Приложения
1.ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Перечисленные выше проблемы требуют исследования процессов гибели клеток животных при культивировании в биореакторах в суспензии и на микроносителях. Исследование гибели клеток животных при культивировании позволит сформулировать основные требования к конструкции биореакторов и технологическим режимам их работы. Цели и задачи исследований. Целью исследований явилось изучение динамики гибели клеток животных в суспензии и на микроносителях при культивировании в биореакторах. СуЩбех в зависимости от аэрации, перемешивания, концентрации сыворотки, концентрации ПАВ и концентрации микроносителей в единице рабочег о объема. Научная новизна. ВПК в биореакторах. Константа гибели составила от 0,1 до 1,4 . ВНК в биореакторах и получены константы гибели от 0, до 1,2. ПАВ на процесс культивирования клеток ВНК и Уего в биореакторах и получены константы гибели от 0, до 2,0. ФЭП, ФЭК, Уего при культивировании на микроносителях СуКх1ех 3 и получены константы гибели от ,8 до ,3 Л О6 сек 1. Практическая значимость работы. ПАВ в культуральной жидкости. Апробация полученных результатов. Всероссийской научнопрактической конференции, посвященной летию института Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов 89 июня г. Щелково . Международной научнопрактической конференции Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными, экзотическими и зооантрогюнозными болезнями животных августа г. Покров . СеминареПрезентации инновационных научнотехнических проектов Биотехнология сентября г. Пущино на Оке, . Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 9 научных статей. ПАБ. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 7 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение, выводы, практические предложения, список отечественной и зарубежной литературы 4 наименований. Материалы диссертации иллюстрированы 7 таблицами, рисунками, приложения. Клетки животных необходимы для производства многих биологически активных белков. В этот перечень входят лечебные и диагностические антитела, вакцины и гормоны. Основные данные по конструкциям биореакторов для культивирования микроорганизмов приведены начиная с х годов в трудах Соломонса 0, Аиба и др. Аткинсона 5, Кафарова и др. Одним из узких мест биотехнологии является процессы культивирования клеток животных в биореакторах в суспензии и на микроносителях. Во всех случаях, где первоначально поверхностный метод давал большой выход продуктов при подборе соответствующих условий, в конечном счете, глубинный метод оказывается более выгодным в промышленности. Для изучения физиологии микроорганизмов, имеющих склонность к росту в виде пленок метод глубинного культивирования является единственным, позволяющим получать воспроизводимые результаты 3, 6, . Однако, существует ряд проблем при использовании методов глубинного культивирования и культивирования на микроносителях клеток животных , 15. Более глубокое изучение физиологии клетки, улучшение состава питательной среды, оптимизация конструкции биореакторов и процессов контроля является основным направлением для решения этих проблем. Только начиная с х годов появились сообщения о некоторых, в большинстве своем эмпирических, подходах и требованиях к биореакторам для культивирования клеток животных 2,8,,. С технологической точки зрения различают два основных принципа культивирования клеток, а именно выращивание на разделе фаз газ твердая питательная среда например, на поверхности питательного агара и применение техники глубинного культивирования клетки окружены жидкими питательными веществами. Принципы техники глубинного культивирования обычно применимы к обоим типам клеток животных к тем, рост которых зависит от прикрепления к твердым поверхностям, и к тем, которые растут в суспензии. Поверхность матрица движется жидкость в статическом состоянии роллерные бутыли, вращающиеся диски , , . Поверхность матрица статическая жидкость движется надосадочные слои или колонки, все виды поддерживающих носители или защищающих матриц ,, .