Иммуноферментный анализ аминогликозидных антибиотиков

• Автор: Гордон, Кира Валериановна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 128 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Аминогликозидные антибиотики. Свойства и применение

1.2.Метода определения лекарственных препаратов

1.2.1. Твердофазный илиунсфермектный анализ

2. Материалы и методы

2.1. Материалы

2.2.Метода

2.2.1. Функциональный анализ белков и, конъюгатов

2.2.2. Получение антисыворотб.
2.2.3. Имлунофермэнтный анализ
2.2.4. Получение и анализ липоосм
2.2.5. Липоосмалььый имсферментный анализ
2.2.6. Синтез конъюгатов пероксидада с антибиотиками
3. Результаты исследований и их обсуждение
3.1. Получение ИМЛуНОгенов и изучение их свойств
3.1.1.Синтез конъюгатов белков с неомицинсм и
канаьмцинем глутаральдегидньм метода
3.1.2. Синтез конъюгатов белков с неомицинсм, канакицином и гентамкпинсм карбэдиимидньм методом
3.1.3. Синтез конъюгатов глицидилированных
белков с гентамииином
3.1.4. Синтез конъюгатов модифицированного пбензохинонсм овальбуьгина с гентамицинсм
3.1.5. Синтез конъюгатов синтетических полимеров с несминином
3.2. Изучение иммунотенности конъюгатов аминогликозидных антибиотиков с природнъми и
синтетическими полимерами
3.3. Изучение свойств кроличьих сывороток
против аминогликозидных антибиотиков
3.3.1. Изучение динамики иммунного ответа и
аффинности антител
3.3.2. Изучение специфичности антисывсроток
3.4. Изучение различных систем имиуноферментнохо
анализа аьашогликозидных антибиотиков
3.4.1. Липосомальный имиуисферментный анализ неомицина
3.4.2. Прямой конкурентный ИОЛ шлиюгликозидных антибиотиков
3.4.2.1. Прямой конкурентный ИФА гентамицина
3.4.2.2. Прямой конкурентный ИФА несмииина
3.4.4. Непрямой конкурентный ИФА амине
гликозидных антибиотиков
3.4.4.1. Непрямой конкурентный ИФА гентамицина
3.4.4.2. Непрямой конкуре стный ИФА несмицина, канамииина и мономииина
3.4.4.3. ИФА гентамицина при региональной антибиотикотерапии
3.4.4.4.Экологически мониторинг неомицинэ и мономицина
4. Заключение
5. Вывода
6. Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
БСА бычий сывороточный альбумин
ВЗЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография
ГМ гентамицин
ГПХ гель проникающая хроматография ИФА имноферментньй анализ ИФТС имчуноферментная тестсистема КМ канамишн
НАФ неполный адъювант Фрейнда
НМ неомицин
ОВА овальбумин
ПАФ полный адъювант Фрейнда
ПВП поливинилпирролидон
ПДКгш. предельнодопустимая концентрация в атмосферном воздухе рабочей зоны ПХ пероксидаза хрена ТНБС тринитрсбензолсульфокислота ЧСА человеческий сывороточный альбумин ЭДГА этилендиамиктетрауксусная кислота I анализ с имчуномодуляцией активности фермента I твердофазный имгфноферментньй анализ I иммуноглобулин
Введение
Актуальность


В связи с сильными вариациями фармакокинетических параметров у различных больных применение аминогликозидных антибиотиков рекомендуется в индивидуальных дозах, Выяснение
особенностей фармакодинашки антибиотика принято осуществлять с помощью мониторинга лекарства. Для определения концентраций антибиотика в крови в различные сроки после введения могут Сыть использованы биологические микробиологические и физикохимические методы. Микробиологические методы не отличаются высокой чувствительностью, полуколичественнь, недостаточно специфичны, длительны и трудоемки. Физикохимические, включавшие сепараиконную стадию, требуют пробоподпотовки и дериватизации для введения в определяемой антибиотик детектируемой метки. Биотехнологическая промышленность США, Великобритании и Франции производят соответствующие наборы реагентов для радиоиммунного, иммунофлуоресцентногэ и юмунсферментного анализа различных лекарственных препаратов, в тем числе антибиотиков. Твердофазный иьмуноферментный анализ является одним из перспективных направлений иммунохиьмческого определения биологически активных веществ, сочетающим уникальную специфичность иммунологического распознавания и очень высокую чувствительность детекции энзимной метки, в качестве которой могут применяться наиболее активные ферменты. России, слабой научной проработкой вопросов синтеза и получения необходимых реагентов, недостаточный обоснованием определенных вариантов ИФА этих антибиотиков особенно это относится к гетерогенным системам, не проведены экспериментальные исследования пригодности систем твердофазного ИФА для анализа биологических образцов и определения антибиотиков в окружающей среде. ИФА для научных исследований, клинического и экологического мониторинга. Аминогликозидные антибиотаки. Свойства и применение. Аминогликозидные антибиотики группа препаратов, продуцируемых микроорганизмами, относящимися к родам , i и i. Отличительной особенностью строения этих антибиотиков является наличие в молекуле циклического аминоспирга стрегггилкн или 2дезоксистрептамин, с который связаны несколько остатков сахаров и амикосахаров. Стрептомицин оьщо выделен в г. Этот антибиотик отличается высокой активностью в отношении различных патогенных микросргаизмов, включая i i. Структура некоторых аминогликозидных антибиотиков, применяемых в России, представлена на стр. Антибиотики, содержащие 2дезоксистрелтамин, разделяют на 2 группы, в зависимости от замещения гидроксильных групп аминсслирга С4 и С5 или С4 и С6. Спектр биологической активности неомииина в основном повторяет спектр стрептомицина. Нгй . Еапьно смльньм аллергизируюцим действием. Кроме того, в последние года приобрели широкое распространение резистентные мутанты. Неомииин ввиду отстоксичности и нефротоксичности либо не применяют в медицине, либо в исключительных случаях используют в композициях только для местного применения. В зарубежных странах применение несмицина в ветеринарии и пищевой промышленности для предотвращения микробиологической порчи продуктов питания запрещено законодательством. В сельском хозяйстве применяют и другие аминогликозида. В частности для лечения аскаридоза животных применяют гигрэмицин В и дестомицин. Для лечения болезней растений применяют касугамишн и дестомицин. Эти антибиотики не производятся в России. Представители второй группы антибиотиков, содержащие 2дезоксистрептамин канакицин, гентамицин, сизомииин и тоСраглшин, были выделены позднее стрептомицина и отличаются более высокой активностью и меньшим побочный действием. Разработка биосинтеза культуры iv и химической очистки целевого продукта обеспечивало создание так называемого рентами нинового комплекса, представляющего собой смесь компонентов С1, С1а и С2, отличающихся степенью метилирования Сб сахарного остатка, присоединенного к сахароспирту в 4 положении. Гентамицин в миткальных концентрациях активен в отношении золотистого стафилококка и многих грамотрицательных бактерий. Этот антибиотик широко применяют в клинике для лечения инфекций, вызванных чувствительными к нему микроорганизмами. За рубежом применяют в клинике антибиотики тсбрамицин и сизомииин.