Изучение возможности применения экстракционных методов для выделения 4,6 замещенных 2-дезоксистрептаминов из водных сред и определения их концентрации в технологических растворах

• Автор: Носков, Андрей Анатольевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Щелково
• Количество страниц: 133 с.

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Основные свойства 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов

1.2. Методы выделения 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов из водных сред

1.3. Общие сведения об экстракции гидрофильных органических оснований

1.4. Переносчики для экстракции 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов

1.5. Органические растворители для экстракции 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов

II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Материалы и методы

1.1. Объекты исследования

1.2. Методы исследования

1.2.1. Методы ведения технологических процессов
1.2.2. Методы контроля ведения технологических процессов
1.2.3. Методы контроля показателей качества препаратов
1.3. Обработка результатов
2. Выбор условий, переносчиков и растворителей для экстракционного выделения 4,6 замещенных 2дезоксистрсптаминов
2.1. Выбор условий экстракционного выделения 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов из водных сред
2.2. Выбор системы растворитсльпереносчик для экстракционного выделения 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов из водных растворов
2.2.1. Выбор органического растворителя для экстракционного выделения
4,6 замещенных 2дсзоксистрептаминов из водных сред растворами переносчиков
2.2.2. Выбор переносчиков для экстракционного выделения
4.6 замещенных 2дезоксистрептаминов из водныз сред
3. Выбор оптимальных условий экстракционного выделения
4.6 замещенных 2дезоксистрсптаминов из водных растворов
3.1. Изучение влияния значения раствора на экстракцию
4.6 замещенных 2дезоксистрентаминов
3.2. Изучение влияния мольного соотношения реагентов на экстракцию
4.6 замещенных 2дезоксистрептаминов
3.3. Изучение влияния продолжительности процесса экстракции на полноту извлечения 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов из водного раствора в ионный ассоциат
3.4. Выбор условий реэкстракции 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов из системы антибиотикпереносчик
4.5. Экстракция 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов из нативных растворов
4. Разработка экстракционнофотометрического метода определения концентрации 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов в технологических растворах
4.1. Выбор оптимальных условий проведения экстракционнофотометрического определения концентрации 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов в технологических растворах
4.1.1. Выбор переносчика для фотометрического определения
4.6 замещенных 2дезоксистрсптаминов
4.1.2. Выбор органического растворителя для экстракции ассоциата
4.6 замещенных 2дсзоксистрептаминов с бромтимоловым синим в органическую фазу
4.1.3. Изучение влияния водного раствора на экстракцию ионного ассоциата антибиотиккраситель
4.2. Разработка методики определения концентрации бромтимолового синего в водных растворах
4.3. Исследование зависимости между концентрацией 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов в водном растворе и количеством красителя, связанного в ионный ассоциат с антибиотиком
4.3.1. Исследование зависимости между концентрацией 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов в водном растворе и оптической плотностью хлороформных экстрактов
4.3.2. Исследование зависимость между концентрацией 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов в водном растворе и разностью концентраций красителя в водном растворе до и после экстракции
5. Оценка воспроизводимости полученных результатов исследований
5.1. Оценка воспроизводимости разработанного метода выделения
4,6 замещенных 2 дсзоксистрептаминов экстракцией с растворимым в органической фазе переносчиком
5.2. Оценка воспроизводимости разработанного экстракционнофотометрического метода определения концентрации 4,6 замещенных 2дезоксистрептаминов
III. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
IV. ВЫВОДЫ
V. СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
VI РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
VII. БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
VIII. ПРИЛОЖЕНИЯ
Перечень сокращений, условных обозначений, символов, единиц и терминов
А оптическая плотность
4,6 замещенные 2дезоксистрептамины гентамицин,
БКЗ тобрамицин,апрамицин бромкрезоловый зеленый
БКП бромкрезоловый пурпурный
БТС бромтимоловый синий
БФС бромфеноловый синий
ВФС временная фармакопейная статья
ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография
ГЛС готовое лекарственное средство
ГСО Государственный стандартный образец
ГФ Государственная фармакопея
ДЦСН додецилсульфат натрия
ДБСН додсцилбеизолсульфонат натрия
кж культуральная жидкость
кк карбамоилканамицин В
КТ карбамоилтобрамицин
м молекулярная масса
НБК нсбрамициновый комплекс
НД нормативная документация
НИИА научноисследовательский институт антибиотиков
нативный раствор
олеиновая кислота
ПАВ поверхностноактивные вещества
Переносчик органические соединения, используемые для экстракционного выделения гидрофильных органических соединений из водных растворов ПНСК гюлинонилнафталинсульфокислота
СК сульфофталеиновые красители
СТК стеариновая кислота
СТП стандарт предприятия
СФН сульфонол
ТДСН тетрадецилсульфат натрия
Технологический раствор водный раствор культуральная жидкость, нативный раствор, элюаты, содержащий 4,6 замещенные 2дезоксистрептамины гентамицин, тобрамицин, апрамицин
ТС тимоловый синий
УК ундециледовая кислота
УФ ультрафиолетовая область спектра
ФС фармакопейная статья
ФСП фармакопейная статья предприятия
ХЭ хлороформный экстракт
ЦВТП БЗ ИИМ МО РФ, Центр ВТП БЗ, Центр Центр военнотехнических проблем биологической защиты научно исследовательского института микробиологии Министерства Обороны Российской Федерации
ЭФМ экстракционнофотометрический метод
X длина волны поглощения, нм
Б критерий Фишера.
ВВЕДЕНИЕ


Выпуск качественных препаратов АМГ вызывает в свою очередь необходимость наличия высокоэффективных и экспрессных методов выделения и очистки антибиотиков, позволяющих снизить материальные и временные затраты без снижения качества получаемых продуктов. Увеличение объема производства требует использования простых в технологическом исполнении и недорогих методов, позволяющих осуществлять эффективный контроль производства выпускаемой продукции. Как и в технологии получения, так и в физикохимических методах, используемых для контроля содержания АМГ в технологических растворах, их выделение и разделение осуществляется преимущественно сорбционными методами. Если на стадии выделения основной задачей является максимальное извлечение антибиотика из КЖ, то при контроле содержания их немаловажную роль играет достоверность и оперативность проведения анализа. Как метод выделения, ионообменная сорбция обеспечивает получение антибиотиков высокого качества без использования дорогостоящих пожаровзрывоопасных растворителей и дает возможность получать антибиотик из культуральной жидкости или из грубоотфильтрованных растворов. Наряду с несомненными достоинствами ионообменная сорбция обладает и рядом недостатков, например, использование громоздкого оборудования, занимающего большие производственные площади значительные затраты физического труда при обслуживании оборудования длительность и многооперационность процесса выделения и очистки большие потери и значительный расход реагентов воды, минеральных кислот и щелочей. Одним из направлений интенсификации процесса выделения является использование экстракционных методов, которые просты в исполнении, не требуют сложного и дорогостоящего оборудования и позволяют осуществлять процесс за короткие промежутки времени. В связи с этим, актуальность работы обусловлена необходимостью разработки эффективных и экспрессных способов выделения АМГ из водных сред, к которым относятся экстракционные методы, например экстракция с переносчиком. Цель и задачи исследований. Провести теоретическое и экспериментальное изучение процесса взаимодействия АМГ с переносчиками. Разработать оптимальные условия экстракционного выделения АМГ из водных сред с растворимым в органической фазе переносчиком. Оценить возможность выделения гентамицина и тобрамицина из нативного раствора. Оценить воспроизводимость разработанного метода экстракционного выделения и методики определения концентрации АМГ в технологических растворах экстракционнофотометрическим методом и произвести сравнительную их оценку с существующими методами. Научная новизна. Впервые проведено систематическое исследование процесса взаимодействия АМГ с рядом органических реагентов и на основе проведенных исследований выбраны оптимальные условия экстракционного выделения АМГ из водных сред и экстракционнофотометрического определения их концентрации технологических растворах. Впервые разработан метод экстракционного выделения гентамицина, тобрамицина и апрамицина с растворимым в органической фазе переносчиком. Впервые разработана универсальная методика определения концентрации АМГ в технологических растворах, основанная на определении разности концентраций красителя, связанного в ассоциат с АМГ, и свободного красителя. Практическая значимость работы. Разработанный метод выделения АМГ экстракцией с растворимым в органической фазе переносчиком позволяет сократить время проведения процесса выделения гентамицина в раз, тобрамицина в ,5 раз при сохранении количественного выхода полупродуктов. Разработанная методика определения концентрации АМГ экстракционнофотометрическим методом позволяет сократить время проведения анализа с до 2 часов, что дает возможность оперативно корректировать процесс производства. Публикации и апробация работы. Основные положения работы обсуждались на итоговых научных конференциях Центра ВТП БЗ НИИМ МО РФ г. Екатеринбург, гг. НИИ микробиологии МО РФ г. Киров, , на юбилейной научной конференции Центра ВТП БЗ г. Екатеринбург, , на V молодежной школе конференции по органической химии УрО РАН г. Методика определения концентрации АМГ экстракционнофотометрическим методом. Данные сравнительной оценки выделения АМГ экстракционным и сорбционным методами. Структура к объем диссертации.