Идентификация патогенных листерий с помощью полимеразной цепной реакции

• Автор: Жаргалова, Туяна Тумуржаповна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Щелково
• Количество страниц: 104 с. : ил

Анализ случаев заболеваний людей листериозом показал, что в основном болезнь наблюдается у лиц группы риска, со сниженной резистентностью организма беременные, пожилые, новорожденные дети. Факторами передачи при пищевой листериозной инфекции служат молоко и молочные продукты ,8 мясо скота и птицы ,2 овощи и салаты ,0 продукты моря рыба, креветки, морская капуста и др. По данным Котлярова В. М. , Бакулова И. А. и Красовского с соавт. Котляров В. М. с соавт. В 2,7 возбудитель был выявлен в смывах с элементов холодильного и торгового оборудования. Широкий спектр восприимчивых животных, а также людей, способность листерий длительное время сохраняться во внешней среде и продуктах питания определяют необходимость дальнейшего изучения природы возбудителя с целью разработки новых, более чувствительных и специфичных средств и методов идентификации патогенных листерий. В настоящее время для выявления и идентификации возбудителя листериоза широко используют микробиологические, серологические и биохимические методы, определение чувствительности к бактериофагам, а также постановку биопробы на лабораторных животных. Длительность, трудоемкость, недостаточная специфичность и чувствительность применяемых в настоящее время методов диагностики заставляет исследователей обратить особое внимание на разработку и внедрение в лабораторную практик новых высокочувствительных и специфичных методов идентификации генома возбудителя листериоза, позволяющих надежно выявлять листерии в объектах ветеринарного надзора. Указанные методы позволяют, прежде всего, выявлять не фенотипическое проявление, а непосредственно исследовать молекулярную структуру генома, выявлять генетическую вариабельность, устанавливать генегическую взаимосвязь штаммов и изолятов возбудителей, выделенных в разных регионах. В настоящее время в развитых странах индикацию возбудителя листериоза включили в государственную систему микробиологического контроля качества продуктов питания и разработан комплекс диагностикопрофилактических мероприятий для предотвращения заражения патогенными листериями людей из группы риска. В связи с вышеизложенным назрела необходимость проведения работ по идентификации возбудителя листериоза в объектах окружающей средыводе, почве, образцах патматериалов сельскохозяйственных животных, пищевом сырье, продуктах питания, смывах холодильного и торгового оборудования, а также в клинических материалах от больных людей. Цель и задачи исследований. Основной целью данной работы явилась идентификация патогенных листерий в клинических материалах и продуктах питания с помощью полимеразной цепной реакции. Провести оценку диагностической ценности полимеразной цепной реакции при анализе клинических образцов, продуктов питания и сырья животного происхождения. Охарактеризовать геномы различных штаммов ii и непатогенных листерий методом ii. Научная новизна. Определены оптимальные условия проведения полимеразной цепной реакции для идентификации патогенных листерий в клинических образцах и продуктах питания. Практическая значимость работы. Полученные результаты и разработанные методы используются для идентификации патогенных листерий в клинических образцах и продуктах питания для дифференциации различных видов листерий. По результатам экспериментов разработаны и утверждены директором института методические указания, которые используются в научноисследовательской и ветеринарной практике. Положения, выносимые на защиту. Выявление ДНК возбудителя . ПЦР в клинических образцах, продуктах питания с использованием праймеров, комплементарных генам вирулентности. Результаты исследований по определению геномного полиморфизма различных штаммов листерий методом ii. Апробация результатов исследований. Результаты проделанной работы доложены и одобрены Ученым Советом ВНИИВВиМ, опубликованы в сборниках трудов научных конференций Всероссийского научноисследовательского института ветеринарной вирусологии и микробиологии г. Публикации по работе. По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ.